胃癌组织ezrin表达的意义论文

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1、胃癌组织ezrin表达的意义论文张俊会刘斌邢传平高自芳董亮哈英娣钱震【摘要】目的：研究ezrin基因与胃癌发生发展的关系.方法：采用原位杂交和免疫组化法,检测60例胃癌和15例正常及40例不典型增生胃黏膜中ezrinmRNA及蛋白的表达.结果：在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中ezrinmRNA及蛋白阳性表达率呈递减趋势.组间差异性均有统计学意义(P0.001);ezrinmRNA和蛋白表达在不同浸润深度、肿瘤大小和有无淋巴结转移组内表达率的差异性有统计学意义(P0.05),而在年龄、性别和脉管侵犯组内差

2、异无统计学意义(P0.05).EzrinmRNA和蛋白表达呈正相关(rs=0.990,P0.01).结论：Ezrin表达降低与胃癌的发生、发展及浸润转移有密切关系.【关键词】胃肿瘤；ezrin基因；原位杂交；免疫组织化学【Abstract】AIM:Tostudytherelationshipbetentofgastriccarcinoma.METHODS:TheexpressionsofezrinmRNAandproteinmunohistochemistryandinsituhybridizationinnor

3、malgastricmucosa(n=15),atypicalgastrichyperplasia(n=40)andgastriccarcinoma(n=60).RESULTS:ThepositiveratesofezrinmRNAandproteininnormalgastricmucosa,gastrichyperplasiaandgastriccarcinomaongthe3groupsarkablysignificant(P0.001).TheexpressionsofezrinmRNAandprotei

4、nalignantprogressionofgastriccarcinoma,tumordiameterandlymphnodemetastasis(P0.05),buttheyRNARNAandproteinplayanimportantroleinthedevelopmentofgastriccarcinoma.【Keyachneoplasms;ezringene;insituhybridization;immunohistochemistry0引言Ezrin属于ERM蛋白家族,其在肿瘤转移过程中是否发挥主要

5、作用,.freelRNA及蛋白在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中的表达及其相互关系,以探讨ezrin表达的调控层次及其与胃癌发生、发展和浸润转移的关系.1材料和方法1.1材料200503/200602病理科存档石蜡包埋标本.不典型增生胃黏膜40例,包括轻度16例,中度14例,重度10例.胃癌60例,年龄26~75（中位年龄54）岁，其中高分化腺癌12例,中分化腺癌20例,低分化腺癌15例,黏液腺癌13例;淋巴结转移阳性31例,阴性29例;有脉管侵犯10例,无脉管侵犯50例.所有标本术前均未行放疗和化疗

6、,同时取距离肿瘤组织5cm的胃黏膜15例作为正常对照.Ezrin鼠抗人抗体及免疫组化试剂盒购于福州迈新生物技术开发公司.EzrinmRNA寡核苷酸探针:从GenBank中检索ezrin基因全序列(Locus:BC_068458,3083bp,mRNA),选取该序列143~172作为靶位点,使用Oligo软件设计探针,由上海生工生物技术服务有限公司合成.1.2方法采用免疫组化SP法,ezrin抗体稀释度为1∶100,DAB显色,苏木素复染.以PBS缓冲液代替一抗作空白对照.阳性信号为棕黄色,定位于胞膜和胞质.原位杂

7、交:整个操作均在无RNA酶的环境中按常规进行,组织切片经二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化,37℃下蛋白酶消化30min,在无水乙醇中脱水10s,每张切片上滴加一滴探针溶液,盖上盖玻片,37℃过夜.TBS浸泡去掉盖玻片,TBS洗片3×3min.加2~3滴地高辛抗体37℃作用30min.TBS浸泡3min.DAB显色,苏木素复染.杂交阳性信号为棕黄色颗粒,定位于细胞质.以TBS缓冲液代探针作阴性对照.EzrinmRNA阳性表达在胃癌细胞胞质内,DAB显色,呈棕黄色颗粒,其蛋白免疫组化染色位于细胞膜与细胞质内,呈棕黄色.按染色

8、强度和阳性表达细胞数来判定结果.统计学处理：使用SPSS10.0统计软件进行统计分析，采用χ2检验及Spearman等级相关分析，P0.05认为有统计学意义.2结果2.1胃组织ezrinmRNA和蛋白的表达EzrinmRNA在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌细胞胞质中表达信号为阳性(图1A),其阳性表达率呈递减趋势，χ2检验组间差异性有统计学意义(χ2=23.599,P