临床医学毕业论文hla-drb1基因对小儿急性肾小球肾炎的影响

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1、HLA-DRB1基因对小儿急性肾小球肾炎的影响姓名：2014年6月25日HLA-DRB1基因对小儿急性肾小球肾炎的影响作者：焦立新孙利炜刘宇奇【关键词】急性肾小球肾炎，HLA-DRB，1，基因，ssp/PCR【摘要】目的探讨急性肾小球肾炎发生及发展与HLA-DRB1等位基因的关系，寻找该病的HLA-DRB1易感基因。方法采用序列特异性引物-聚合酶链反应方法对急性肾小球肾炎患儿和正常儿童的HLA-DRB1等位基因进行分析，并分析了HLA-DRBr15基因型在急性肾小球肾炎中所起的作用。结果急性肾小球肾炎患儿HLA-DRB1"15基因频率为（16.25%）,与正常对照组

2、比较差异有非常显著性（PO.Ol）;HLA-DRBlv15型急性肾小球肾炎患儿临床症状表现重。结论HLA-DRB1基因型对急性肾小球肾炎的发生、发展有一定的影响;探讨急性肾小球肾炎的HLA-DRB1基因型对于病情预测有重要意义。关键词急性肾小球肾炎HLA-DRB1基因ssp/PCRTheinfluenceofHLAgeneonacuteglomerulonephritis【Abstract】ObjectiveTostudytherelationbetweenacuteglomerulonephritisoccurenceanddevelopmentandHLAgen

3、e，thentofindHLApredisposinggeneofthisdisease.MethodsUsingssp-PCRmethodtostudyacuteglomerulonephritispatient’sHLAgeneandassaydifferentclinicalsituationsofdifferentHLAgenetypes.ResultsThegenefrequencyofacuteglomerulonephritispatientsisl6.25%.Itissignificantlyhigherthannormalcontrolgroup(

4、PO.Ol);AcuteglomerulonephritispatientswhowasHLA-DRBT15weremoresevere.ConclusionTheoccur^renceandthedevelopmentofchildrenacuteglomerulonephritishavesomerelationswithHLA-DRB1v15.ItisimportanttostudyHLAgeneofchildrenacuteglomerulonephritisforjudgingprognosis.Keywordsacuteglomerulonephriti

5、sHLAgenessp/PCR目前公认免疫机制是大多数肾小球疾病发病机制的主要环节。其直接证据如:病变肾脏沉着有免疫球蛋白和补体成分，同时肾小球疾病病程中血清有免疫成分的异常。肾小球疾病的免疫发病机制十分复杂，有多种因素参与。对于免疫发病机制的研宄不仅有其理论意义，还可以指导疾病的防治，具有重要的临床意义。HLA即人类白细胞抗原也称人组织相容性抗原系统，是参与机体特异性免疫识别和免疫应答的主要成分［1］。我们对86例急性肾小球肾炎患者和82例健康儿童的HLA-DRB1基因进行了分型研究，以期发现免疫机制在急性肾小球肾炎的发病机制中所起的作用，现报告如下。1对象与方法

6、1.1对象观察组为86例急性肾小球肾炎患儿，男42例，女44例，年龄3〜16岁，诊断标准参照诸福棠第七版《实用儿科学》有关章节。对照组82例，男43例，女39例，年龄4〜16岁，排除肾脏疾病，体格检查及化验均未见异常。观察组与对照组均为无血缘关系的汉族儿童。1.2方法1.2.1主要试剂TaqDNA聚合酶、dNTPs均为上海复生生物工程公司产品，琼脂糖为上海东海制药厂产品。DNA片段长度标准xl74/HaCIIlMarkerS为北京鼎国生物工程公司产品。1.2.2扩增引物设计与合成引物按参考文献［2］所示，见表1，由北京赛百盛生物工程公司合成。1.2.3内对照引物参照

7、参考文献［2］在DRB1第3内含子内设计，由赛百盛生物工程公司合成，这个引物无位点序列特异性，可以作为内对照，序列如下:5'-TGCCAAGTGGAGCACCCAAA,3'-GCATCTTGCTCTGTGCAGAT;产生796bp的产物。1.2.4阳性细胞DNA由北京医科大学人民医院基因配型室馈赠。1.2.5人基因组DNA提取抽取静脉血1.0ml,2%EDTA抗凝。分离白细胞采用常规酚-氯仿方法提取DNA，然后用紫外分光光度计测其浓度。1.2.6DRB1位点的特异性PCR抗增通过SSP/PCR进行，一个标本需完成19个PCR反应，方能完成DRB1位点的分型。反应