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时间:2018-12-11
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1、遵义医学院硕士学位论文雌激素及孕激素对ER、PR阴性的子宫内膜腺癌细胞系JEC的作用英文缩略词表FCM:flowCytometry流式细胞术OD:opticaldensity吸光度PBS:PHosPHatebufferedSaline磷酸盐缓冲液MTT:3·(4,5一dimethylthiazol-2-y1)-2,5-diPHenyltetrazpliumbromide3—4,5.二甲基噻唑.2,5二苯基四氮唑溴盐ER:estrogenreceptor雌激素受体E2:17--pestradiol雌二醇PR:progestinreceptor孕激素受体
2、’P:progesterone孕激素HEPES:N一2-hydroxyethlpiperazine-N’一2一ethanesulfonicacidN-2.羟乙基哌嗪-N'-2乙磺酸FCS:freshcalfserum新生小牛血清DMSO:dimethylsulPHoxide二甲基亚砜FITC:Fluorescein-isothiocyanate异硫氰酸荧光素CLSM:laserscanconfocalmicroscope激光扫描共聚焦显微镜HE:Hematoylin--eosin苏木精一伊红染色遵义医学院硕上学位论文雌激素及孕激素对ER、PR阴性的予
3、宫内膜腺癌细胞系JEC的作用遵义医学院硕士研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。学位论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在学位论文中作了明确的说明并表示了谢:既思0学位论文作者签名:签字日期:毋豸年o/月明遵义医学院学位论文版权使用授权书本人完全了解遵义医学院有关保留、使用学位论文的规定,即:遵义医学院有权保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权遵义医学院可以将
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5、中明教授摘要目的:探讨不同浓度的17.p雌激素(E2)及孕激素(P)对雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)阴性的子宫内膜腺癌细胞系JEC体外生长和裸鼠移植瘤的影响。方法:选用人子宫内膜腺癌细胞系JEC进行体外培养和体内试验采用Balb/c.nu裸鼠皮下注射JEC细胞,加入含不同浓度E2培养液,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术(FCM)和激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)的方法,观察子宫内膜腺癌细胞系JEC细胞的增殖活性、细胞周期时相变化和蛋白p38及[ca2+】的变化,并以ER和PRFE]性的子宫内膜腺癌细胞系Ishikawa细胞作对照;
6、体内试验用一定浓度肿瘤细胞注射入裸鼠皮下,次日分3组注射NS、E2及P连续一周,观察肿瘤的生长情况,测量肿瘤径线并计算体积,瘤体称重;用HE染色和图象分析观察瘤体病理学改变。结果:(1)MTT法观察细胞增殖:不同浓度的E2作用JEC细胞1天、2天、3天后,其OD值和对照组相比无明显差异,作用4天、5天后10‘7、10瑙和10母mol/L组OD值和对照组比较有差异(P<0.05),其中10。‘7mol/L组在第5天OD值与对照组比较有显著差异(P7、析:作用Ishikawa细胞4天、5天后,G0/G1期从63.56%、64.63%降低到48.54%、48.23%,S+G2/M期由36.44%、35.37%增NN51.46%、51.76%。(3)共聚焦显微镜测定细胞内蛋I刍p38的表达:10刁mol/L的E2作用JEC4天、5天后可使细胞内P.p38表达增加,平均荧光强度值与对照组相比有统计学意义(P<0.05);10。7mol/L的E2作用Ishikawa3天、4天后P.p38表达增加,与不加E2对照组比较有差异(P<0.05)。(4)共聚焦显微镜测定活细胞内[Ca2+】的变化,用荧光强度值比较8、,10。1mol/L的E2作用JEC4天后[Ca2+]的平均荧光强度值为102.84,明显高于对照组(P
7、析:作用Ishikawa细胞4天、5天后,G0/G1期从63.56%、64.63%降低到48.54%、48.23%,S+G2/M期由36.44%、35.37%增NN51.46%、51.76%。(3)共聚焦显微镜测定细胞内蛋I刍p38的表达:10刁mol/L的E2作用JEC4天、5天后可使细胞内P.p38表达增加,平均荧光强度值与对照组相比有统计学意义(P<0.05);10。7mol/L的E2作用Ishikawa3天、4天后P.p38表达增加,与不加E2对照组比较有差异(P<0.05)。(4)共聚焦显微镜测定活细胞内[Ca2+】的变化,用荧光强度值比较
8、,10。1mol/L的E2作用JEC4天后[Ca2+]的平均荧光强度值为102.84,明显高于对照组(P
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