胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白w自杀性质粒的构建

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1、胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白W自杀性质粒的构建摘要：胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,APP)是一种能够引起猪传染性胸膜肺炎的细菌病原体，它给养猪业带来巨大的经济损失。外膜蛋白W(OmpW)在细菌的生命活动屮起着重耍作用，大量研宄表明OmpW与细菌的感染、耐药性以及分子调节等都有着紧密联系，因而阐明ompW基因对胸膜肺炎放线杆菌调节机制对于该疾病的防控具有重要意义。以胸膜肺炎放线杆菌ompW基因为研究对象，成功构建自杀性质粒pEM-OmpW,为构建胸膜肺炎放线杆菌OmpW突变株以及探究ompW基因

2、对胸膜肺炎放线杆菌分子调节机制提供了基础关键词：胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillusp1europneumoniae,APP)；外膜蛋白W;自杀性质粒中图分类号：Q813；S855.1文献标识码：A文章编号：0439-8114(2017)01-0157-03D0I：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.01.040ConstructingtheSuicidePlasmidofOmpWofActinobacilluspleuropneumoniaeCHENXia-bingl，CHENJiel,FUS

3、hu-1ini，2,HEBinl,SHAOZhi-yongl,YAOYan-fengl,YANGWen-hail,LIUWul,JINEr-guangl,TONGWei-wen1,TAOBi-fcil(1.WuhanInstituteofAnimalHusbandryandVeterinaryScience,Wuhan430208,China；2.SchoolofAnimalScienceandNutritionalEngineering,WuhanPolytechnicUniversity,Wuhan430023,China)Abstr

4、act:Actinobacillusp1europneumoniaeisthecausativeagentofporcinepleuropneumonia,ahighlycontagiousrespiratorydiseaseofpigwhichcausesseriouseconomiclosses.OutermembraneproteinW(OmpW)playsaveryimportantroleinthelifeactivitiesofbacteria.AlargenumberofstudieshaveindicatedthatOmp

5、Wiscloselyrelatedtobacterialinfection,drugresistanceandmolecularregulation.Therefore,itisimportanttoelucidatetheregulationmechanismofompWgeneinthepreventionandcontrolofthedisease.TheompWgeneofAPPwasstudiedandthesuicideplasmidpEM-OmpWwassuccessfullyconstructed,whichprovidi

6、ngthebasisofconstructingompWgenedeletionmutantandexploringOmpWregulatingthemolecularpathogenesisofAPP.Keywords:Actinobacillusplcuropncumoniac；OmpW；suicideplasmid胸膜肺炎放？杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,APP)是巴斯德科放线杆菌属的一种猪呼吸道病原菌，引起猪的传染性胸膜肺炎，临床上表现为纤维素性胸膜肺炎及出血性、纤维素性、坏死性肺炎等主要病理

7、学特征［1］。自1957年Pattison首次报道以来，该病在大多数养猪国家或地区流行，给全球的养猪业造成巨大的经济损失［2］。革兰氏阴性细菌外膜蛋白(OMPs)作为外膜中的重要成分，是细胞膜通透性与外排泵系统的直接承担者，在稳定细菌外膜的结构、适应胞内外环境和抵抗胞内杀菌机制等方血起着重要作用，与细菌的毒力有密切关［3］。在APP中ompW基因编码215个氨基酸的外膜蛋0,属于表面抗原2家族，其功能是未知的，该家族包括一些表达革兰氏阴性菌表面抗原的蛋白，为孔蛋白家族，形成桶状通道［4］。该基因在APP中高度保守，为全面了解其在不同血清型

8、APP中的作用机制提供了方便。本试验参照已测序APP血清3型几03菌株基因组序列，设计引物以APP4074菌株为模板，扩增ompW基因，并对其进行测序分析。成功构建APP外膜蛋GW自杀性质粒，