不同功率对hmme-pdt防龋效果及影响的实验分析

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1、天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的：龋病是一种由口腔中多种因素复合作用所导致的牙齿硬组织进行性病损，其特点是发病率高，分布广，世界卫生组织已将其与癌症和心血管疾病并列为人类三大重点防治疾病。研究龋病病因，寻找有效的防龋方法及途径是国内外学者关注的热点。本研究目的是探讨不同参数光动力疗法(Photodynamictherapy,PDT)在大鼠口腔龋齿预防中的作用以及对牙体组织、牙髓组织的影响，为进一步的临床应用提供指导。本研究应用体外培养的S．mutans菌悬液，对激光参数和光敏剂孵育时间、浓度进行优化，选择三组激光参数、最合适的孵育时间和

2、光敏剂浓度进行大鼠龋齿模型的光动力实验。方法：(1)S．mutans于常温下复苏，37℃恒温培养箱厌氧培养24h，使其菌落数达到l×108CFU／ml，待用。(2)将S．mutans茵悬液加入到96孔板内，每孔100J-tl，按照实验设计方案实行PDT，优化光敏剂孵育时间、浓度和激光参数。根据照射后平板菌落计数的结果选择实验参数，为进一步的大鼠龋齿模型实验提供依据。(3)用S．mutans感染Wistar大鼠口腔，并喂以致龋饲料2000#，建立龋齿模型。以17mwHMME．PDT、34mwHMME．PDT、68mwHMME．PDTHMME．

3、PDT、单纯激光、单纯光敏剂为实验组，O．9％生理盐水为阴性对照组、0．2％氟化钠为阳性对照组。采用血卟啉单甲醚(HematoporyrinmonomethylEther,HMME)为光敏剂，532nm半导体激光为光源，每周处理牙齿一次，5周后处死大鼠。(4)Keyes记分比较各组龋齿预防效果，扫描电镜观察牙齿表面的形态变化，组织病理切片观察牙髓组织的变化。结果：(1)体外光动力照射S．mutans96孔板的平板菌落计数结果显示，孵育3min、浓度为40pg／ml为最佳光敏剂参数，17mw、34row、68mw为合适的激光参数。(2)大鼠龋

4、齿Keyes记分结果中：在平滑面和窝沟E级龋损Keyes记分中，不同功率PDT组、氟化钠组与阴性对照组相比，Keyes记分低(尸<0．05)显示了较强的防龋作用；在平滑面和窝沟Ds级龋损Keyes记分中，与阴性对照组相比，除了窝沟Ds级龋损17mwHMME—PDT组Keyes记分没有明显差异(尸>O．05)l天津医科人学硕十学位论文外，其余PDT各组和氟化钠组Keyes记分均偏低(P<0．05)；在平滑面和窝沟E级、Ds级龋损Keyes记分中，单纯激光照射组、单纯光敏剂组、阴性对照组之间均无统计学差异(P>0．05)。对于平滑面Dm级龋损，

5、不同功率PDT组、氟化钠组均未检出；单纯激光照射组、单纯光敏剂组、阴性对照组均有检出。对于窝沟Dm级龋损，与阴性对照组相比，不同功率PDT组、氟化钠组Keyes记分低(P<0．05)，都显示了较强的防龋作用。对于平滑面Dx级龋损，所有组别均未检出。对于窝沟Dx级龋损，只在阴性对照组中检出。在大鼠Keyes记分结果中(光滑面E级、Ds级龋损；窝沟E级、Ds级、Dm级龋损)，与阳性对照组相比，17mwHMME．PDT组Keyes记分偏高(尸<0．05)，34mwHMME．PDT组Keyes记分无统计学差异(尸>0．05)，68mwHMME—PD

6、T组Keyes记分偏低(尸<0．05)。HMME．PDT组间随着功率的不断增加，Keyes记分呈现明显降低的趋势。(3)扫描电镜显示，不同功率的激光照射会造成大鼠牙齿表面形态不同程度的改变：阴性对照组牙釉质表面粗糙，有凹坑、划痕和孔穴状脱矿区，孔穴较深大，分布不均匀；单纯激光照射组照射后釉质表面光滑，仍有少量条状凹坑、划痕和孔穴状脱矿区；17mwHMME．PDT组激光照射后，釉质表面变得较为光滑，有少量条状凹坑；34mwHMME．PDT组激光照射后，牙釉质表面更为光滑，有较少量条状凹坑；68mwHMME．PDT组激光照射后，釉质表面光滑平坦

7、，有少量点状凹陷和划痕，有些部位可以见到釉质熔融后的结构。(4)组织病理观察，不同功率激光照射牙齿表面，牙髓组织会呈现不同程度的毛细血管扩张、炎症或出血等变化。17mwHMME．PDT组、34mwHMME．PDT组激光照射后，牙髓组织均有轻度的毛细血管扩张、充血，68mwHMME．PDT激光照射后，牙髓组织有大量的毛细血管扩张、充血，但未见炎症细胞浸润。牙髓组织炎症或出血记分结果中：17mwHMME．PDT组、34mwHMME．PDT组与阴性对照组相比，记分均没有明显的统计学差异(P>O．05)：68mwHMME．PDT组与阴性对照组相比记

8、分高，有统计学差异(P<0．05)。光动力疗法组随着功率的增大，牙髓组织的反应程度加重。结论：(1)HMME．PDT对体外S．mutans的菌悬液有明显的杀菌作用，杀菌效果与光敏