“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”实验改进

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1、2014年第49卷第3期生物学通报51“一淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测"实验改进徐平珍(浙江省镇海中学浙江宁波315200)摘要新课程标准倡导探究性学习．实验是学习生物技术的有效途径之一。本实验按照教材中的实验步骤需要2h左右，无法满足高中课堂教学要求。另外本校前几届师生根据此步骤进行实验，收集的流出液加入碘液混匀后显黄色而非红色。从搅拌时间、蒸馏水洗涤的体积、流速控制等方面对本实验进行了改进．将实验时间控制在30min左右，以便学生在课堂中完成相关实验：并对以往实验中遇到的一些疑问进行了探讨。关键词淀粉酶实验改进中国图书分类号：Q-

2、33文献标识码：B生物技术是一门既古老又现代的技术，而且操作的技能。笔者对本实验进行了适当改进，使学涉及的范围极为广泛。如酿造工业的产品——酱生能在课堂时间内完成相关实验，此外对以往实油、醋、酒等。是人们日常生活中的必需品。由于验中遇到的一些疑问进行了探讨。生物技术的迅猛发展，每年都需要消耗大量的生1实验材料物酶制剂，淀粉酶作为一类重要的生物催化剂，在仅一淀粉酶、可溶性淀粉、石英砂、碘、碘化钾、医药、化工、食品及饲料添加剂等领域都有广泛的5mL一次性注射器、铁架台、烧杯、天平、滴瓶、玻应用，其产量几乎占据整个酶制剂总产量的璃棒、绳子、量筒、

3、试管、试管架和冰箱。50％，且需求量越来越大⋯。但是，酶在水溶液中2实验方法很不稳定，容易受到酸、碱和有机溶剂的影响，而2．1试剂的配制且溶液中的酶很难回收．不能再利用．反应后酶混①O．5％淀粉溶液：称取0．5g可溶性淀粉溶在产品中又可能影响产品质量这些因素影响了于100mL热水中，搅拌均匀。酶工业化的应用，而固定化酶技术能很好地解决②5mmol／LKI—I溶液：称取0．127g碘和这些问题O．83g碘化钾，加蒸馏水100mL，完全溶解后装“仅一淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检入滴瓶中。测”是浙科版生物学选修1“生物技术实践”模块2．2相关

4、装置的制作利用5mL一次性注射器中第2部分“酶的应用”实验6的内容，也是《浙和医用输液器制作固定化酶柱(图1，见封三)，拆江省生物教学指导意见》中提出的学生需要掌握取一次性输液器注射细软管部分，将剩余塑料软的7个实验之一。选修课“生物技术实践”，是一管上的控制阀安装于细软管处，以便通过调节控门以自己动手做实验为主的课程。而本实验按照制阀控制细软管中溶液的流速，这样就制成了一原实验步骤需要2h左右，在高中教学安排中很个价格低廉且实用的固定化酶柱。在灌注前将难满足此要求。另外按照教材中的实验步骤进行剪好的近圆形小布片放人注射器底部作为筛板，实验

5、，得不到理想的实验结果，本校教师和前几届防止柱内的石英砂从底部漏出。学生在实验中观察到流出液加碘液混匀后溶液显2。3具体实验步骤黄色而非红色。《生物课程标准》的基本理念之一①仪一淀粉酶的固定化方案如下：是倡导探究性学习，实验是学习生物技术的有效甲组：在烧杯中将5mg0【一淀粉酶溶于4mL途径之一。教师应尽可能为学生提供或创造动手蒸馏水中，再加入5g石英砂，不时搅拌。30min操作的机会，通过亲手操作。学生在实践中学习新后装入固定化酶柱中，然后置于4℃冰箱中保存知识，并使知识得到延伸，同时也能学习相关实验过夜。52生物学通报2014年第49卷

6、第3期乙组：在烧杯中将5mgOt一淀粉酶溶于4mL丁组实验结果如图2(见封j)所示。蒸馏水中，再加入5g石英砂，不时搅拌。10min甲、乙、丙、丁4组实验结果均能观察到流出后装入固定化酶柱中。然后置于4cc冰箱中保存液遇碘液显红色的现象，因此从实验结果方面考过夜。虑．这4组实验方案均可行。从实验时间及学生的丙组：在烧杯中将5mg仪一淀粉酶溶于4mL参与度方面考虑，丁组的实验方案最佳，其实验只蒸馏水中，再加入5g石英砂，不时搅拌。30min需30min，完全满足课堂时间完成整个实验的要后装入固定化酶柱中。现用现配制及装柱。求。且学生能参与淀粉

7、酶的固定化和淀粉水解的丁组：在烧杯中将5mg仪一淀粉酶溶于4mL整个过程。用蒸馏水洗涤酶柱后至无蒸馏水残留，蒸馏水中，再加入5g石英砂，不时搅拌。10min关闭控制阀置于4℃冰箱保存3d后，利用该使用后装入固定化酶柱中。现用现配制及装柱。过的固定化酶柱重复上述实验，取得相同结果，证②将固定化酶柱用绳子固定在铁架台上，调实了固化酶具有可重复使用的优点。整高度，下方用烧杯接收留出的液体。打开控制对本校教师和前几届学生在实验中观察到流阀，使酶柱中剩余的酶液流出。出液加碘液?昆匀后溶液显黄色的问题，笔者也做③用量筒量取l0倍柱体积(50mL)的蒸馏

8、水。了一些探究。不论淀粉酶固定化是过夜、现制备，将蒸馏水缓慢加至固定化酶柱中，直至加满，之后还是搅拌不同时间，若淀粉溶液流过固定化酶柱调节流速至lmL／min，约20滴／min。