ghrelin在幽门螺杆菌感染儿童厌食的表达及意义

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1、Ghrelin在幽门螺杆菌感染儿童厌食的表达及意义邓敏(江丙省萍乡市妇幼保健院儿科337000)【摘要】目的研究幽门螺杆菌(Hp)感染儿童Ghrelin表达，探讨其在厌食患儿发病机制中的作用。方法Hp感染患儿60例，根据临床表现分为厌食组(n=30例)和非厌食组(n=30例)，应用RT-PCR方法检测胃粘膜GhrelinmRNA表达水平，并比较两组患儿及厌食组患儿Hp根治前后胃粘膜GhrelinmRNA表达水平的变化。结果Hp感染厌食患儿胃粘膜GhrelinmRNA表达较非厌食者低，两组比较差异有统计学意义

2、(P<0.01)，厌盘组患儿Hp根沿后GhrelinmRNA表达明显升高，与根治前比较差异有统计学意义(P<0.05),患儿食欲改善，体重增长显著。结论Ghrelin在Hp感梁厌食患儿表达降低，而根治Hp后表达升高，Hp可能通过影响Ghrelin分泌导致厌食的发生，Ghrelin可能是Hp致厌食的重要因素。【关键词】幽门螺杆菌厌盘Ghrelin【中图分类号】R378.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)29-0090-02在临床上，幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)感染

3、儿童可以没有症状，也可以表现为消化功能不良、食欲低下甚至厌食，严重者可引起患儿慢性胃炎、十二指肠炎以及消化性溃疡，甚至导致胃肠外疾病。近年来，“厌食”作为患儿重要主诉和主要症状、并由此引起患儿慢性营养不良和生长发育延缓得到更多家长和医生的重视，国外也开始研宄Hp与厌食的关系，国内还没有相关报道。木研究对象是Hp感染、具有消化功能障碍而无严重病理改变的厌食和非厌食患儿，将其进行临床对照研究，旨在阐明Hp感染患儿厌食症状与胃肠激素Ghrelin分泌的关系。材料和方法1.研究对象：1.1病人入选标准：2008年6

4、月-2010年2月期间在我院消化科门诊及病房收治的患儿。H.pylori感染者，无其他消化道症状，年龄在4-7岁之间，厌食组男18例，女12例;平均年龄(5.52±0.83)岁；病程(36±12.77)月。非厌食组男22例，女8例;平均年龄(5.38±0.76)岁；病程(34±13.51)月，患儿在年龄性组及性别构成比情况差异无统计意义(P>0.05),具有可比性。厌食组身高与体重低于非厌食组患儿，t值分别为2.13及2.39，差异有统计学意义(

5、P<0.05),见表1。1.2排除标准：严重感染，心肺肾血液系统等大脏器疾病；三月内服用可能影响H.pylori检查结果的药物(抗菌素、H2受体阻滞剂、质子泵抑制剂及铋制剂)者及皮质类固醇使用者；胃镜表现为严重胃炎，溃疡或糜烂。1.3根据厌食诊断标准分组：实验组(Hp感染的厌食患儿，30例),对照组(Hp感染非厌食患儿，30例)。厌食诊断标准：长期食欲不振，见食不贪，入食量较病前减少1/3-1/2以上，病程在2周以上，排除其他系统疾病；体重增长停滞或减，无冇不良食欲习惯或喂养不当史。厌食疗效标准：治愈

6、：临床症状消失，食量明显增加，恢复正常水平的2/3以上。好转：临床症状改善，食量略增加,但未达正常水平的2/3。无效：临床症状及食量无明显改变。1.方法2.1操作步骤：患儿首先抽血查H.pylori抗体，初筛阳性者再行胃镜下取胃窦粘膜各两块，其中一块细菌培养，进一步cagA/vacA基因检测，另一块用于检测GhrelinmRNA表达。实验组患儿根治Hp(采用PPI+两种抗生素，疗程2周)，停药一月后再胃镜下取胃窦粘膜两块,分别用于培养和GhrelinmRNA表达检测，同吋随访厌食症状及进食量，以及体格检查包

7、括身高、体重。2.2细菌培养及鉴定：采用选择性哥伦比亚血琼脂平板上培养(含5mg/LTMP、10mg/L万古霉素、2500U/L多粘菌素和2mg/L两性霉素B)，Hp鉴定包括菌落形态、过氧化氢酶试验、尿素酶实验及涂片观察形态及染色性。2.3GhrelinmRNA的表达测定：采用荧光定量RT-PCR方法。⑴总RNA提取：按照Qiagen试剂盒说明书进行所宵样本totalRNA的抽提。(2)反转录：采用Promega公司的ReverseTranscriptionSystem,在PCR仪上扩增得cDNA,Ghre

8、lin及管家基因β-actin基因序列查自Genebank,所冇引物由上海生工生物工程技术务有限公司合成，GhrelinF1:TGGAGGTCAAGCAGAAGGGRl:GCAGAAGCAAGCGAAAAGC。(3)劳光定量PCR扩增0的基因：将假定初始拷W数cDNA按5倍梯度进行稀释，制成标准模板系列。每个稀释模板中取样5ul，分别加入30ul的反应体系中，反应体系在荧光定量PCR仪上进行。40个循环