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1、系统性红斑狼疮患者6种细胞因子血清水平【摘要】目的：通过液相芯片法同时检测IFN-丫、IL-6、IL-8、IL-10、IP-10和TNF-a6种细胞因子在系统性红斑狼疮患者和健康对照者中的血清水平，探讨细胞因子在系统性红斑狼疮中的作用及其与临床特征的关系。方法：选取系统性红斑狼疮患者79例设为系统性红斑狼疮组，健康人群40例作为对照组。取其外周血分离血清，按MILLIPLEXMAP人细胞因子检测试剂盒的说明进行操作，在Luminex液相芯片平台上机检测6种细胞因子。结果:狼疮患者和TNF-a6种细胞因子的血清
2、水平比正常对照者高，且差异有统计学意义(P0.05),具有可比性。1.2排除标准①合并有高血压、心脏病、糖尿病者；②患有其他自身免疫性疾病者。2方法2.1观察指标收集SLE患者及健康对照人群血清，-80°C保存备用。检测两组IFN-V.IL-6、IL-8、IL-10、IP-10和TNF-a6种细胞因子。2.2实验试剂和方法MILLIPLEXMAP人细胞因子检测试剂盒购自Millipore公司。按MILLIPLEXMAP人细胞因子检测试剂盒说明操作，设立7个标准品，2个质控对照，标准品、质控和检测样品均设3个复
3、孔，在Luminex液相芯片平台上机检测信号值，再根据标准曲线算出浓度值。8种细胞因子标准品的浓度值范围均为0〜10000pg•mL-1,检测敏感度达0.01pg-mL-1水平。抗dsDNA抗体和抗核小体抗体采用ELISA法检测，补体C3和C4采用免疫比浊法检测。SLE疾病活动程度采用系统性红斑狼疮活动指数(SLEDAI)来评分。2.3统计学方法采用SPSS18.0软件进行统计分析。因为两组的数据均呈偏态分布，各细胞因子的血清水平用中位数(P25,P75)来表示，采用非参数检验Mann-WhitneyU检验进
4、行统计学分析。以P100IU-mL-1)32例,阴性者(0.05)。3.3抗核小体抗体与6种细胞因子SLE组中，抗核小体抗体阳性者(>20IU-mL-1)26例,阴性者(0.05)。3.4补体C3与6种细胞因子SLE组中，补体C3低下者(0.80g•L-1)31例。补体C3低下者IL-10血清水平比正常者高［1.34(0.22,8.98)vs1.15(0,2.80),P二0.041］,其余5种细胞因子两者之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)o3.5补体C4与6种细胞因子SLE组中，补体C4低下者(0.1
5、6g•L-1)37例。补体C4低下者IL-10血清水平比正常者高［1.61(0.17,9.40)vs1.00(0,3.95),P二0.05］,IP-10血清水平也比正常者高［1335.15(823.30,3474.63)vs1076.63(589.34,1540.34),P=0.04],而IL-8血清水平比正常者低[289.66(102.35,565.62)vs665.73(186.90,1188.83),P二0.033],其余3种细胞因子两者之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)o3.6蛋白尿与6种细胞
6、因子SLE组中，有蛋白尿者(24h尿蛋白〉500g•L-1)22例，无蛋白尿者(24h尿蛋白0.05)o3.7SLEDAI与6种细胞因子79例SLE患者中，按SLEDAI评分判断活动度，0〜4分为稳定组18例，5〜9分为轻度活动组37例，10〜14分为中度活动组16例，15分以上为重度活动组6例，未判断活动度2例。结果显示，IL-10血清水平与疾病活动度有明显的相关性，重度活动组IL-10血清水平最髙，依次为中度活动组、轻度活动组和稳定组。其余5种细胞因子4组之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)o4讨论
7、SLE是一种病因未明、自身免疫介导的炎症性结缔组织病。其致病机制十分复杂，其中免疫因素起了很大作用，以多克隆B细胞高度增生活化、免疫球蛋白增多和多种自身抗体的生成及细胞内外免疫反应低下为特征。研究发现，Thl/Th2细胞亚群及细胞因子在其发病的过程中发挥着重要的作用。IL-10是Th2型细胞因子，主要由淋巴细胞产生，也可由单核细胞、内皮细胞等产生，作用于B细胞，刺激B细胞活化和分泌免疫球蛋白。IL-6是机体免疫网络中重要的细胞因子，属于Th2细胞因子，可由外周血单个核细胞(PBMC)产生，具有广泛的生物学活性
8、，能刺激T、B细胞增殖分化及免疫球蛋白分泌，参与调节免疫反应[1]。研究表明，SLE患者外周血单个核细胞中Th2型细胞因子IL-6、IL-10mRNA表达水平较正常人升高[2],这些细胞因子在血清水平也有相应表现。Scudla等[3]报道SLE患者血清中的IL-10水平明显增高，且患者疾病的活动度越高，ILT0水平也越高。ChunHY、SabryA等[4-5]研究发现,IL-6、IL-10和TNF-
