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时间:2018-08-01
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1、宜宾学院YIBINUNIVERSITY本科毕业论文(设计)毕业论文题目:油樟DNA提取的研究专业:生物科学学生姓名:沈志强学生学号:030601023系级班:生物工程03级1班指导教师:罗通职称:教授宜宾学院教务处制宜宾学院本科毕业设计(论文)摘要油樟是樟科樟属植物,本课题主要研究油樟根茎叶DNA的提取方法以及对根茎叶DNA提取效果进行对比分析。油樟的细胞内含有大量的多糖、多酚、鞣质等次生代谢物,针对这一情况本研究在常规CTAB法的基础上做了进一步改进,成功提取出了高质量DNA。做的改进主要有:①在CTAB提取缓冲液中加入2gPVP以
2、除去酚类杂质;②将DNA样品溶于TE缓冲液中保存时在样品中加入3μlRNaseA,以除去RNA。用改进CTAB法提取的DNA得率和纯度都较高。用改进CTAB法提取的油樟根DNA得率小于油樟茎DNA的得率小于油樟叶DNA得率,由于植物各组织器官的基因组DNA是相同的,因此宜用更易研磨成细粉的油樟嫩叶来提取油樟DNA,用做科研和教学。关键词:油樟;DNA;CTAB(十二烷基三甲基溴化铵);电泳;光吸收19宜宾学院本科毕业设计(论文)AbstractCinnamomumlongepaniculatumbelongstolaurelfamil
3、yandLauraceaespecies.ThetopicsstudiedmainlythemethodofextractingDNAandcomparedtheDNAextractingmethodsfromroots,branchesofCinnamomumlongepaniculatum.CellsofCinnamomumlongepaniculatumcontainalargenumberofpolysaccharides,polyphenols,tannins,andothersecondarymetabolites.Bas
4、edonconventionalCTABmethod,aserialofimprovementswerecarriedoutandhigh-qualityDNAwassuccessfullyobtained.Themainimprovementsare:①2gPVPwasaddedintoCTABextractionbuffertoremoveimpuritiesphenols;②3μlRNaseAintothesampleswhenDNAsamplespreservedinTEbuffertoremoveRNA.ImprovedCT
5、ABextractionofDNAyieldandpuritywashigher.TheDNAyieldusingimprovedCTABextractionwasroots>stems>leaves.BecausegenomicDNAissame,itiseasiertoextractDNAfromleavesofCinnamomumlongepaniculatumforresearch.Keywords:Cinnamomumlongepaniculatum;DNA;CTABmethodofDNA;electrophoresis;a
6、bsorbingvalueoflight19宜宾学院本科毕业设计(论文)目录摘要IAbstractII第1章绪论1第2章油樟根茎叶DNA的提取方法31.材料、药品、仪器31.1材料31.2主要试剂溶液31.3主要仪器设备42.实验方法和步骤42.1常规方法的提取42.2改良CTAB法52.3油樟根、茎、叶DNA提取的比较方法63.结果及分析63.10.8%琼脂糖凝胶电泳结果及分析63.2紫外光谱分析84.讨论104.1CTAB法的基本原理104.2几种主要试剂的作用与对比104.3方法的探索及改进114.4注意要点124.5实验过程中
7、遇到的问题及对策125.总结135.1135.2135.313参考文献14致谢15文献综述1619宜宾学院本科毕业设计(论文)第1章绪论图1-1油樟如图1-1油樟[Cinnamomumlongepaniculatum(Gamble)]是樟科樟属植物。高大乔木,叶互生,卵形、椭圆形或短圆形,先端长渐尖或急尖,基部楔形至近圆形,长5.5-12cm,宽3-6cm,幼时即无毛,腹面暗绿色,有光泽,背面粉绿色,通常羽状脉,中脉两面凸起,侧脉约5-6对,两面凸起,脉腋腹面泡状隆起,背面有小窝孔,孔内有短毛,横脉和细脉背面较明显,叶柄长2-3cm,
8、无毛。圆锥花序腋生,纤细,疏散,通常长10cm以上,无毛,花梗长1-3cm,无毛;花被长约2mm,外侧无毛,内侧密被毛,裂片卵形,长1.5mm,花后花被上部自花被管的顶端处整齐环裂脱落;雄蕊长约1mm,被柔毛,第3轮的花
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