藏红花球茎腐烂病的病原鉴定及药剂预防.doc

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1、藏红花球茎腐烂病的病原鉴定及药剂预防摘要：藏红花球茎腐烂病是贵州省种植基地的主要病害并造成了很大的经济损失，实验结果表明，该病害是由镰刀菌和炭疽菌引起的。笔者采用低毒、低残留杀菌剂即多菌灵(Bavistin)、百菌清(Daconil)、代森锰锌(Mancozeb)、甲基托布津(Topsin)进行药剂预防测定，结果表明多菌灵等能明显抑制或减轻腐烂病的发生。关键词：藏红花；药剂预防；腐烂病；镰刀菌；炭疽菌藏红花(CrocussativusL.)又称番红花、西红花，撒馥兰等，属鸢尾科番红花属多年生草本植物。因花丝中含有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神、健胃等功效的成分，具有疏经活络、通经化淤

2、、散淤开结、消肿止痛、凉血解毒、忧思郁结的作用，长期坚持服用可全面提高人体的免疫力的功效，故其具有较高的药用价值。此外，藏红花还可大量用于日用化工、食品、染料工业，是美容化妆品与香料制品的宝贵原料，球茎又可做为高档观赏花卉出售，因此，藏红花也具有较高的经济价值。在中国，已将其列入国家科技部重点开发项目，2002年又被国家中医药管理局列为重点发展的中药材品种。球茎腐烂病是我国藏红花生产上的重要病害，贵州省凯里信邦药材公司首次引种一定规模的藏红花就遭到该病害的侵染造成了很大经济损失，随着种植面积的扩大，球茎腐烂病也日趋严重，从而影响了球茎和藏红花的产量和品质，为了减轻病害对藏红花品质、

3、产量的影响，从而使其药用和观赏价值得以更好体现，也为了在生产各类名贵药材中更好地应用现代生物技术，本文对侵染藏红花球茎腐烂病的病原菌进行了病原鉴定及其药剂预防研究。1材料与方法1.1试验时间、地点室外试验于2006年10月在凯里信邦药材公司药材基地进行，室内试验于2006年11在凯里学院进行。1.2供试材料和供试药剂供试藏红花患病球茎由贵州省凯里信邦药材公司药材基地(室内)采集。供试药剂为50%多菌灵WP(Bavistin)(无锡市农药有限公司)、75%百菌清WP(Daconil)(重庆易丰科技发展有限公司)、50%代森锰锌WP(Mancozeb)(西安近代农药有限责任公司)、70

4、%甲基托布津WP(Topsin)(山东奥丰生物工程有限公司)。1.3方法1.3.1实地调查对贵州凯里信邦药材公司的藏红花进行实地调查，了解病害的种类、分布和为害状况。1.3.2症状的观察与描述症状的观察主要是对病组织的表面病斑形态、病部颜色、病斑的大小等方面进行观察和描述。1.3.3显微镜检查显微镜检查分为真菌病害标本和病原菌的显微镜检查两个方面，主要是观察菌丝体和其他营养体的结构、孢子的形态和着生方式、子实体的形态结构和产生部位等。同时，对部分病菌在多媒体教室数码显微镜下拍摄照片，进行记录。1.4实验方法1.4.1培养基的制备马铃薯蔗糖培养基(PSA)：马铃薯200g、蔗糖15～

5、17g、琼脂17～20g、水1000g，121℃，灭菌30min。1.4.2病原菌的分离和培养对病原真菌的分离采用组织表面分离法。先用70%的酒精对藏红花球茎病害的病斑部进行表面消毒处理，再轻过火焰一下，然后切去表皮，切取内部病健交界处的小块组织，移入PSA平板内培养基上，28～30℃条件下培养3～4d。待培养皿内病组织的周围长出菌丝体后，挑取先端菌丝，分别移置到新的PSA培养基上，依次重复多次，无菌条件下镜检是否获得纯培养，直至得到纯的病原菌进行纯培养，之后待菌落长出后挑取前缘菌丝，回接于牛肉膏蛋白胨和PSA斜面培养基上，在28℃温箱中培养，作为备用。1.4.3病原菌的鉴定将纯化

6、后的菌株点植于PSA培养基上，观察培养性状，镜检形态特征，测量其菌落生长速度，根据陈鸿逵、王拱辰的浙江镰刀志以及柏斯(Booth.1978)的镰刀菌鉴定方法，挑取培养一定时间的菌落，在显微镜下观察各种类型的孢子形态，并查阅文献作病原菌鉴定，同时，对部分病菌在多媒体教室数码显微镜下拍摄照片，进行记录。1.4.4药剂对病原菌的抑制测定本试验在PSA培养基上进行，共5个处理，每个处理重复3次。选取国内外常用杀菌剂:多菌灵(Bavistin)、百菌清(Daconil)、代森锰锌(Mancozeb)、甲基托布津(Topsin)，稀释至1000倍，然后向培养皿内移入1ml药液，再加9ml已灭菌

7、的培养基混匀。用于对照的培养皿内加无菌水1ml，再加9ml已灭菌的培养基混匀即可。移接一枚直径为5mm的菌苔置于平皿中央，28℃倒置培养2d后，测量菌落直径，重复3次求平均值;并计算药剂对菌落生长的相对抑制率。2结果与分析2.1症状观察与描述带菌球茎出芽时，芽头上出现黄褐色水渍状斑点，气温高湿度大时扩展很快，引起芽头腐烂而死亡。大田栽培根、球茎盘染病时产生黄褐色凹陷斑，边缘不整齐，后腐烂，鳞茎皱缩干腐。病斑椭圆形，略凹陷，病健交界很明显，大小为10～30mm。病斑部有