牛乳腺炎金黄色葡萄球菌弹性纤维结合蛋白n端蛋白nebps基因的

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1、稿号：2012-225，收稿日期：2012-5-3牛乳腺炎金黄色葡萄球菌弹性纤维结合蛋白N端蛋白nEBPS基因的克隆及序列分析薛晓阳1、2，吴金花1，布日额1**，王学理2，刘洋1、2，刘燕1，西林高娃1，孙立杰1，郭闯1，薛江东2（1.内蒙古民族大学生命科学学院，内蒙古通辽028043；2.内蒙古民族大学动物科技学院，内蒙古通辽028043）【摘要】根据Genbank上公布的金黄色葡萄球菌弹性纤维结合蛋白N端蛋白nEBPS基因的全序列，利用生物学软件Primer5.0和Oligo6.0设计了一对特异性引物，采用PCR方法扩增了内蒙古分离株

2、的nEBPS基因序列。结果表明，扩增的基因片段长度为720bp，与标准菌株（CMCC26074）的nEBPS基因片段序列相似性为100%，与GenBank上公布的金黄色葡萄球菌菌株（U48826.2）nEBPS基因相似性达到97.36%，为进一步研究该致病菌的发病机制和建立分子检测技术奠定了一定的实验基础。【关键词】金黄色葡萄球菌；nEBPS基因；克隆；序列分析CloningandsequencingoffibronectinflexibbleN-terminalproteinnEBPSgeneofStreptococcusaureusfr

3、ommastitiscowsXUEXiao-yang1、2,WUJin-hua1,BURi-e1,WANGXueli2,LIUYang1、2,XILingaowa1,SUNLijie1,GUOChuang1,XUEJiangdong2（1.CollegeofLifeScience,InnerMongoliaUniversityforNationalities，Tongliao028043,InnerMongolia,China;2.CollegeofAnimalScienceandTechnology,InnerMongoliaUniver

4、sityforNationalities）【Abstract】Apairofprimersweredesignedbybiologicalsoftwareofprimer5.0andOligo6.0accordingtofibronectin flexible N-terminal protein nEBPSgenesequencesofbovinemastitisStaphylococcusaureuspublishedonGenBank.nEBPSgenefragmentofclinicalisolatedstrainwasamplif

5、iedbyPCR.SequencingresultshowedthatnEBPSgenesequenceshad720bpinlength.nEBPSgenesequencesofclinicalisolatedstrainhad100%ofhomologywiththestandardstrain（CMCC26074）ingenesequences,andhad97.36%ofhomologywiththeEBPSgenesequencesofstandardS.aureusstrain(U48826.2)publishedonGenBa

6、nk.ThebovinemastitisStaphylococcusaureusnEBPSgenehadbeenclonedandsequenced.ThisresulthadlaiedafoundationforfurtherstudyonthepathogenicmechanismandestablishmentofamoleculardetectingmethodforStaphylococcusaureusindairymilk.【Keywords】Staphylococcusaureus；nEBPSgene；cloning;seq

7、uencing*【基金项目】国家自然科学基金项目（No.31060325）；内蒙古自治区科技厅科技创新引导计划项目（2011年、2012年）。**【通讯作者】布日额，Tel：0475-8314626，E-mail：wjhbre@yahoo.com.cn【作者简介】薛晓阳（1985-），男，黑龙江省阿城人，在读研究生，主要从事病原微生物及生物制品研究。奶牛乳腺炎（Diarycowmastitis）是造成乳业损失最严重的疾病之一，其病原种类较多，其中作为传染性致病菌的金黄色葡萄球菌（S.aureus，SA）是最为重要的致病菌之一。根据近几年我们

8、对内蒙古地区牛乳腺炎致病菌的收集与分离，结果表明金黄色葡萄球菌的分离率为30%左右[1]，与国内其他学者的报道结果相一致[2]。随着奶牛集约化养殖模式的不断扩大，人工饲料的使用量