以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料的研制及相关分析

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1、猹键性摩噍秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工．f乍及取得的研究成果。尽’我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含共他人已经发表或撰写过的研究成果，不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：El期：趔：』：：矽镊护知识产权声嚼本人完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在校攻读学位期闻论文I作的知识产权单位

2、属第四军医大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为第四军医大学。学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容(保密内容除外)，可以采用影Ell、缩印或其他复制手段保存论文。论文作者阮修导师签名：嗣瞒缸日虮塑巫，加第四军医大学博士学位论文缩写词表英文缩写英文全名中文全名ALPAlkalinepbosphatase碱性磷酸酶BMBonemarrow骨髓BⅣ【PBonemorphogeneticprotein骨形态发生蛋白bBMPbovineBMP牛骨形态发生蛋白DBMDemin

3、eralizedbonematrix脱钙骨基质DMEMDulbeco’smodifiedeaglemediumDulbeco改良MEM培养基DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜FGFfibroblastgrowthfactor成纤维细胞生长因子FSFibfinsealant纤维蛋白胶HEhematoxylineosinstaining苏木精．伊红染色HAhydroxyapatite羟基磷灰石MSCMarrowstromalcell骨髓基质细胞PGAPolyglycolicAcid聚乙醇酸PLAPolylacticacid聚乳

4、酸RBXReconstitutedbonexenograR重组合异种骨rhBⅣ摩一2recombinanthumanbone基因重组骨形态发生蛋白morphogeneticproteinTCPTricalciumphosphate磷酸三钙TGF．BTransforminggrowthfactor-B转化生长因子第四军医大学博士学位论文以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料的研制及相关研究博士研究生崔赓导师胡蕴玉教授辅导老师雷伟副教授第四军医大学西京医院全军创伤骨科研究所西安(摘要)骨折及骨不连的治疗是骨科临床的重要问题。骨形态发生蛋白(Bon

5、emorphogeneticproteinBMP)是一类具有高效成骨活性的蛋白质，在临床治疗骨缺损中具有良好的应用前景。单独将BMP植入体内极易扩散吸收而不能在局部最大限度地发挥其诱导成骨的活性，同时由于缺少载体的支架作用BMP也不易放置。因此寻找BMP的载体材料便成为当前骨科领域研究的重要课题。目前大部分的研究集中于固体(支架性)载体材料。固体载体需行手术才能应用，因此不适用于治疗单纯的或只需非手术治疗的骨折和骨缺损。纤维蛋白胶(Fibrinsealant，FS)，是由数种血浆蛋白成分组成的一种可降解的复合制剂，不仅具有良好的粘结作用和可

6、注射性，而且生物相容性好，在体内成形快，易于被人体吸收，并可促进组织再生，已广泛用于许多外科领域。本研究是根据组织工程学原理，首次将FS作为BMP和碱性成纤维细胞生长因子(basic—fibroblastgrowthfactorbFGF)的可注射性载体，研制成可在体内快速成型的，具有高效骨诱导活性的FS／BMP／bFGF注射型骨修复材料。为探讨其临床应用的可能性，对这一复合材料进行了系列研究，包括生物学相容性、成骨活性和动物节段性骨缺损的修复等实验，以期为临床骨缺损的修复寻找到一种新型的、理想的注射型骨修复材料。一、FS／BMPfFGF注射

7、型骨修复材料对兔骨髓基质细胞增殖和分化的影响第四军医大学博士学位论文目的：观察FS／BMP／FGF注射型骨修复材料的生物相容性及其对体外培养的兔骨髓基质细胞(MarrowstromalcellsMSCs)增殖和分化的影响，为进一步的动物实验提供实验依据。方法：实验分组为：实验组(FS+bFGF+rhBMP．2)、对照组1(FS)、对照组2(FS+bFGF)、对照组3(FS+rhBMP-2)及空白对照组。采用细胞培养、组织化学及电镜等方法对各组兔MSCs的增殖率、贴壁率、ALP活性、I型胶原表达、超微结构及细胞在材料中的生长情况进行研究。结果

8、：(1)各组材料对细胞促增殖作用由强到弱依次是：对照组2一实验组一对照组1一对照组3一空白对照组，差异有显著性(P．(0．05)：各组细胞的贴壁率总体上由高到低依次是：对照组2一