专题73制备和应用固相化酶

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1、专题73制备和应用固相化酶【基础回顾】考点内吝要求考纲解读制§和应用固相化窮II1、理解固定化麴与固走化细胞区a2、知道固走化细胞的方法3、理解实验过程试剂的作用考点一、固定化细胞技术的概念固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。考点二、固定化细胞技术常用的方法包埋法、化学结合法和物理吸附法。一般来说，酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化，细胞多采用包埋法固定化。考点三、酵母细胞的固定化及发酵程序酵叩细胞的活化一配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaC12溶液-＞配制海藻酸钠溶液一海藻酸钠溶液与酵母细胞混合一固定化酵母细胞一冲洗一发

2、酵。【技能方法】1.直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的比较S格使用筋眭化賄射作方法是§番8當《窃商侑化皮应死字坊台法因定EOBW法面定化s包埋法团定化单一戒多种单一一茱列®多种）皮破•物各沖物時吠分子sd、分子）①^坏埼条件非京®感，易失活；©难回收，成本荔，是淋1产品质壁侑化效$S、耗K低、低污染各种物R吠分子、小分子）不利子《化一系5i脱促反应①R能与反S物接賊，又能与户物分S;©可以番頁利用小分子物赓皮由物T冤与薛接近，允其是大分子扬质，g应效军下P?成$低、格作吝易1.酵母细胞的固定化方法3、海藻酸钠溶液的浓度对包埋酵母细胞数量的影响①海藻酸钠溶液浓度过高，将很难形成凝

3、胶珠。②浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少。4、海藻酸钠溶液配制注意事项①海藻酸钠溶化时要用小火或间断加热，避免海藻酸钠发中焦糊。②将溶化后的海藻酸钠先冷却至室温，再与酵母细胞混合，避免高温杀死酵母细胞。③固定化酵母细胞时，应将海藻酸钠酵母细胞的混合液用注射器缓慢滴加到CaC12溶液中，而不是注射，以免影响凝胶珠的形成。【基础达标】1.下列选项属于固定化酶技术与固定化细胞技术关系的是（）A.固定化酶技术是固定化细胞技术的基础B.固定化细胞技术是固定化酶技术的基础C.罔定化酶技术与固定化细胞技术是同吋发展起来的D.固定化细胞技术先于固定化酶技术【答案】A【解析】固定化

4、细胞技术是在固定化酶技术基础上发展起來的，故选八。2.下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是（）A.可用包埋法制备固定化酵母细胞B.反应产物对固定化酶的活性没有影响C.葡萄糖异构酶固定前后专一性不同D.罔定化细胞nJ•以催化各种反应底物的一系列反应【答案】A【解析】A项正确：细胞难以被吸附或结合，固定化细胞多采用包埋法；B项错误：反应产物积累能影响酶的结构，从而使酶的活性下降；C项错误：葡萄糖异构酶在固定前后专一性不变，都是催化葡萄糖转化为果糖；d项错误：固定化细胞固定的是一系列的酶，可以催化一系列的反应,但不能催化各种反应底物的一系列反应。1.下面制备固定化酵母细胞的正

5、确步骤是（）①配制CaC12溶液②海藻酸钠溶化③海藻酸钠溶液与酵母细胞混合④酵母细胞活化⑤同定化酵母细胞A.①②③④⑤B.④①③②⑤C.④⑤②①③D.④①②③⑤【答案】D【解析】制备固定化酵母细胞的正确步骤:酵母细胞活化一配制CaC12溶液一海藻酸钠溶化一海藻酸钠溶液与酵母细胞混合一固定化酵母细胞，故选D。2.下列关于固定化酵母细胞的制备步骤中不恰当的是（）A.应使干酵母与水混合并搅拌，以利于酵母细胞活化B.配制海藻酸钠溶液时要用小火间断加热的方法C.向刚溶化好的海藻酸钠溶液中加入已活化的酵母细胞，充分搅拌并混合均匀D.将与酵母细胞混匀的海藻酸钠溶液注入CaC12溶液中，会观察

6、到CaC12溶液中存球形或椭球形的凝胶珠形成【答案】C【解析】A项正确：应使干酵母与水混合并搅拌，以利于酵母菌活化；B项正确：配置海藻酸钠溶液时要用小火间断加热的方法；C项错误：将海藻酸钠溶液与酵母细胞混合时，需将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入己活化的酵母细胞，以避免温度过髙杀死酵母细胞；D项正确：将酵母细胞混匀的海藻酸钠溶液注入CaCl2溶液屮，会观察到CaC12溶液屮有球形或椭球形的凝胶珠形成。3.下列不属于固定化酶在利用时的特点的是（）A.有利于酶与产物分离A.可以被反复利用B.能自由出入依附的载体C.—种罔定化酶一般不能催化一系列的酶促反应【答案】C【解析】固定化

7、酶是指用物理学或化学的方法将酶与固相载体结合在一起形成的仍具有酶活性的酶复合物，在催化反应屮，它以固相状态作用于底物，反应完成后，容易与水溶性反应物和产物分离，可被反复使用，AB项错误，C项正确；能催化一系列的酶促反应是固定化细胞的优点，D项错误。【能力提升】1.下列关于使用固定化酶生产高果糖浆的说法，正确的是（）①生产高果糖浆需要使用果糖异构酶②在反应柱的顶端装上分布着许多小孔的筛板，防止异物的进入③将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，果糖溶液从反应柱的下端流出④反应柱可以降低生产成本，提高果