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1、黄曲霉毒素分析方法——-免疫亲和净化柱/UVE法一、免疫亲和净化柱/UVE法简介: 利用德国LCTech品牌AflaCLEAN净化柱可以将黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2专一分离出来,然后用HPLC/FLD分别测定黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。二、免疫亲和净化柱/UVE法特点:l 专用AflaCLEAN净化柱使得样品制备与提取简单快速,成本低l 灵敏—HPLC可至30ppt—200ppt(黄曲霉毒素B1)。l 简便实用,衍生化没有衍生试剂消耗(通常柱后衍生均需要使用衍生试剂,分析成本高,操作麻烦,仪器故障率较高)l 回收率高三、免疫亲和净化柱/
2、UVE法操作步骤简介: 1、提取样品:研磨、称重50g样品;用甲醇/水(80/20V/V)混合物将样品高速混匀1分钟。 2、过滤:将提取的样品滤膜过滤,然后再过0.4μm滤膜。 3、吸附、淋洗:将滤液2ml加到8mlPBS缓冲液(pH7.2)后,通过AflaCLEAN净化柱,流速不大于1mL/min;用10ml水清洗亲合柱;用甲醇1ml两次将黄曲霉毒素从亲合柱上淋洗下来,并收集于HPLC进样小瓶中。 4、测定:HPLC直接进样,在经过柱分离后,被UVE衍生化,被荧光检测器记录各种黄曲霉毒素的浓度。四、UVE™和HPLC参数 UVE™波长:2
3、54nm HPLC-柱:150x4.6mm;C-18 洗提液:水/乙腈/甲醇 (60/15/30//v/v/v) 流量:1.0mL/min 柱温:30°C 进样体积:20–100μL λ-激发波长:365nm λ-发射波长:440nm五、主机配置德国LCTech公司UVE™主机,配有1ml反应池,9v紫外灯254nl UVE™主机 黄曲霉素免疫亲和AflaCLEAN净化柱 黄曲霉素ELISA试剂盒以下为德国LCTech公司黄曲霉素相关产品订购信息:以下为德国LCTech公司黄曲霉素相关产品订购信息:产品货号产品名称及规格数
4、量10514AflaCLEAN™,AflatoxinsB1,B2,G1,G225columns/pck3mL,wideborecolumn黄曲霉素3ml净化柱,25支/包1盒11022Afla-OtaCLEAN™,AflatoxinsB1,B2,G1,G2&OchratoxinA25columns/pck 3mL,wideborecolumn黄曲霉素-赭曲霉素二联3ml净化柱,25支/包1盒11139AflaREAD™,ELISAKit(96-wellplate/stripes) fordetectionofAflatoxinB1infoodandfeedsa
5、mples黄曲霉素ELISA试剂盒包,96孔1盒10837Standard,Solutionof4differentaflatoxinsinacetonitrileB1,G1,B2,G2,5mL/VialPackaging:amberglassampule;BRM002021;Storage:darkandcoolat4°C黄曲霉素4种异构体混合标样。5ml装,4度阴暗保存1盒10519UVE™PhotochemicalReactorforAflatoxinAnalysis;254nmlamp;readytouse,CE-certification,240VA
6、C,50HzUVE UVE柱后衍生系统,254nm紫外灯1套10522HPLC-ColumnforAflatoxinAnalysis,ReversedPhaseC18150x4,6mm 黄曲霉素专用HPLC柱1根10750预柱卡套1个10523HPLCcolumn(3pcs)C188x4mm 预柱1根10896黄曲霉素LCTech免疫亲和柱专用玻璃漏斗,用于贮存需要过柱的液体样品,2个/包1包10081玻璃漏斗夹子1个12671Freestyle单通道全自动SPE固相萃取系统主机(不含配件及消耗品)1套 11020AcceCLEANTM,robotic
7、systemforhandlingofLCTechIAC-columns,upto30samples 全自动LCTech免疫亲和柱三通道自动SPE系统,标准系统可达30位样品(不含配件及消耗品)1套11146EluVac™, 20位手动固相萃取套件,包含主机,10位样品盘(用于玻璃漏斗10896)和60ml收集盘1套11147EluVac™,20位手动固相萃取装置,包含主机,10位样品盘和6位100ml椎底烧瓶收集盘1套11125防腐蚀化学真空泵1个