小鼠胚胎精子冷冻保种申请表.doc

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1、小鼠胚胎/精子冷冻保种申请表PI：PI电话：PIEmail：联系人：电话：Email：需要填写的资料：品系详细名称*简称*来源类型（KO/CKO/Tg）*背景*繁育方式*+/-matingwith+/-精子冻存或胚胎冻存*保存年限*目前此品系提供保种小鼠情况以及放置具体位置（房间-架子号-笼位）*：年龄性别基因型数量位置其他，请说明：胚胎冻存请填写冻存方式（品系内还是与B6雌鼠）表型描述*外观无明显表型冻存后说明*（冻存后，稳定一周后复苏验证是否成功）验证后代是否需要？复苏测试得到的后代需要转到哪个房间？不需要，请直接安乐死。基因鉴定方法（需要实验动物中心做Genotyping的必填，

2、否则选填）参考文献（选填）说明：1.*表示必须填写；2.保种方式的选择：我们采用精子冻存和胚胎冻存的方法进行保种；假如为杂合子，雄性数量≥3只并且可以和B6交配做净化，我们推荐安乐死一只雄鼠使用精子冻存的方式保种，可以有效控制保种周期，不受雌鼠排卵多少的限制。3.保种对提供小鼠的要求：精子冻存冷冻精子需要提供的小鼠信息：阳性纯合子雄鼠，2-3只，12-18W（最佳），生育能力良好，在实验前7d内进行过成功交配，而在3d内未交配过；冻存2只/品系，20个麦管。费用：200元/麦管冷冻的流程和所需的时间：1)提前1周邮件预约申请，写明小鼠品系名称、数量、出生日期、所在位置。2)通过申请后安

3、排实验，精子冻存后至少1周进行复苏检测实验（1麦管）。3)等待代孕小鼠生仔（孕期19.5天，小鼠出生后10-12天剪尾，通知取回鼠尾检测，（一周内反馈检测结果。）冷冻后的保存：液氮中保存终生免费保存。精子复苏（除复苏检测外）a、外来精子复苏提前1周邮件预约申请，写明小鼠冻精信息（品系，数量），送达时间。从接收之日起，1周内安排复苏实验精子复苏采用体外受精的方式得到2-cell期胚胎，输卵管移植生仔。（孕期19.5天，小鼠出生后10-12天剪尾，通知取回鼠尾检测，一周内反馈检测结果。）费用：IVF500元，IVF用B6（含激素）40元/只，移植用受体单侧100元/只，双侧180元/只，试

4、剂和人工费100元。如需其他品系雌鼠，需从外单位订购。b、动物中心精子复苏提前1周邮件预约申请，写明复苏品系。精子复苏采用体外受精的方式得到2-cell期胚胎，输卵管移植生仔。（孕期19.5天，小鼠出生后10-12天剪尾，通知取回鼠尾检测，一周内反馈检测结果。）费用：IVF500元，IVF用B6（含激素）40元/只，移植用受体单侧100元/只，双侧180元/只，试剂和人工费100元。注意事项：1.运输过程中：请使用专业运输工具（航空罐）进行运输，运输过程中请避免磕碰，注意液氮充足。2.由于各家单位使用冷冻精子的方法和试剂并不相同，请一定提供冷冻和复苏的protocol作为参考，且不保证

5、100%复苏成功。截止2015年9月，我们复苏精子平均成功率是40%。胚胎冻存品系内冻存需要提供的小鼠信息：雄鼠2-3只12-18W,雌鼠至少10只，3-4W或9-12W。正常情况下可冻存200枚胚胎左右。费用3000元/品系。与B6冻存：雄性小鼠，2-3只12-18W，中心提供雌性B6小鼠3-4W，30只。正常情况下可冻存500-600枚胚胎左右。费用3000元/品系+B6费用40元/只。c．冷冻流程和所需时间提前1周邮件预约申请，写明小鼠品系名称、数量、出生日期、所在位置。通过申请后一周左右安排实验，胚胎冻存采用体外受精的方式得到2-cell期胚胎，玻璃化冻存。胚胎冻存后至少1周进

6、行复苏检测实验（1个冻存管，30-50枚胚胎/管）复苏回收的成活2-cell，采用输卵管移植到代孕母鼠体内，19.5天生仔，1-12天剪尾通知取回检测，（一周内反馈检测结果。）冷冻后的保存：液氮中保存终生免费保存。胚胎复苏（除复苏检测外）a、外来胚胎复苏提前1周邮件预约申请，写明小鼠冻存胚胎信息（品系，数量）送达时间。从接收之日起，1周内安排复苏实验，输卵管移植生仔。（孕期19.5天，小鼠出生后10-12天剪尾，通知取回鼠尾检测，一周内反馈检测结果。）b．动物中心胚胎复苏提前1周邮件预约申请，写明复苏品系。通过申请后1周左右安排复苏实验，输卵管移植生仔。（孕期19.5天，小鼠出生后10

7、-12天剪尾，通知取回鼠尾检测，一周内反馈检测结果。）费用：移植用受体单侧移植100元/只，双侧移植180元/只，试剂和人工费100元。注意事项：1.运输过程中：请使用专业运输工具（航空罐）进行运输，运输过程中请避免磕碰，注意液氮充足。2.由于各家单位使用冷冻精子的方法和试剂并不相同，请一定提供冷冻和复苏的protocol作为参考，且不保证100%复苏成功。截止2015年9月，我们复苏胚胎平均成功率是60%。