fgf和tgf审审β1对人牙龈成纤维细胞生物学活性的影响

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1、优秀毕业论文天津医科大学硕士学位论文bFGF和TGF-β1对人牙龈成纤维细胞生物学活性的影响姓名：梁妍申请学位级别：硕士专业：口腔医学；口腔临床医学指导教师：王永兰201105精品参考文献资料优秀毕业论文天津医科人学硕+学位论文中文摘要目的：通过组织块法培养人牙龈成纤维细胞(humangingivalfibroblast，HGF)，观察HGF体外培养的生物学特性，探讨碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastfactor,bFGF)和转化生长因子131(transfergrowthfactor-131，TGF-131)单独及联合应用对HGF增

2、殖、I型胶原(collagenI，ColI)及糖胺多糖(glycosaminoglyca，GAG)分泌的影响，研究bFGF署ITGF．131单独及联合应用促进牙龈组织再生的作用。方法：1．采用组织块培养法进行人牙龈成纤维细胞的原代培养。2～6代细胞用于实验，倒置相差显微镜下观察细胞形态。抗角蛋白染色及波形丝蛋白染色进行细胞来源鉴定。2．实验分组：根据实验过程中人牙龈成纤维细胞培养液成分的不同进行分组，每组设8个复孔。(1)对照组：培养液为仅含5％FBS的DMEM；(2)bFGF干预组：培养液中除含5％FBS的DMEM，还分别含有bFGFO．1ng／ml、

3、lng／ml、10ng／ml、50ng／ml、100ng／ml；(3)TGF一131干预组：培养液中除含5％FBS的DMEM，还分别含有TGF-131O．1ng／ml、lng／ml、10ng／ml、50ng／ml、100ng,／ml。(4)bFGF联合TGF．131干预组：优选bFGF和TGF．131干预组中促细胞增殖最佳浓度进行联合培养。3．四甲基偶氮哗盐比色法(methylthiazolylterazolium，MTT)动态检测bFGF及TGF．131对人牙龈成纤维细胞增殖活性的影响。酶联免疫吸附法(enzyme．1inkedimmunosorben

4、tassays，ELISA)及阿利新蓝法分别检测细胞增殖活性最强时bFGF及TGF．131对HGF上清液中l型胶原及糖胺多糖含量的影响。结果：1．采用组织块原代培养法成功培养出人牙龈成纤维细胞。倒置相差显微镜下观察可见，组织块接种3～7d后即有细胞从其周围游出，细胞呈长梭形，并围绕组织块呈放射状排列。传代后细胞生长迅速。经细胞来源鉴定，所培养细胞呈现抗角蛋白染色阴性，抗波形丝蛋白染色阳性，证实所培养细胞为中胚精品参考文献资料优秀毕业论文天津医科人学硕十学位论文层来源的成纤维细胞。2．MTT法动态检测结果显示，接种后第3天开始bFGF和TGF．Bl对HGF

5、的增殖作用均较对照组明显(P

6、胞的糖胺多糖合成均具有促进作用，两种生长因子促细胞增殖最佳浓度联合应用时效果更明显(氏0．05)。结论：1．采用组织块原代培养法可成功培育出人牙龈成纤维细胞；细胞传代后，生长旺盛，分裂较快，能够满足实验中所需的大量细胞。2．bFGF和TGF．Dl在一定浓度范围内都能促进人牙龈成纤维细胞增殖及糖胺多糖分泌，但最佳显效浓度不同；两种生长因子对于l型胶原的分泌分别具有抑制和促进作用。3．一定浓度的bFGF和TGF．131联合应用对于人牙龈成纤维细胞增殖及细胞外糖胺多糖的分泌具有协同促进作用；对于I型胶原的分泌具有拮抗作用，促进作用占优势。关键词：碱性成纤维细胞

7、生长因子转化生长因子．131牙龈成纤维细胞I型胶原糖胺多糖精品参考文献资料优秀毕业论文天沣医科人学硕+学位论文AbstractObjectives：Toculturehumangin西valfibroblastswithfis册explantmethodandwatchtheirbiologicalcharacterizationinvitro；investigatetheinfluenceofbFGFandTGF．p1individuallyorcombinedontheproliferation，typeIcollagenandglycosamino

8、glycasecretionofhumangingivalfibroblasts