e2f1、survivin和p53在口腔鳞癌组织中的表达及意义

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名：弘t新谤师签章：例矽尹二级学院领导盖章：1挑年妒≯7日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标

2、注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：秘t研毛导师签章：bIb年冬，万方数据目录中文摘要～1英文摘要”5英文缩写．．10研究论文E2F1、Survivin和P53在口腔鳞癌组织中的表达及意义前言月U舌ll1材料与方法．．12结果．．16附图．．18附表．．26讨论29结论～33参考文献”34综述E2F1的研究进展及其与肿瘤的关系一38致谢一48个人简历一49万方数据中文摘要E2F1、Survivin和P53在口腔鳞癌组织中的表达及意义摘要目的

3、：口腔鳞癌(oralsquamouscellcarcinomas，OSCC)是头颈部常见的恶性肿瘤之一，占颌面部恶性肿瘤的80％以上【l】。近年来其发病率有逐年上升的趋势。目前临床上的治疗方法以手术切除为主，辅以放疗或者化疗，但疗效不理想，预后差，术后5年生存率仅为60％左右【2】。因此深入了解口腔鳞癌的发病机制、早期诊断及预后分析显得十分迫切。E2F是1986年Rovesdi等在进行腺病毒E2启动子激活的研究时发现的一个新的细胞因子【3】。E2F家族成员有8个，包括E2F1到E2F8，其中E2F1被研究的最多，其在细胞周期调控和

4、细胞凋亡、增殖等方面都发挥着重要作用。目前已有一些研究证实E2F1在人类很多肿瘤中高表达，这表明E2F1发挥着癌基因的作用。但另外的一些研究却提示E2F1也可能具有抑癌基因的作用。E2F1在肿瘤形成中是起癌基因作用还是抑癌基因作用可能与肿瘤抑制途径有关，但其具体机制尚未完全清楚。Survivin是凋亡抑制蛋白家族中的一员，是目前发现最强的凋亡抑制因子【4】。其主要作用为：1抑制细胞凋亡2诱导细胞分化3参与细胞有丝分裂4促进血管生成。现在的研究表明，Survivin在绝大多数恶性肿瘤中高表达，而在成人大多数正常组织均测不到其表达。这

5、个特点使其近年来成为肿瘤治疗新的焦点。P53基因是1979年Lane等在SV40感染的小鼠细胞中发现的，它是人类肿瘤中最常发生突变的肿瘤抑制基因，在细胞周期的调控中起重要作用。本实验的目的是通过对口腔鳞癌组织病理标本进行E2F1、Survivin、P53的检测，了解E2F1、Survivin、P53在口腔鳞癌组织和正常粘膜组织中的表达情况，初步探讨其与口腔鳞癌临床特征和预后的关系，为口腔鳞癌的早期诊断、治疗及预后提供参考依据。方法：收集河北医科大学第四医院口腔科2013年1月至2014年12月期间52对手术切除的口腔鳞癌及其对应的

6、切缘正常粘膜组织标本。所有的口腔鳞癌患者术前均未做放疗或化疗。标本均为术后立即取材，分两万方数据中文摘要份，一份固定于4％甲醛溶液，石蜡包埋；另一份固定于70％酒精，4。C保存。1免疫组织化学检测E2F1、Survivin和P53在口腔鳞癌组织及正常口腔粘膜组织中的表达取各组包埋组织的蜡块，用石蜡切片机连续切片，厚度为49m，常规脱蜡至水，按照S．P试剂盒操作说明进行操作，通过镜下观察，比较各组间E2F1、Survivin和P53蛋白表达的差异是否有统计学意义。2流式细胞术测定E2F1、Survivin和P53在口腔鳞癌组织及正常

7、口腔粘膜组织中的表达取70％乙醇固定的标本，将其制作成单细胞悬液；加入E2F1、Survivin和P53一抗工作液，室温下孵育30分钟；加入羊抗鼠FITC．IgG二抗工作液，室温下静置1小时；机检。3结果判断标准3．1免疫组织化学E2F1、P53染色阳性为细胞核内呈现棕褐色的颗粒；Survivin染色阳性为细胞质或胞核中呈现棕黄色的颗粒。以免疫组化半定量法评价其表达。3．2流式细胞术蛋白表达定量分析以对数方式采集数据，以实验样品蛋白表达的平均荧光强度表示各组蛋白的含量。4统计学方法应用SPSSl3．0统计软件进行统计学处理，组间率

8、的比较采用贮检验、秩和检验，等级相关性比较采用Spearman相关性分析，P<0．05为有显著性差异，P<0．01为有极显著差异。结果：1免疫组化检测E2F1、Survivin和P53在口腔鳞癌组织及正常口腔粘膜组织中的表达E2F1在口腔鳞癌组织中