医学毕业论文激活lxr对海马神经元神经甾体合成的促进作用

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1、激活LXR对海马神经元神经留体合成的促进作用姓名：2014年6月25日作者：张淑坤，杨荣慧，张翠欣，姜玲玲，侯艳宁【摘要】目的：研究肝X受体(LXR)激活对海马祌经元祌经甾体合成的影响.方法：将大鼠海马神经元体外培养至第7日，在培养液中加入2.0pmol/LTO901317,继续培养48h.应用高效液相质谱联用(HPLCMS)分离测定培养液中游离型神经甾体孕烯醇酮(PREG)、脱氢表雄酮(DHEA)和结合型神经甾体孕烯醇酮硫酸酯(PREGS)、脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)的含量；RTPCR方法观察海马神经元P450侧链裂解酶(P450scc)、甾体合成快速调节蛋白(StAR

2、)和3P羟基组醇脱氢酶(3(3HSD)等神经逛体合成关键酶基因的mRNA的表达.结果：TO901317激活LXR,促进P450scc,StAR和3pHSD的mRNA表达，增加海马神经元培养液中神经甾体PREG，DHEA，PREGS和DHEAS含量.结论：LXR激活时，可通过上调海马神经元P450scc,StAR和3pHSD的mRNA表达，促进神经留体的合成.【关键词】肝X受体；P450侧链裂解酶；神经岀体；海马，神经元【Abstract】AIM:ToinvestigatetheeffectofliverXreceptor(LXR)activationonthesynthesi

3、sofneurosteriodinhippocampalneurons.METHODS:Onday7ofculture,hippocampalneuronsweretreatedwith2.0gmol/LTO901317dissolvedindimethylsulfoxidefor48h.ThemRNAexpressionsofP450sidechaincleavage(P450scc),steroidogenicacuteregulatoryprotein(StAR)and3phydroxysteroiddehydrogenase(3(3HSD)weremeasuredby

4、RTPCRandthecontentsofunconjugatedneurosteriodspregnenolone(PREG),dehydroepiandrosterone(DHEA)andconjugatedneurosteroidspregnenolonesulfate(PREGS),dehydroepiandrosteronesulfate(DHEAS)inmediumwereanalyzedanddeterminedusinghighperformanceliquidchromatographymassspectrometry(HPLCMS).RESULTS:Inc

5、ubationofhippocampalneuronswithTO901317significantlyincreasedtheexpressionsofP450scc,StARand3pHSDmRNAandthelevelsofPREG,DHEA,PREGSandDHEAS.CONCLUSION:ActivationofLXRcontributestothesynthesisofneurosteriodbyupregulatingtheexpressionsofP450scc,StARand3（3HSDinhippocampalneurons.【Keywords】liver

6、Xreceptor;P450sidechainclcavagccnzymc;ncurostcroid;hippocampus;neurons0引言中枢神经系统的胆固醇在甾体合成快速调节蛋0（StAR）的引导下被转运到线粒体内膜，然后由P450侧链裂解酶（P450scc）催化生成孕烯醇酮（PREG）,后者在3P羟基街醇脱氢酶（3PHSD）等的催化下转化成脱氢表雄酮（DHEA）,PREG和DHEA在磺基转移酶的催化下生成结合型神经体孕烯醇酮硫酸酯（PREGS）和脱氢表雄酮硫酸酯（DHEAS），发挥生物效应.体外培养海马神经元和小鼠阿尔茨海默病（AD）模型均表明，用人工合成配体TO

7、901317激活肝X受体（LXR）能增加其卜游基因ATP结合盒转运体A1（ABCA1）的表达，阻止AD发生［1-2］.本实验旨在观察LXR激活吋对海马神经元神经甾体的合成和分泌有何影响.1材料和方法1.1材料DMEM、优级胎牛血清（Hyclone公司）；L左旋多聚赖氨酸、阿糖胞苷、二甲基亚枫、TO901317（Sigma公司）；胰蛋白酶（Gibco公司）；Trizol（美国Invtrogen公司）；逆转录试剂盒（美国Promega公司）；pfuDNA聚合酶（北京Tiangen公司）；Agilent液相色