yaptaz在大鼠磨牙发育及颌骨缺损再生过程中的时空特异性表达

《yaptaz在大鼠磨牙发育及颌骨缺损再生过程中的时空特异性表达》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、CATALOGUEChineseabstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1Englishabstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4Abbreviation．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

2、．．．．．．．．．8Preface9PartIExpressionandlocalizationofYapandTazduringthedevelopmentofmandibularfirstmolarinrats．．11Materialsandmethods．11Results．．．．．．．．．．．．．．15Discussion．．17PartIIPreliminarystudyofTazduringtheprocessofjawregenerationinrats．．．．．．．．．．20Materialsandmethods．20Resul

3、ts．．．．．．．．．．．．．．25Discussion．．．．．．．．25Summary．．．28Figures．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29Reference．．42Acknowlegements．．．．．．．．．．46PublishedArticles．．47万方数据Yap／Taz在大鼠磨牙发育及颌骨缺损再生过程中的时空特异性表达研究生：张冰专业：口腔颌面外科学导师：徐欣中文摘要Yap(Yes—associatedprotein)是重要的转录共激活因子，位于Hippo信号通路下游，首次于1995年在果蝇体内发现。有研究报

4、道Yap在多种组织器官中均存在表达，例肠、肝脏及神经管等。Taz(transcriptionalcoactivatorwithPDZ．bindingmotif)是一个14．3．3结合蛋白，含有一个保守的WW结构域。Taz为Hippo信号通路下游另一个重要的转录因子，是Yap的旁系同源蛋白。经典的Hippo信号通路控制组织器官的大小主要是通过调控细胞的增殖以及凋亡来实现。文献研究证实Yap／Taz在调控器官大小、干细胞自我更新、增殖及分化等方面都发挥作用。近年来有关Yap在牙胚早期发育及小鼠切牙发育中的相关报道，但对于Yap在大鼠磨牙发育过程中的

5、研究尚未见相关报道，此外，Taz作为Yap的同源蛋白，是否参与牙齿的发育尚无研究，由此我们推测Yap／Taz可能在大鼠磨牙发育中具有特异性的表达。颅颌面骨与牙体组织的发育都源于神经嵴，在基因的表达上可能存在一定的相似性，颌骨是颅面部重要的解剖结构之一，研究发现Taz与Runx2相互作用可以提高Runx2的转录活性，促进成骨细胞的分化，在骨形成过程中发挥重要的作用，由此我们推测Taz与Runx2可能参与颌骨的修复再生过程。基于我们的推测，本研究分为两部分，第一部分以SpragueDawley大鼠为实验动物，通过免疫组化染色及实时荧光定量PCR观察

6、Yap／Taz在大鼠下颌第一磨牙发育过程中的时空特异性表达及检测Yap／Taz相对表达量的变化情况；第二部分构建SpragueDawley大鼠颌骨缺损模型，通过免疫组化染色及蛋白免疫印迹检测Taz及Runx2在大鼠颌骨缺损再生过程中的表达变化情况，为探究Yap／Taz在牙齿发育及颌骨组织再生中的作用提供理论依据。万方数据——————————__————————_——————————_————————————●——————●———————_——————————一一一坐查．茎兰堡主兰堡笙苎——第一部分Yap／Taz在大鼠下颌第一磨牙发育过程中的时空

7、特异性表达目的：建立SpragueDawley大鼠牙齿发育模型，观察Yap／Taz在下颌第一磨牙发育中的时空特异性表达。方法：10周龄SpragueDawley大鼠雌雄l：1合笼，次日检栓，阴栓出现的当天中午即为受孕0．5天。获取胚胎14．5(E14．5)、16．5和18．5天及新出生(PN0)、出生后3、7、14、2l和28天牙齿发育标本，通过常规固定、脱钙、脱水及石蜡包埋后，利用苏木素．伊红染色(HE染色)观察大鼠磨牙的发育形态及利用免疫组织化学染色观察Yap／Taz的时空特异性表达。此外，通过实时荧光定量PCR技术从基因水平检测Yap／T

8、az在出生后(PN0、PN4、PN7、PNl0)大鼠牙齿发育中相对表达量的变化。结果：(1)免疫组织化学染色结果：在E14．5和E16．5天，Yap／