家畜寄生虫病实验室诊断技术论文

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1、动物蠕虫学粪便检查技术学号：113631224姓名：田孟专业：动物医学班级：临床112班日期：2014年6月6日学校：新疆农业大学指导老师：摘要由于蠕虫病的症状缺少特异性，因此，仅仅靠临床症状很难对家畜蠕虫病做出肯定的诊断。在很大程度上耑要依赖实验室的检查，川实验室方法在被检家畜的粪便、尿液、血液等内容物中，寻找虫卵、幼虫、虫体或虫体碎片，并根据对所发现的虫卵等鉴定做出正确诊断。所以掌握动物蠕虫学常见的实验室粪便虫卵检查技术势在必行。关键词：蠕虫、实验室的检查、实验诊断技术、涂片、粪便检查正文一、实验所需器材载玻片，盖玻片，镊子，平皿，烧杯，塑料杯或纸杯，漏斗

2、，漏斗架，胶帽吸管，离心管，试管，玻璃棒，粪筛，纱布，平底管（青霉素小瓶），玻璃珠，三角小烧瓶，100ml球状烧瓶，火柴棍，特制铁丝圈，虫卵计数板，普通离心机，光学显微镜等。甘油，饱和食盐水，0.1N（或4%）NaOH,家畜新鲜粪便等。二、实验方法步骤和操作要领（一）直接涂片法（ExaminationofDirectSmears）在清洁的载玻片上滴1-2滴水或1滴甘油与水的等量混合液（加甘油的好处是能使标本清晰，并防止过快蒸发变干），其上加少量粪便，用火柴棍仔细混匀。再用镊子去掉大的草棍和濟子等，之后加盖玻片，置光学显微镜下观察虫卵或幼虫。另一方法是直接涂片法

3、的改良法叫回旋法。取2〜3g粪样加清水2〜3倍，充分混匀成悬液。后用玻璃棒搅拌0.5—lmin，使之成回旋运动，在搅拌过程屮迅速提起玻璃棒，将棒端附着的液体放于载片上涂开，加上盖八在镜下检查。检查时多収几滴悬液。该方法的原理是由于冋旋搅动的结果，可使玻璃棒端悬液小滴中附有较多量的寄生虫卵或幼虫。（二）漂浮法（MethodInvolvingFlotation）其原理是采用比重高于虫卵的漂浮液，使粪便中的虫卵与粪便渣子分开而浮于液体表血，然后进行检查。漂浮液通常多采用饱和盐水，其方法简便、经济、易行。饱和盐水漂浮法对大多数线虫卵、绦虫卵及某些原虫卵囊均有效，但对吸

4、虫卵、后圆线虫卵和棘头虫卵效果较差。饱和盐水漂浮方法操作步骤：取新鲜粪便2g放在平皿或烧杯中，用镊子或玻璃棒压碎，加入10倍量的饱和盐水，搅拌混合，川粪筛或纱布过滤到平底管屮，使管内粪汁平于管口井稍隆起力好，但不要溢出。静置30分钟左右，用盖八蘸取后，放于载片上，镜下观察；或用载片蘸収液面后翻转，加盖片后镜检；也可用特制的铁丝圈进行蘸取检查。除上述漂浮方法外，还有一种简单的漂浮技术.它可以检查含卵量少的粪便（每g粪便少于50个虫卵）。具体步骤如下：即取3g粪便放于一塑料杯或烧杯内，加进50ml漂浮液后.用玻璃棒搅匀，通过粪筛或双层纱布过滤到另一个杯中.漂浮10

5、分钟.然后用一试管插在滤液的中央底部，并迅速提起。把附在上面的液滴滴落在载片上，加上盖片镜检。（三）沉淀法（SedimentationTechnique）其原理是利用虫卵比重比水大的特点，让虫卵在重力的作用下，自然沉于界器底部，然后进行检查。沉淀法可分为离心沉淀法和自然沉淀法两种。1.离心沉淀法。通常采用普通离心机进行离心，使虫卵加速集中沉淀在离心管底，然后镜检沉淀物。方法是取5g被检粪便，賈于平皿或烧杯中，加5倍fi的清水，搅拌均匀。经粪筛和漏斗过滤到离心管屮。賈离心机上离心2-3分钟（电动离心机转速约为500转/分），然后倾去管内上层液体，再加清水搅匀，再

6、离心。这样反S进行2-3次，直至上清液清亮为止，最后倾去大部分上淸液，留约为沉淀物1/2的溶液量，用胶帽吸管吹吸均匀后，吸取适量粪汁（2滴左右）罝载玻片上，加盖玻片镜检。2.自然沉淀法。操作方法与离心沉淀法类似，只不过是将离心沉淀改为自然沉淀过程。沉淀容器可用大的试管进行。每次沉淀时间约为半小时左右。自然沉淀法缺点是所需时间较长，但其优点是不需要离心机，因而在基层乡下操作较为方便。（四〉虫卵计数法（EggCountingMethod）虫卵计数法主要用于了解畜禽感染寄生虫的强度及判断驱虫的效來。方法有多种，这里介绍二种常用的计数方法。1.麦克马斯特氏法（McMa

7、ster’sMethod）。计数板的构造：计数板是由二片载玻片组成，其屮一片较另一片窄一些（便于加液〉。在较窄的玻片上有lcm见方的刻度区二个，每个正方形刻度区中又平分为5个长方格。另有厚度为1.5mm的儿个玻璃条垫于二个载玻片之间，以树脂胶粘合。这样就形成了二个计数室，每个计数室的容积为0.15ml（0.15cm3）。计数方法：取2g粪便混匀，放入装有玻璃珠的小瓶加入饱和盐水58ml充分振荡混合，通过细的粪筛过滤，后将滤液边摇晃边用吸管吸出少S:滴入计数室A,賈于S微镜台上，静賈儿分钟后，用低倍镜将二个计数室内见到的虫卵全部数完，取平均值，再乘以200,即为

8、每克粪便中的虫卵数（EPG）o2.斯陶