支原体液体培养阳性结果分析

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1、支原体液体培养阳性结果分析何梦林通山县人民医院(湖北通山437600)KBT)3【摘要】目的分析支原体液体培养基澄清变红、微混变红、混浊变红三种情况下的阳性结果，为提高泌尿生殖道支原体感染实验室诊断的准确性。方法对疑为支原体阳性结果的液体培养基采用培养和形态学进行细菌和真菌检测。结果281份标木经液体培养后有137例阳性，其中澄清变红65例，微混变红25例，混浊变红47例，其中澄清培养基转种后未培养出细菌和真菌；微混培养基分离出2株念珠菌；混浊变红培养基分离出表皮葡萄球菌20例、金黄色葡萄球菌3例、尿肠球菌2例、大肠埃希细菌2例、普通变形杆菌5

2、例、白色念珠菌15例。结论对支原体液体培养结果要详细分析，澄清变红的液体培养基没有检出真菌和细菌，说明没有细菌和真菌污染；微混变红和混浊变红的培养基都能培养出细菌和真菌，说明有细菌和真菌污染，对这种情况要进一步鉴定，才能为临床提供准确可靠的检验结果。【关键词】支原体液体培养［中图分类号］R447［文献标识码］A［文章编号］1810-5734(2013)03--目前从人体分离到的支原体有20多种支原体，研究显示解脲支原体、人型支原体、穿透支原体、发酵支原体、梨支原体、肺炎支原体、关节炎支原体、猪鼻支原体与人类疾病有关；解脲支原体(U.urealy

3、ticum,UU)和人型支原体(M.hominis,MH)均与泌尿生殖道感染有关。约有20%〜30%的非淋菌性尿道炎(NGH)病人是以上两种支原体感染引起的，是非淋菌性尿道炎和宫颈炎的第二大致病菌［1］。近年来发病率有上升趋势。随着国产试剂商品化迅速发展，越来越多医院临床上采用液体培养法来检测和鉴定支原体。以颜色在培养后变红判断支原体生长与否，这种判断存在很多缺陷。为了解影响支原体液体培养阳性结果的因素。作者对从281例疑为支原体阳性结果的液体培养进行进一步分离鉴定。现将结果报告如下。1资料和方法1.1临床资料:281例标本来源全部来自2011

4、年1〜12月份到我院生殖门诊和妇科门诊就诊的疑为非淋菌性尿道炎（NGH）患者，并且已经进行支原体培养疑为支原体阳性的标本，其中男性46例，女性235例，年龄18〜60岁。平均年龄36岁，临床表现大多表现为尿道或阴道瘙痒、灼痛小腹坠胀、尿道发红及尿频等不适症状，少数患者可无症状。1.2采集方法:男性先用消毒棉签将尿道U分泌物擦干净，患者自行挤压阴茎数次后，用无菌棉拭子轻轻伸入尿道2〜2.5cm,旋转360度，再停留约15秒获得细胞材料后取出立即送检；女性：清除阴道及宫颈口分泌物，无菌绵拭子插入宫颈管内1〜2cm，轻轻旋转后取出，取样拭子不可碰阴道

5、壁，标本取出后立即送检。所有标本均于采样后半小吋内接种。1.3试剂盒与培养基:由珠海银科医学工程冇限公司提供。该试剂盒可同吋检测解脲支原体（UU）和人型支原体（MH），并进行药物敏感试验，是培养鉴定和药敏一体化试剂盒。血培养平板，伊红美兰培养平板，沙氏培养平板由杭州天和微生物试剂冇限公司提供。微量生化鉴定管也是由杭州天和微生物试剂冇限公司提供。1.4方法：操作严格按照试剂盒说明书，将绵拭子插入液体培养基中，充分振洗并在瓶内壁挤干后弃之形成样本液，然后再接种到检测板小孔中。每孔加两滴无菌石蜡防止水分蒸发，剩下的液体培养基也一同放入35°C〜37°

6、C的培养箱培养24小时或48小吋观察颜色变化。1.5结果判断：由于Uu分解尿素，Mh分解精氨酸，生成碱性物质使液体培养基PH上升，使酚红指示剂显红色或橙色的，如果培养瓶培养基变桃红色而且清亮透明，定量药敏版计数孔变红表示标本中支原体≥104CFU;可以报告为支原体阳性。如果定量药敏版计数孔变红而培养瓶培养基浑浊的变桃红色,则继续接种到血培养平板，伊红美兰培养平板，沙氏培养平板进行下一步的分离培养和鉴定。1.6转种与鉴定：将上述做液体培养的阳性标本，将澄清桃红色、微混桃红色和混浊桃红色分开后，分别依次转种到血培养平板，伊红美兰培养平板，沙氏

7、培养平板，3块平板放置35°C培养箱内孵育48h。然后挑起可疑菌落涂片、染色和进一步生化鉴定。2结果137例支原体液体培养基培养结果阳性标本，按照培养基混浊程度分为澄清、微混、混浊3种类型后。转种和鉴定结果为澄清培养基转种后未培养出细菌和真菌；微混培养基分离出2株念珠菌；混浊变红培养基分离出表皮葡萄球菌20例、金黄色葡萄球菌3例、尿肠球菌2例、大肠埃希细菌2例、普通变形杆菌5例、白色念珠菌15例。3讨论支原体为难培养微生物，不同种的支原体对培养基的要求不同。该法阳性结果可靠，但程序繁琐、灵敏度低、技术条件要求高、所需时间长，不利于早期快速诊断。

8、因而分离培养0前没奋被用作临床诊断和流行病学研究的常用手段，但在支原体的毒力、致病性研究和药敏试验中仍有重要作用[2]。0前国内支原体培养的商品试剂人