反应型荧光法测定多巴胺和谷胱甘肽的研究分析

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1、青岛科技大学研究牛学位论文\IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIY2553130反应型荧光法测定多巴服和谷脱甘肤的研究摘要随着生命科学的发展，人们对多巴肢(DA)和谷肮甘HÀ(GSH)两种生物小分子在生命科学中的重要作用了解的越来越多，因此建立快速、准确和简便的多巳服和谷肮甘肤的检测方法对生命科学和临床医学等领域都具有重要的意义。荧光分析法因其灵敏度高、选择f性哇好、简单快速H)应监用于生物小分子的检测中。本文利用多巴肢和谷脱甘HÀ与荧光特异性试剂的反应，结合荧光技术建立了两种多巳胶和三种谷肮甘HÀ测定新方法。本论文主要分为以卡.五个

2、部分:(1)利用Mn2+f崔化DA生成的四日类化合物与具有强荧光性质的2，3-二氨基吩嗦(DAP)缩合，使DAP荧光狞灭，通过测定DA加入前后荧光强度变化运量检测DAoDA浓度在2.0x10-6M6.lx10-5M范围内与荧光强度战变量呈线性关系，检测限是1.76xlO-6M。(2)利用乙二醒作为荧光衍生剂与DA反应生成强荧光物质测定DAoDA的浓度在1.0x10-71.0x10-5M范围内与荧光强度呈线性关系，检出限为3.35xl0-8Mo+(3)利用茜袁红CARS)在BR中有强的荧光发射，CU2可猝灭ARS在++BR缓冲榕液中的荧光，而GSH的琉基与Cu

3、2的强络合作用可使体系荧光恢复，根据荧光强度定量的检测GSHo在pH6.3的BR缓冲溶液中，菌素红_Cu2体系荧光强度的增强值与GSH的浓度在1.0xl0-51.9xlO-4M范围内呈线性关系，检测限为1.0xl0-5Mn(4)Hg2+可以猝灭1，8-惠二磺酷甲脏的荧光，加入GSH后，由于GSH所带的琉基(-SH)和Hg2+里强的结合作用，夺取了与1，8一惠二一醋酷甲肢络合的Hg2+，体系的荧光强度增大，据此可快速的测定GSHo1，8一惠工横M:甲肢体系荧光强度的增强值与GSH的浓度在2.5xlO-63.5xto-5M范围内呈线性关系，检测是1.68xlO-

4、6Mo(5)合成的5-(2-甲墓-4-二氟甲基-哇哇-5-基)-[1，3，4]唾二l唾-2-基肢(MTA)具有强荧光，并能与Hg2+发生络合作用，GSH中的琉基与Hg2+里强的络合作用能使MTA荧光恢复，据此检测GSH。体系荧光强度的变化量与GSH的浓反应型荧光法测定多巴胺和谷胱甘肽的研究度在1．OxlO‘5～5．Oxl04M范围内呈线性关系，检测限为6．0xlO"6M。关键词：多巴胺；谷胱甘肽；2，3．二氨基吩嗪：乙二醛；茜素红；l，8一蒽二磺酰甲胺；5·(2·甲基4-三氟甲基-噻唑．5．基)．[1，3，4】噻二唑．2．基胺；荧光分析法II青岛科技大学研究

5、生学位论文STUDIESONTHEDETERMn哪IONOFDOPAMINEANDGLU丑玎HIONEBASEDONREACTI、厂EFLUORESCENCEMETHODABSTRACTWiththedevelopmentoflifescience，theimportantroleinlifescienceofbiologicalsmallmolecules，suchasdopamine(DA)andglutathione(GSH)，werewidelyrecognizedbypeople。Therefore，establishingrapid，accura

6、teandconvenienttestingmethodofdopamineandglutathioneonlifesciences，clinicalmedicine，andotherfieldshasimportantsignificance．Duetothehi班sensitivity,goodselectivity,theadvantagesofsimpleandgoodstability,fluorescenceanalysismethodhasbeenwidelyappliedinthedetectionofbiologicalmolecules．

7、Inthisthesis，twokindsofdopamineandthreekindsofglutathionedeterminationmethodswereproposedbasedonspecificityoffluorescentreactionbetweendopamine，glutathioneandfluorescentreagent．Thisthesismainlydividedintothefollowingfiveparts：(1)Afluorescentstrategyfordopamine(DA)detectionispropose

8、dusingthe2，3-diaminophenaz