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时间:2018-12-09
《刺葡萄0943抗白腐病wrky调控因子功能分析》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、密级:论文编号:中国农业科学院学位论文刺葡萄0943抗白腐病WRKY调控因子功能分析FunctionResearchofWRKYTranscriptionFactorGenesfromVitisdavidii0943ResistanttoWhite—rotFungi硕士研究生:冯虎指导教师:刘崇怀申请学位类别:农业推广硕士专业领域名称:园艺培养单位:中国农业科学院郑州果树研究所中国农业科学院研究生院2015年6月万方数据l㈣㈣Y2787671Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertati
2、onFunctionResearchofWRKYTranscriptionFactorGenes“enestrom玢尹is∥Z尹isdavidifdavidZ09430943ResistanttoWhite-·rotFungiM.S.Candidate:FengHuSupervisor:LiuChonghuaiDegree:MasterofAgriculturalExtensionSpecialty:HorticultureJune2015万方数据独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以
3、标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生虢冯时间:ZolF6月7曰关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生虢易奶帆7_.olF年
4、6月1日导师签名:≯枷帆驴脾侈月7目万方数据中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目刺葡萄0943抗白腐病WRKY调控因子功能分析论文作者冯虎专业园艺研究方向不区分研究方向指导教师刘崇怀培养单位(研究所)郑州果树研究所硕(博)姓名职称单位专业签名导师评硕导口\\博导口阅硕导口\\人博导口博导仞撇答辩撇教授硕导口斜础缮撕支州主席珲恤解测矾终从硕导口嘏搬教授博导日j蝴旅旋硕导口:确蜮希蹲礅厶徽躺悯博导囝答硕导口巍强博导田裹产舛艄埘所礅芙鳓蒯何黼辩豫硕导口博导日有序爷\口至艨徽博导团黼委硕导口I∥哿外黼研。多朽绝椭研缀博导口芙附睇椭黼砸品南贝
5、硕导回’V’7硕导口\,lI博导口会议记录(秘书)傺俑/f磊论文答辩时间地点z口。;、歹凡,7别霸球棚季厉锌钎磅伽7万方数据摘要葡萄自腐病是由真菌ConJothyrJumdJplodJe_lla引起,是危害葡萄最严重的四大病害之一。刺葡萄是葡萄科葡萄属东亚种群的一个野生种,其对黑痘病、白腐病、炭疽病等具有很强的抗性已成为葡萄耐湿热、抗病育种的宝贵资源。刺葡萄0943是中国野生刺葡萄的一个单株,单性花雄株。本研究以黑比诺为对照,研究刺葡萄0943抗白腐病相关三个WRKY转录因子的功能。本研究的内容和结论如下:1.在刺葡萄0943和黑比诺叶片上接种白腐菌并观
6、察菌丝体生长情况,发现刺葡萄0943具有较强抗性。2.用同源克隆方法分别获得刺葡萄0943的转录因子VdWI?EY49,VdWRKY53和VdWRI(Y70基因的编码区和启动子区域,分析其序列特征,通过实时荧光定量检测其对白腐病菌和水杨酸诱导的反应,同时以感病的欧亚种黑比诺为对照,分析不同材料中的这些转录因子基因序列及表达差异。结果:来源于中国野生种质刺葡萄0943的VdWR](Y49,懈陋,和VdWRKYTO基因,在其编码区和启动子区域都有抗病基因的序列特征和位点特征,在DNA和氨基酸水平上与黑比诺中的相应转录因子VvWRKY49,VvWRI(Y53和
7、VvWRKY70有差异,这些差异可能造成了其功能的差异;受到葡萄白腐病菌侵染和水杨酸诱导后,刺葡萄0943中的WRKY基因的表达量和趋势与黑比诺不同。生物信息学分析结果表明,VvWRKY49.VvWREY53和VvWRKY70在葡萄抗病过程中起重要作用,VvWRKY49.VvWRKY53和VvWRIVY70基因受到白腐病菌侵染和水杨酸诱导后表达量增加。生物信息学分析和实时荧光定量表明在葡萄抗病途径中VvWRKY49,VvWRIO'53弄HVvWRKY70转录因子具有重要的生物学作用。VdWRKY70经过转基因功能验证表现出对白腐菌具有抗性。3.通过核定位
8、分析和拟南芥原生质体定位结果表明VdWRKY49不具备核定位功能没有定位到核中,
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