医学毕业论文新城疫病毒体外诱导s180细胞凋亡的实验研究

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1、新城疫病毒体外诱导S180细胞凋亡的实验研究姓名：2014年6月25日新城疫病毒体外诱导S180细胞凋亡的实验研究作者：蒋丽娜孙黎程建贞罗强翟登高【摘要】目的：探讨新城疫病毒(Newcastlediseasevirus,NDV)体外对SI80肉瘤细胞(简称S180)生长有无抑制和诱导细胞凋亡作用。方法:取培养至对数生长期的S180细胞浓度为5><104/mL和l><106/mL分别接种于96孔板和50mL培养瓶中，加入不同浓度的NDV(1:20、1:10、1:5)作用24h,分别用MTT法检测N

2、DV对S180瘤细胞的生长抑制作用，荧光显微镜和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果：经上述不同浓度的NDV作用24h，对S180细胞生长的抑制率依次为10%、26%、39%,各实验组吸光度值(A490)与对照组比较差异均有统计学意义(P0.05)。荧光显微镜观察实验组培养的S180瘤细胞，出现细胞核固缩及凋亡小体，琼脂糖凝胶电泳见DNA梯形条带。结论：NDV对体外培养S180细胞增殖有明显抑制作用，可诱导S180细胞凋亡。【关键词】新城疫病毒；细胞凋亡;电泳/琼脂凝胶【ABSTRACT】Objec

3、tive:ToinvestigatewhethertheNewcastlediseaseviruscaninhibitproliferationofSI80cellsand/orinduceapoptosisofthecellsinvitro.Methods:S180cells(5><104/mL)wereculturedatmidexponentialphaseandplantedin96wellplateswithlOOj^Leachandin50mLculturebottles,1.5mL

4、each.Thecellsweretreatedfor24hourswithdifferentconcentrationsofNewcastlediseasevirus.GrowthinhibitionratewasmeasuredbyMTTmethod.Apoptosiswasdetectedbythefollowingways:fluorescencemicroscopywithAnnexinVFITCstainingwasusedforobservingthechangeofcellmor

5、phology，agaroseelectrophoresiswasusedtodetecttheDNAchangesandobservesubdiploid.Results:Newcastlediseaseviruscouldinhibitproliferationofsi80cells.TheinhibitionratesforSI80cellstreatedwithNewcastlediseaseviruswere10%，26%,39%undertheNewcastlediseaseviru

6、sconcentrationsof1:20、1:10、1:5respectively,withasignificantdifferencetothatofthecontrol(t=3.6O6,PO.O5；t=4.327,P0.05；t=4.321,P0.05).Cellcontractionandapoptoticbodieswereobservedunderfluorescencemicroscope.DNAfragmentwasshownthroughagaroseelectrophores

7、is.Conclusion:NewcastlediseaseviruscaninhibitsproliferationandinducescellapoptosisinSI80cellsinvitro.【KEYWORDS】Newcastlediseasevirus,Apoptosis,Electrophoresis/AgerGel肿瘤的发生不仅与细胞的过度增殖有关，而且与细胞凋亡受抑制从而使已转化的细胞生存期限延长有关。细胞凋亡具可诱导性，因此，诱导肿瘤细胞凋亡成为肿瘤治疗的一大热点［1］。近年

8、来，关于NDV感染诱导肿瘤细胞凋亡报道比较多，而对于S180细胞凋亡的诱导作用报道较少。本实验研究了NDV体外感染S180细胞的影响，探讨NDV的抗肿瘤作用，旨在为更深入研究NDV抗肿瘤作用机制，为某些肿瘤的治疗提供依据P］。1材料与方法1.1一般资料1.1.1病毒制备新城疫病毒(NDV)弱毒株由中国预防医学科学院病毒学研究所提供，病毒按常规方法在鸡胚传代。取孵育9〜lid的鸡胚，将效价为1:800以上的病毒液稀释100倍，取O.lmL注入尿囊腔内培养72h,取出鸡胚4°C冰箱过夜。次円收集尿囊