韩维成开题报告

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1、•毕业设计（论文）材料Z二（2）本科毕业设计（论文）开题报告题目:解淀粉芽抱杆菌液体发酵条件的优化研究课题类型:学生姓名:学号:专业班级:系别:指导教师:开题时间:设计口实验研究口论文V韩维成3090403242生物技术092生物与化学工程学院孔芳2013年3月20日一、毕业设计（论文）内容及研究意义1.主要内容（1）以芜湖市大浦现代农业技术中心为起点，选取感染炭疽病的蝴蝶兰（V31）病株为试验材料。（2）配制选择培养基对对玻璃瓶中的杂菌进行富集和筛选。（3）以PDA培养基培养、分离出单菌落，将分离出的菌株移至试管斜面中,观察各种菌体的生长情况

2、、菌落特征和菌体形态。（4）通过糖酵解，柠檬酸试验，甲基红试验，革兰氏染色，水解圈试验，卿喙试验等来确定分离出来的是否为解淀粉杆菌。（5）从最佳碳源、氮源、初始PH值、发酵时间、发酵温度、接菌量和装液量的确定出发，针对纯化解淀粉芽砲杆菌进行发酵培养基的设计及发酵条件的优化。2.研究意义随着化学农药的人量使用，农药残留是一个亟待解决的问题。微生物因其具有种类繁多、代谢多样性等优势，可用于化学农药的降解，为解决农纱残留问题捉供了一种新的途径。因此，通过液体发酵技术开发利用微生物新资源具冇很深远的帝义。木晞究利用的解淀粉芽泡杆菌是枯草芽泡杆菌的一个近

3、缘种，其产生的抗真菌活性物质与枯草芽孑包杆菌近似，主要冇抗真菌蛋A、表面活性索、伊枯草菌索、几「质酶等。试验在前期研究的基础上，通过对该菌株纱瓶发酵培养基及发酵条件进行优化，为其商品化生产奠定一定的基础，以期为该菌株作为植物病害的生防制剂的开发和利用等提供理论和实践依据。二、毕业设计（论文）研究现状和发展趋势1•研究现状解淀粉芽他杆菌是一种与枯草芽他杆菌亲缘性很高的细菌，在其自身的生长过程屮可以产生一系列的代谢产物，这些代谢产物使得解淀粉芽泡杆菌能够具有广泛地抑制真菌和细菌的作用。因此，近些年大量学者在对解淀粉芽抱杆菌的新发现与新应用以及基因功

4、能研究和发酵条件的优化做了大量的探索。为了冇利丁•后人对解淀粉芽砲杆菌进行研究，将近些年国内外的研究归结于下：（1）解淀粉芽抱杆菌新发现与新应用李潞滨等人山从各地人花惠兰种植地采集的土样中筛选出对人花惠兰根腐病病原菌尖抱镰刀菌具有拮抗活性的解淀粉芽抱杆菌ZL725o王奕文等人【2］首次从不同甜瓜果实表而分离到1株解淀粉芽砲杆菌，对灰葡萄砲、链格抱、尖砲镰刀菌、黑曲霉和粉红单端他等8种果蔬采后病原真菌显著且广谱的拮抗作用。姜军坡等人⑶从健康牛的粪便屮筛选出对大肠杆菌有抑制作用的解淀粉芽抱杆菌BN-9O欧雄常等人⑷从红树内生细菌分离出1株能够拮抗辣

5、椒疫霉的解淀粉芽砲杆菌RS261,经测定RS261的防效在6d时〉80%.9d时的防效仍有60%时，清水已完全发病。12d时防病效果较佳的RS261仍具冇55%以上的防效。朱丽梅等人⑸从马尾松林中分离获得了1株解淀粉芽他杆菌。将细菌培养滤液分别稀释2、4、10倍处理松材线虫，72.00h后线虫的死亡率均达到100%；线虫死亡后虫体消解,消解率分别为100.0%、97.8%、96.4%oE.Arrebola⑹等人从水果表面分离岀解淀粉芽他杆菌PPCB004。发现其对7种不同柑橘采后的真菌病原体具有抗菌活性。通过对其提取物的研究发现抑菌物质为伊草枯

6、菌素A。对PPCB004的使用方法进行了研究，在水果发病前Id和发病后1d使用均冇较好的效果。(2)解淀粉芽抱杆菌基因功能与研究方法的探索邱思鑫等人⑺对解淀粉芽他杆菌进行了研究，通过重叠延中法将枯草芽他杆菌的启动子PSJ2与绿色荧光蛋白基因的ORF连接起来，构建绿色荧光蛋白表达盒,再通过RcoRI和PstI双酶切将表达盒连接到pUS186载体上，转化解淀粉芽抱杆菌TB2菌株,得到可发出绿色荧光工程菌。在得到绿色荧光工程菌TB2后，就可以较为准确地研究内生细菌在植物体内的定殖量。同时工程菌TB2对黄瓜枯萎病菌的拮抗作用与野生菌株相当。(3)解淀粉

7、芽抱杆菌发酵条件与培养基配方优化的研究A.T.Caldeira等人⑻通过电喷雾质谱(ESI)研究了解淀粉芽抱杆菌CCMI1051在固定碳源为葡萄糖，增加4种不同的氮源浓度的培养条件卜•的芽孑包产量与对哈茨木霉的抑菌活性。在增加氮源浓度后所捉升的抑菌活性要高于增加培养时间所带来的抑菌活性的增加。Y.M.Tzeng等人⑼研究了BacillusamyloliquefaciensB128的发酵条件。用5.0L搅拌式生物反应器与20.0L气升式生物反应器发酵B128进行了对比。在通气量为0.5win,搅拌速度为200r/min中可以大幅提高芽砲的产量。而

8、在20.0L气升式生物反应器中产量可以达到5.0L搅拌式生物反应器产量的5〜8倍，同时发酵时间缩短到19.00ho范会兰［⑹对BN・9菌株发酵条件进行