课标高考总复习课堂强化训练：选修一 微生物的培养与应用(人教版)(1)

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1、1．(2009·广东，38)根据学过的知识回答下列问题：(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生__________，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可用植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间______________表示。(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图：发酵液―→―→―→―→―→―→纯酶　　　　　　　　　　　↓↓菌体去除　透析液(Ⅰ)去除Ⅰ中的主要成分为____________；Ⅱ

2、中包含多种酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(3)为建设基因工程菌，可用PCR等技术从

3、上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：________________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是________。(4)除植酸酶外，微生物还应用在________________________的生产中。答案　(1)透明圈　植酸钠的消耗量(肌醇和磷酸的生成量)　(2)小分子杂质凝胶色谱法，根据蛋白质之间分子大小、吸附性质等差异进行纯化。电泳法，根据蛋白质之间电荷、分子大小等差异进行纯化。(3)变性，复性，延伸　加热(4)蛋白酶，脂肪酶，纤维素酶解析　本题考查对微生物的分离和培养，蛋白质的纯化，酶

4、活性鉴定等知识，结合实际应用。2．利用纤维素解决能源问题的关键，是高性能纤维素酶的获取。请完善实验方案，并回答相关问题。【实验目的】　比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性。【实验原理】　纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖，用葡萄糖的产生速率表示酶活性大小；用呈色反应表示葡萄糖的生成量。【实验材料】　三种微生物(A～C)培养物的纤维素酶提取液，提取液中酶蛋白浓度相同。【实验步骤】(1)取四支试管，分别编号。(2)在下表各列的一个适当位置，填写相应试剂的体积量，并按表内要求完成相关操作。管号试剂(mL)　　1234蒸馏水1.41.41.4pH7

5、.5的缓冲液0.20.20.2纤维素悬浮液0.30.30.3微生物A提取液0.1微生物B提取液微生物C提取液0.1总体积2.02.02.02.0(3)将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时。(4)在上述四支试管中分别加入______________试剂，摇匀后，进行______________处理。(5)观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅。【实验结果】微生物A提取物微生物B提取物微生物C提取物颜色深浅程度＋＋＋＋＋＋【分析讨论】(1)该实验中的对照组是______________号试管。(2)实验组试管均呈现的颜色是

6、______________，但深浅不同。(3)上述结果表明：不同来源的纤维素酶，虽然酶蛋白浓度相同，但活性不同。若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异，其可能原因是______________。(4)你认为上述三种微生物中，最具有应用开发价值的是______________。(5)从解决能源问题的角度考虑，开发这种纤维素酶的意义在于______________。答案　实验步骤(2)管号试剂(mL)　　1234蒸馏水1.5pH7.5的缓冲液0.2纤维素悬浮液0.3微生物A提取液微生物B提取液0.1微生物C提取液总体积(4)班氏　加热(加热

7、至沸腾)【分析讨论】(1)4　(2)砖红色(3)不同酶的氨基酸序列不同(不同酶的空间结构不同)(4)微生物B(5)葡萄糖可用作制取酒精的原料；用纤维素代替化石能源(言之有理即给分)解析　本题实验目的是比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性。根据实验目的确定自变量为不同微生物提取液，因变量为葡萄糖的生成量，其余无关因素(如不同微生物的提取液量、pH7.5的缓冲液量、蒸馏水量和纤维素悬浮液量)应该等量。实验结果通过与班氏试剂共热生成砖红色沉淀的颜色深浅程度进行判断，分析实验结果可知，微生物B提取物与班氏试剂发生颜色反应最深，最具有研究价值。该

8、实验采用的是空白对照，即不加任何微生物提取液的4号试管为对照组。不同来源的纤维素酶，虽然酶蛋白浓度相同，但活性不同。若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异，其可能原因是不同酶的空间结构不同。开发纤维素酶的意义