高中生物 实验6α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测辅导教案 浙科版

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1、辅导教案导学诱思一、酶与固定化酶1.酶:活细胞产生的具有催化作用的一类有机物,它是生物体内各种化学反应的催化剂。2.固定化酶:将________的酶用________或________方法________,使之成为________而又有________。3.将酶改造成固定化酶的原因是:由于酶________,且不利于________,所以要将酶改造成固定化酶。4.酶固定化的方法有:________法、________法、________法和________法等。本实验用的是________法。5.固定化酶作用的机理:将固定化酶________,当________时,

2、在________的作用下________。答案:2.水溶性 物理 化学 固定在某种介质上 不溶于水 酶活性的制剂3.在水溶液中很不稳定 工业化使用4.吸附 共价偶联 交联 包埋 吸附5.装柱 底物经过该柱 酶 转变为产物二、淀粉水解的过程及其在淀粉指示剂下的颜色反应:答案:糊精 蓝 红 不显三、α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测的实验1.实验目的:(1)制备________。(2)进行________的测试。2.实验原理:将________酶固定在________上,一定浓度的淀粉溶液经过________后,可使淀粉水解成________。用________测试,

3、若流出物呈________色,表明有________生成。3.本实验使用的酶及特性:本实验使用的酶是________酶,其作用的最适宜pH为________,最适宜温度为________。4.实验设备及用品:5mL塑料注射器、50mL烧杯、滴管、自行车用气门芯及夹子、注射器架、试管或微量离心管3支。5.实验材料及其制备:(1)材料:固定化的α淀粉酶、可溶性淀粉酶、5mol/LKI—I2溶液。(2)部分材料的制备:▲α淀粉酶的固定化:在烧杯中将5mg________溶于4mL蒸馏水中(由于________,可能有些不溶物)↓再加入5g________,不时搅拌30mi

4、n↓30min后将上述溶液装入1支注射器中(该注射器的下端接有________并用________封住)石英砂体积约4mL↓用________倍体积的蒸馏水________此注射器以除去__________________,流速为1mL/min▲可溶性淀粉溶液:取________mg可溶性淀粉溶于100mL________中,搅拌均匀。▲可溶性淀粉溶液:称取0.127g________和0.83g________。加蒸馏水100mL,完全溶解后装入滴瓶中。6.实验步骤:(1)淀粉溶液流经固定化酶柱将灌注了________的注射器放在注射器架上,用滴管加_______

5、_溶液,使该溶液以________mL/min的流速过柱。(2)接取流出物待从固定化酶柱中流出________mL的溶液后,接收________mL流出液。(3)流出物鉴定在流出物中加入________溶液,观察颜色。用水稀释________倍后再观察颜色。(4)洗涤、保存固定化酶柱。实验后,用________倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱。放置在________℃冰箱中保存。(5)几天后取出冰箱中该固定化酶柱,重复实验,观察结果。7.实验结果的比较:答案:1.(1)固定化α淀粉酶 (2)淀粉水解2.α淀粉 石英砂 固定化酶柱 糊精 淀粉指示剂红 糊精3.枯草杆菌的α淀粉

6、 5.5~7.5 50~75℃5.实验材料及其制备:(2)α淀粉酶 酶不纯 石英砂 气门芯 夹子 10洗涤 未吸附的游离淀粉酶 50 热水 碘 碘化钾6.(1)固定化酶 淀粉 0.3 (2)5 0.5 (3)KII21 (4)10 47.蓝 红 红核心解读HEXINJIEDU1.酶与固定化酶一样吗?相对酶而言,固定化酶有什么优点呢?不完全相同,固定化酶是酶的衍生物。酶是活细胞产生的具有催化作用的一类有机物,它是生物体内各种化学反应的催化剂,而固定化酶是将水溶性的酶用物理或化学方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。固定化酶的优点:①使酶固定化后有一

7、定的机械强度,催化反应的过程可管道化、连续化和自动化。②酶不溶解在催化反应的溶液中,产物更易纯化。③固定化酶可反复使用,更经济,更利于工厂化生产。④固定化酶提高了酶的稳定性,可较长时间地贮存和使用。固相酶是在20世纪60年代发展起来的一项技术,很快就得到了广泛的应用。2.如何证明洗涤固定化淀粉酶柱的流出液中没有淀粉酶?可在试管中加入1mL可溶性淀粉溶液,再加入几滴淀粉酶柱的流出液,混合后用手握住试管增加温度,几分钟后加1~2滴KI—I2指示剂,如仍显蓝色,即流出液中没有淀粉酶了。用固定在石英砂上的淀粉酶柱再作用于淀粉溶液,使其自柱中流出,作用的结果才能表明是淀粉

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