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《医学毕业论文长期摄入含贫铀的饲料对雄性大鼠的遗传毒性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、姓名，2014年6月25日长期摄入含贫铀的饲料对雄性大鼠的遗传毒性研究作者：李蓉，冷言冰，艾国平，徐辉，粟永萍，程天民【摘要】□的：大鼠长期食入一定剂量的贫铀后是否会产生遗传毒性.方法:给予初断乳大鼠含贫铀饲料，摄入的剂量分别为0,0.4,4,40mg/(kgd),4mo后，观察亲代(FOR)和子代(F1代)大鼠精子畸形率，骨髓细胞微核率的改变，用单细胞凝胶电泳法研究贫铀对精子DNA的损伤程度.结果：摄入小剂量贫铀的F0代人鼠精子畸形率和彗星细胞的各指标与正常组差异无统计学意义(P0.05).仴屮、高剂量组F0和F1代的精子畸形率、
2、骨髓细胞微核率和彗星细胞率均增加(P0.01),并与摄入贫铀的剂量和摄入时问呈一定的相关关系.结论：长期摄入一定剂量的贫铀可对大鼠产生遗传毒性.【关键词】贫铀0引言贫铀(depleteduranium,DU)是铀浓缩加工成核燃料过程中所产生的副产品，已广泛应用于民用和军事领域.从1991年的海湾战争开始，及后来的几次局部战争中，贫铀武器被大量使用，造成环境大面积污染[1-2].近年来，我国核工业及核电站建设不断发展，贫铀废料增多，在铀再处理厂和铀作业实际环境也存在贫铀污染问题.贫铀污染涉及的居民人数多，影响面广，长期摄入导致体内蓄积
3、的量较大，因此，贫铀对环境的污染及对机体的影响是一个新的值得关注的问题.讼期食入被贫铀污染的食物和饮水后，对机体产生何种损害作用，□前儿乎没有报道.因此，我们对雄性大鼠K:期给予含一定剂量的贫铀饲料，观察贫铀对遗传物质的损伤，评价贫铀遗传毒性效应，对其长期危害进行初步研究.1材料和方法1.1材料取初断乳Wistar大鼠，体质量35〜55g，雌雄各150只，将DU混合入饲料喂食乳鼠，分为小、中、高剂量组，摄入贫铀的剂量分别为0.4,4,40mg/（kgd）.另设正常组20只，摄入普通饲料.大鼠由第三军医大学大坪医院动物研究所提供【SC
4、XK（渝）2002003】.贫钏饲料的制备方法为：将DU片（铀同位素组成：238U占99.75%,235U占0.2%以及痕量234U）,加入少量浓硝酸，微热至溶解成黄色液体，用双蒸水稀释至适当体积，加入饲料粉屮，搅拌均匀，加工成型，晒干.1.2方法1.2.1DU食入染毒模型的建立乳鼠摄入贫铀，生长至4mo左右，至性成熟期，每组雌雄大鼠各取25只，按照雄雌1:1同笼，直到受乎取出单独饲养，或进行21d为止.每H18:00点同笼，次H早上检查阴拴，确定并记录受孕H期.亲代大鼠（F0）所生仔鼠为第一代（F1）.对F1大鼠继续喂饲贫铀饲料，
5、直至性成熟期，与F1代同样摄入贫铀饲料的雌鼠交配，产下F2代.下述实验均在大鼠生K:至4mo吋进行.1.2.2大鼠精子畸形试验处死大鼠，取双侧附睾，放入3mL生理盐水中，剪碎，吹打，静置，过滤，吸取精子悬液滴于载玻片上，均匀推片，晾干，甲醇固定5min,干燥后20g/L伊红染液染色1.5h,高倍镜下观察精子形态，每只大鼠检查完整精子300条，每个组至少检查1000条精子，计算精子畸变率.1.2.3大鼠讶髓微核（micmnuclei，MN）试验取双侧股骨，抽吸胎牛血清冲洗骨髓腔，制备骨髓细胞悬液.1000r/mhi离心5min后，弃上
6、清，加入等体积血清，吹打.在玻片滴一滴（5〜8（iL）骨髓细胞悬液，推片，干燥，无水甲醇固定数分钊1.用姬姆萨染液室温下染色25〜30min后取出，磷酸缓冲液冲洗，显微镜下观察.一只大鼠需观察1000〜2000个细胞，每组计数5000个嗜多染红细胞（PCE）中带MN的出现频率.计算微核细胞率（％。）和微核率（％。）.1.2.4争细胞凝胶电泳或彗星电泳取双侧附睾，放入3mLPBS缓冲液屮，剪碎，过滤，制成细胞悬液.用45°C，100pL5g/L正常熔点琼脂糖PBS凝胶浇注首层胶.取0.1mL浓度为106/mL的细胞悬液加入0.9mL3
7、7°C的低熔点琼脂糖PBS，混匀•速取75gL加到第一展胶上，制备第二M胶.将载玻片浸入4"C冷裂解液中5h.高pH碱性电泳缓冲液中浸泡20min.低温，300mA,25V，电泳30min.取出凝胶玻片，pH7.5，0.4mmol/LTris浸洗，15mM次.中和凝胶中的碱液，70
8、iL100mg/LEB溶液染色15min.激光共聚焦敁微镜下观察.统计学处理：数据分析采用SPSS12.0软件进行.对组间精子畸形率和微核率比较采用非参数秩和检验，彗星电泳结果采用ANOVA分析.2结果2.1长期摄入贫铀的大鼠精了畸形率大鼠精子畸形以头体
9、部为主，头部以无钩、无定形和呑蕉头畸形居多（图1）.小剂量组与正常组差异无统计学意义,H）代和F1代屮、高剂量组均增高，且高剂量组高于屮剂量组（P0.01，表1）.2.2长期摄入贫铀的大鼠赀髓细胞微核率摄入贫铀的大鼠与正常组比较微核率
