油樟DNA提取的研究 毕业论文

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1、宜宾学院YIBINUNIVERSITY本科毕业论文（设计）毕业论文题目：油樟DNA提取的研究专业：生物科学学生姓名：学生学号：030601023系级班：生物工程03级1班指导教师：职称:教授宜宾学院教务处制摘要油樟是樟科樟属植物，本课题主要研究油樟根茎叶DNA的提取方法以及对根茎叶DNA提取效果进行对比分析。油樟的细胞内含有大量的多糖、多酚、鞣质等次生代谢物,针对这一情况本研究在常规CTAB法的基础上做了进一步改进，成功提取出了高质量DNA。做的改进主要有：①在CTAB提取缓冲液中加入2gPVP以除去酚类杂

2、质；②将DNA样品溶于TE缓冲液中保存时在样品中加入3μlRNaseA，以除去RNA。用改进CTAB法提取的DNA得率和纯度都较高。用改进CTAB法提取的油樟根DNA得率小于油樟茎DNA的得率小于油樟叶DNA得率，由于植物各组织器官的基因组DNA是相同的，因此宜用更易研磨成细粉的油樟嫩叶来提取油樟DNA，用做科研和教学。关键词：油樟；DNA；CTAB（十二烷基三甲基溴化铵）；电泳；光吸收19AbstractCinnamomumlongepaniculatumbelongstolaurelfamilyandL

3、auraceaespecies.ThetopicsstudiedmainlythemethodofextractingDNAandcomparedtheDNAextractingmethodsfromroots,branchesofCinnamomumlongepaniculatum.CellsofCinnamomumlongepaniculatumcontainalargenumberofpolysaccharides,polyphenols,tannins,andothersecondarymetabo

4、lites.BasedonconventionalCTABmethod,aserialofimprovementswerecarriedoutandhigh-qualityDNAwassuccessfullyobtained.Themainimprovementsare:①2gPVPwasaddedintoCTABextractionbuffertoremoveimpuritiesphenols;②3μlRNaseAintothesampleswhenDNAsamplespreservedinTEbuffe

5、rtoremoveRNA.ImprovedCTABextractionofDNAyieldandpuritywashigher.TheDNAyieldusingimprovedCTABextractionwasroots>stems>leaves.BecausegenomicDNAissame,itiseasiertoextractDNAfromleavesofCinnamomumlongepaniculatumforresearch.Keywords:Cinnamomumlongepaniculatum;

6、DNA;CTABmethodofDNA;electrophoresis;absorbingvalueoflight19目录摘要IAbstractII第1章绪论1第2章油樟根茎叶DNA的提取方法31.材料、药品、仪器31.1材料31.2主要试剂溶液31.3主要仪器设备42.实验方法和步骤42.1常规方法的提取42.2改良CTAB法52.3油樟根、茎、叶DNA提取的比较方法63.结果及分析63.10.8%琼脂糖凝胶电泳结果及分析63.2紫外光谱分析84.讨论104.1CTAB法的基本原理104.2几种主要试剂的

7、作用与对比104.3方法的探索及改进114.4注意要点124.5实验过程中遇到的问题及对策125.总结135.1135.2135.313参考文献14致谢15文献综述1619第1章绪论图1-1油樟如图1-1油樟[Cinnamomumlongepaniculatum(Gamble)]是樟科樟属植物。高大乔木，叶互生，卵形、椭圆形或短圆形，先端长渐尖或急尖，基部楔形至近圆形，长5.5-12cm，宽3-6cm，幼时即无毛，腹面暗绿色，有光泽，背面粉绿色，通常羽状脉，中脉两面凸起，侧脉约5-6对，两面凸起，脉腋腹面泡

8、状隆起，背面有小窝孔，孔内有短毛，横脉和细脉背面较明显，叶柄长2-3cm，无毛。圆锥花序腋生，纤细，疏散，通常长10cm以上，无毛，花梗长1-3cm，无毛；花被长约2mm，外侧无毛，内侧密被毛，裂片卵形，长1.5mm，花后花被上部自花被管的顶端处整齐环裂脱落；雄蕊长约1mm，被柔毛，第3轮的花丝基部有1对具短柄状的腺体，退化雄蕊长约0.5mm，被毛，近心形；雌蕊无毛，子房近圆球形状，花柱较子房为长，柱头小，盘状。