nf-α对体外培养仔猪睾丸支持细胞中fasfasl表达的调节

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1、1㈣鞘MasterDissertationofSouthwestUniversityDiscipline：BasicVeterinaryScienceDirection：AnimalPhysiologyandBiochemistrySupervisor：Prof．WangXianzhongCandidate：ZhangHuiqiongChongqing，ChinaApr,2015万方数据独创性声明学位论文题目：!坠堕：垡盟笠生I墙差任猪皇翘童挂缉胞主里垒曼堡箜L麦鲨的调节本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中引用他

2、人已经发表或出版过的研究成果，文中已加了特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢。学位论文作者：铭会轭，签字日期：细心年6月co日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：拆保密，口保密期限至年月止)。学位

3、论文作者签名：能全胡、导师签名=谚终签字日期：弘7工年6月c口日签字日期：W，年钿fb日万方数据本研究受到(国家自然科学基金项目，31072183)的资助万方数据目录摘要．．IAbstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．III第一章文献综述．11TNF．Ⅱ的来源l2TNF一吐及其受体的分子结构和性质22．1TNF．c【的分子结构和性质．22．2TNF．旺受体的分子结构和性质．23TNF．IJ,受体介导的信号通路33．1TNF．n受体在激活信号通路中的作用．33．2TNF．0【受体激活的下游信号通路．44TNF．Ⅱ与MMPs的关系

4、84．1MMPs分类84．2MMPs表达和活性的调节．95‘rNF．cL与雌性生殖一1l5．1TNF一Ⅱ对卵巢局部功能的调节115．2TNF．0【对子宫内膜功能的调节115．3TNF．0【对妊娠的调节126TNF．13,与雄性生殖一126．1TNF．c【对睾丸局部功能的调节126．2TNF一(it对SCs功能的调节．．13第二章引言．．17第三章实验材料与方法191实验材料191．1实验材料．．191．2主要仪器和耗材．．191．3主要相关试剂．．201．4主要试剂的配制．．212实验方法232．1SCs的分离培养232．2TNF．c【对SCs增

5、殖的影响．．242．3细胞的同步化处理．．25万方数据2．4TNF．13,对SCs细胞周期的影响一252．5TNF．a对SCs凋亡的影响．．262．6TNF．if,对SCs中蛋白水平的影响。272．7TNF．c【对SCs中基因表达的影响～282．8TNF．Ⅱ对SCs下游细胞因子分泌的影响一313统计分析32第四章实验结果．．33lSCs的分离培养．．332总RNA完整性检测．．333荧光定量PCR扩增曲线和熔解曲线344TNF—Q对SCs增殖活力的影响．355TNF．if,对SCs细胞周期的影响．366TNF一0【对SCs凋亡的影响．377TNF

6、．a对SCs中Fas／FasL蛋白表达的影响．388TNF．0【对SCs中MMP．2／MMP．9蛋白表达的影响．399TNF一0【对SCs中Fas／FasLmRNA表达的影响3910TNF．if,对SCs中MMP一2／MMP．9mRNA表达的影响．．4011TNF．c【对SCs中TIMP．2／TLMP．1mRNA表达的影响一4112TNF．c【对SCs下游细胞因子分泌的影响41第五章讨论。43第六章结论．．47参考文献49致谢59在读期间参与的课题和发表的文章61万方数据摘要TNF．a对体外培养仔猪睾丸支持细胞中Fas／FasL表达的调节基础兽医

7、学硕士研究生张会琼指导教师王鲜忠教授摘要支持细胞(Sertolicells，SCs)是维持睾丸免疫豁免功能的重要体细胞，主要通过形成血睾屏障(BTB)、高表达FasL、分泌免疫抑制因子(如TGF．D、IL．1、IGF—II等)来实现其免疫豁免功能。肿瘤坏死因子(TNF)属TNFSFL家族成员，包括TNF一Ⅱ和TNF—B两种类型，睾丸中主要分泌的是TNF．O【。TNF．Ol通过与SCs上的受体结合，影响SCs分泌功能，调节FSH诱导的SCs生精功能和SCs参与的BTB的开闭及SCs免疫调节因子的分泌，进而影响SCs的各种功能。但目前TNF．0【是调

8、节SCs中Fas／FasL系统的表达的机制还不完善。本研究的目的是探索TNF．0【对SCs中Fas／FasL的表达的影响以及调节Fas／