工艺金芪降糖片对链脲佐菌素损伤大鼠胰岛β细胞的保护作用及机制研究

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1、目录中文摘要英文摘要英文缩写研究论文新工艺金芪降糖片对链脲佐菌素损伤大鼠胰作用及机制研究习l{’々I甬．··第一部分新工艺金芪降糖片对链脲佐菌素致大鼠胰岛的保护作用及机制研究前言月I]吾．．．．．．1j13材料与方法13结果19附图、附表22讨论．．．．．．．．．31小结．．．33参考文献34第二部分新工艺金芪降糖片对链脲佐菌素损伤离体大鼠原代胰岛B细胞的保护作用．前言刚舌．．．．．．j，37材料与方法37结果42附图、附表44讨论．．．47小结48参考文献48第三部分新工艺金芪降糖片对链脲佐菌素诱导INS．1细胞凋亡及Bcl

2、．2与Bax表达变化的影响前言月【l看．．．．．．．．．515l材料与方法51结果6l附图、附表65讨论72小结75参考文献75结论78综述80致谢92个人简历94中文摘要新工艺金芪降糖片对链脲佐菌素损伤大鼠胰岛13细胞的保护作用及机制研究摘要目的：研究新工艺金芪降糖片对链脲佐菌素(STZ)损伤大鼠胰岛p细胞的保护作用，并对其作用机制进行初步探讨。方法：本实验总体设计分为三个部分，按实验对象划分为：大体动物实验、原代胰岛p细胞实验与INS．1细胞株实验。1．大体动物实验：取健康雄性SD大鼠48只，体重180土109，适应性喂养

3、3日后，随机分为6组，每组8只，分别为：正常对照组(C)、模型中文摘要3．INS．1细胞株实验：①将INS．1细胞接种于96孔板常规培养，待贴壁后同上法分组给药，37℃，5％C02条件下同步培养，每日换液。于给药后第l，2，3，4，5，6日进行MTT试验检测细胞活力，绘制细胞生长曲线。②用事先铺好玻片的24孔板制作细胞爬片，同法分组给药加以培养，72h后，进行Hoechst33342染色与AO．PI染色，观察细胞凋亡的形态学改变。③同法分组，于100ml培养瓶中按上述所列终浓度加药培养INS．1细胞，72h后收集细胞，采用流式

4、细胞术检测细胞凋亡率。(至)RT-PCR检测凋亡相关基因Bcl．2与Bax的mRNA表达。(9Westem．Blot检测凋亡相关基因Bcl．2与Bax的蛋白表达。结果：1．大体动物实验：①新工艺金芪降糖片高、中剂量组(H、M)在pi给予STZ后，相对于正常对照组(C)日均饮水量逐渐增加(P

5、含量逐渐下降(P

6、形态有所改观，Bcl．2和Bax染色积分光密度(IOD)均有明显不同(P

7、糖片高、中剂量组(H、M)细胞增殖作用相对明显，且呈现剂量依赖关系。(至)Hoechst33342染色与AO—PI中文摘要染色显示：新工艺金芪降糖片高、中剂量组(H、M)较模型对照组(S)均有不同情况改观，凋亡和坏死细胞数量相对较少。③流式细胞术检测报告显示：新工艺金芪降糖片高、中、低剂量组(H、M、L)凋亡率均低于模型对照组(S)。@RT-PCR结果显示：与模型对照组(S)比较，新工艺金芪降糖片高、中剂量组(H、M)Bcl．2基因mRNA呈现高表达(P

8、作用更加明显(P