生物的制药工程的下游技术

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1、实用标准文案一、概念1、生物制药：是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体液等，利用生物技术的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。2、基因工程：是指在体外按既定的目的和方案，将一目的基因片段，与载体结合，构成DNA重组体，随即引入受体细胞中，随细胞繁殖而扩增，同时也可进行基因表达，产生特定的基因产物或新性状的遗传物质的技术。3、载体：是携带外源DNA片段进入宿主细胞进行扩增和表达的工具，载体本质是DNA。4、质粒：是染色体外能自主复制的双链闭环DNA分子。5、沉淀：是溶液中的

2、溶质由液相变成固相析出的过程。6、盐析：是一种根据蛋白质在高浓度盐溶液中的溶解度低的特点来分离蛋白质的方法。7、等电点沉淀法：是利用蛋白质在等电点时溶解度最低而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。8、凝胶过滤层析：是以多孔性凝胶填料为固定相，按分子大小顺序分离样品中各个组分的液相色谱方法。9、离子交换层析：带有不同电荷的物质，对层析柱中的离子交换剂亲和力不同，通达改变冲洗液的离子强度和pH值，将物质依次从层析柱中洗脱分离出来的方法。10、亲和层析：就是根据生物大分特异性的分子识别建立的一种纯化方法11、膜分离：在压力

3、、电场或温差作用下，某些物质可以透过膜，而另些物质则被选择性的拦截，从而使溶液中不同组分，或混和气体的不同组分被分离,这种分子级的分离称为膜分离。12、电泳：在直流电场中，带电粒子向带符号相反的电极移动的现象称为电泳。13、分光光度技术：利用紫外光、可见光、红外光和激光等测定物质的吸收光谱，利用此吸收光谱对物质进行定性定量分析和物质结构分析的方法二、简答题1、现代生物制药下游技术包括哪些内容1.生物反应器及大规模细胞培养2.生物细胞破碎技术3.生物分子的分离纯化技术4.生物分子含量检测技术5.生物分子鉴定技术6.生物分子活性检测

4、技术2、基因工程基本操作过程包括目的基因的制备、基因载体的选择、DNA重组、DNA重组体的转化、重组体的筛选和鉴定、外源基因的表达3、生物化学样品制备特点⑴生物材料的组成极其复杂，常常包含有数百种乃至几千种化合物。⑵许多生物大分子在生物材料中的含量极微，分离纯化的步骤繁多，流程长。⑶许多生物大分子一旦离开了生物体内的环境时就极易失活，因此分离过程中如何防止其失活就是生物大分子提取制备最困难之处。⑷生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的，温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种组成的综合影响，很难准确估计和判断。⑸为保护所提取

5、物质的生理活性及结构上的完整性，生化分离方法多采取温和的“多阶式”进行（常说逐层剥皮式）。常常少至几个多至几十个步骤，并不断变换各种分离方法，才能达到纯化目的4、生化分离制备实验设计基本思路⑴确定要制备的生物大分子的目的和要求，是进行科研、开发还是要发现新的物质。⑵建立相应的可靠的分析测定方法，这是制备生物大分子的关键。⑶通过文献调研和预备性实验，掌握生物大分子目的产物的物理化学性质。⑷生物材料的破碎和预处理。⑸分离纯化方案的选择和探索，这是最困难的过程。⑹生物大分子制备物的均一性（即纯度）的鉴定，要求达到一维电泳一条带，二维电

6、泳一个点，或HPLC和毛细管电泳都是一个峰。⑺产物的浓缩，干燥和保存。5、蛋白质盐析的原理及优缺点原理：精彩文档实用标准文案蛋白质是由疏水性氨基酸和亲水性氨基酸组成的，在水中蛋白质折叠后，由亲水性氨基酸与周围的水分子形成水化膜，因此，蛋白质在水溶液中的溶解度是由它周围亲水基团与水形成水化膜的程度，以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。当用中性盐加入蛋白质溶液，盐对水分子的亲和力大于蛋白质，致使蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消失。同时，在蛋白质溶液中加入盐后，由于离子强度发生改变，蛋白质表面电荷大量被中和，更加导致蛋白溶解度降低，

7、使蛋白质分子之间聚集而沉淀，实际上是一个去水化的过程。优点：操作简单成本低廉适用范围广环境温和不易造成蛋白质失活缺点：分辨能力差.纯化倍数低沉淀中含盐分较多6、离心操作时应注意哪些事项1、首先应根据实验需求选择合适的转子和转速，不要超过转子和离心机限定的最高转速。2、使用各种类型的离心机都应该在托盘天平上精确配平，平衡时重量之差不得超过各个离心机说明书上所规定的范围，配平后对称放置在转子中。3、装载溶液时，要根据转速和液体性质选择合适的离心管，确保离心管能承受住，仔细观察离心管有无裂痕或沙眼，以免离心时液体渗出；如液体进入转子造

8、成离心机腔内污染，应立即将之取出，擦拭干净。4、若要在低于室温的温度下离心时。转头在使用前应放置在冰箱或置于离心机的转头室内预冷。5、启动离心程序后要等离心机达到预设转速平稳运行后才能离开离心机；如有异常的声音应立即停机检查，及时排除故障。7、举出4种以上的细胞