幽门螺杆菌临床检测应用研究进展

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1、No.免疫学综述论文题目:学生姓名:学号:专业:班级:幽门螺杆菌临床检测应用研究进展汪靖3511015123临床检验诊断学1105班二O一一年H月幽门螺杆菌临床检测应用研究进展汪靖园(西安交通大学第一附属医院班级：1105学号：3511015123)1983年澳大利亚学者Warren和Marshall首先从人胃粘膜活检标本屮分离出幽门螺杆菌(HelicobacterPylori,Hp),引起了国内外学者的广泛关注和重视。近20年研究表明，Hp感染是世界上最常见的人类细菌感染之一'有关幽门螺杆菌临床检测的研究取得了长足进步和可喜成果，并在临床上逐步得到应用。根据Hp检测同

2、时是否需做胃镜检查分为:①侵入性检测，在胃镜下采取活检标本。包括:快速尿素酶试验，细菌培养，活检标本切片染色，直接涂片染色和聚合酶链反应(PCR)等。②非侵入性检测，不需胃镜检査。包括:13C、14C呼吸试验,血清免疫学检测，15N尿素排泄试验等。各种检测方法各宥其优缺点。现将幽门螺杆菌临床检测应用研究进展综述如下。1侵入性检测1.1快速尿素酶试验该试验是所有检测手段屮最为简便迅速的一种方法，与胃镜检查同时进行，敏感性和特异性分别达91%和100%,数分钟即可做出诊断。目前已有试剂盒，使用简便、快速、便宜。该试验检查结果与直接涂片法、分离培养法、组织病理检查结果近似。活

3、检标本的尿素酶活性主要与感染Hp的数量多少有关,量少时可造成假阴性结果，而其它能产生尿素酶的细菌如空肠螺杆菌，变形杆菌等，都水解尿素，可造成假阳性反应。此法不宜单独作为Hp根除率的检查12)1.2细菌培养胃黏膜组织的细菌培养是诊断Hp感染的最可靠方法，可做为验证其他检测手段的"金标准"。但培养结果受不少因素影响，当Hp变成圆球形、死亡、菌量过少或培养环境达不到Hp生长的要求，则常规方法难以检出而致假阴性［3］。1.3活检标本切片染色将胃黏膜活检组织标用100%屮性福尔马林固定，常规石蜡包埋、切片染色。根据Hp的形态学特征进行检测和分析

4、41。直接观察胃黏膜表面上定植的H

5、p,是临床上最常的另一项Hp诊断的“金标准”。1.4细胞涂染色Piccolomini等［5］报道了用leifson鞭毛染色法诊断Hp感染，用leifson鞣酸-品红染色法来做胃活检标本印片细胞学检查，以显示Hp的鞭毛，并与组织学检查、RUT和细菌培养等方法进行比较。1.5电镜对Hp的超微结构观察Hp呈弯曲形或S型、V型、环形、小球形及杆状，菌体长约1.5〜6m，表面光滑，两端钝圆，有1〜6根带鞘鞭毛。1.6聚合酶链反应(PCR)Hoshina等［6］首先将PCR技术用于Hp的诊断，敏感性及特异性与组织学和细菌培养相似。Hp的尿素酶基因、16SrRNA基因和编码Hp特异2

6、6KD蛋白质的基因部分序列的测出，为PCR特异性引物的选择提供了依据［7_9］。1.7PCR单链构象多态技术(PCR-SSCP)王红等nG1用PCR及SSCP技术分析和鉴定临床分的Hp菌株方法。该方法敏感性强、图形简单、易比较、重复性好。PCR-SSCP不仅可以用于Hp流行病学调查，而且能评估治疗后再现的Hp是复发还是再感染。2非侵入性检测2.113C、14C呼吸试验尿素很可能是Hp生长因素之一，在胃黏膜上皮细胞结合处有很高浓度尿素存在，而Hp感染者尿素显著降低。呼吸试验检测Hp的敏感性和特异性分别100%和88%，Hp淸除后则呼出减少或消失。根据标记物的不同，分为13

7、C和14C呼吸试验，儿童多采用13C。呼吸试验具有快速、可靠、安全、无痛苦的优点。Ormand等llu发现收集服用核素标记的尿素后20min的呼气体即可有效地检测Hp感染。Epp等［12］采用减量示踪剂(75mgl3C-尿素)来进行呼气试验(UBT),77例Hp阳性的病人屮，74例UBT检测呈阳性(敏感性96%)，并将部分病例于6个月后复检UBT，90.6%病例的UBT结果可重复出现，说明13C-UBT敏感性和特异性高，重复性好，可常规用于Hp诊断和监测Hp根除。2.215N-尿氨排泄试验根据呼吸试验类似的原理，让受试者口服稳定性同位素15N标记的尿素,然后测定尿屮排出

8、的15NH3来判断胃内Hp的实际感染状况，其敏感性为96%。15N-尿氨排出试验是一种有—定定量意义的敏感性与特异性均高的Hp感染体内诊断试验。2.3免疫学方法通过测定血清中的Hp抗体来检测Hp感染，其方法有:①酶联免疫吸附法(ELISA);②免疫酶试验;③免疫印迹技术;④胶乳凝集试验;⑤其他:补体结合试验、被动血凝反应、细菌凝集反应及毒素中和试验等。其中以ELISA法最为常用。ELISA法敏感性强、稳定。Hp培养阳性者，发现所有患者血清含抗Hp抗体，IgG明显升高，Hp抗体效价在1:320以上者，确定有Hp感染。Rathbone等113