t—spottb外周全血检测结核感染145例分析

《t—spottb外周全血检测结核感染145例分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、T—SPOT.TB外周全血检测结核感染145例分析邱素娟叶峰山（厦门大学附属第一医院检验科361000）【摘要】目的分析T一SPOT.TB检测结核感染的敏感度和特异性，其作为快速、准确的检测手段，给临床提供诊断依据，控制结核感染漫延新法。方法选择我院呼吸内科和消化内科，不能排除结核病289例，外周血检测T一SPOT.TB145例，清晨痰培养加涂片144例，对照阳性率J—SPOT.TB检测阳性率94.4%（137/145）,痰培养加涂片41.6%（60/144）,经统计学处理P<0.01,T—SPOT.TB检测优于痰培养加涂片。结果T一SPOT.TB优于痰中找结核杆菌，T一SPOT.TB

2、检测诊断，可在保持高灵性，高特异性的同时，进一步提高结核分枝检出率。结论对早期诊断可获得较好治疗效果的肺结核和肺外结核患者，该选择灵敏度高，特异性强，T—SPOT.TB快速检测有一定优势。【关键词】结核杆菌血液检测（T一SPOT.TB）痰检测方法我院从2012年1月至2012年12月，一年时间，标木来源木院呼吸内科和消化内科，按日期，随机抽样单数和偶数分为二组，单数为甲组（T一SPOT.TB）检测组145例，偶数144例为乙组（痰涂片加培养），操作流程（按全国结核病细蘭等操作规程），现将甲乙两组检测情况报道如下：一、资料与方法1性别和年龄构成:男性156例占54%，女性133例占46.

3、0%,年龄14—20岁16例占0.6%，21岁一30岁75例占29.4%,31—40岁60例占21.3%,41岁一50岁59例占20.4%,51岁一60岁30例10.3%,61岁一70岁34例占12.0%,71—80岁占0.5%。2原理：T一SPOT.TB是利用结核特异抗原（ESAT—6CFP—10）,通过酶联免疫斑点技术（EUSPOT）检测受试者，体内是否存在结核效应T淋巴细胞，从而判断目前该受试者是否感染结核杆菌（现症感染）的新方法。3方法：釆血送检（时间要求）与方法。采集外周全血，无须空腹，需用肝素/肝素锂/肝素钠抗凝，不使用EDTA抗凝，2岁以下儿童2—3ml血，其它患者，4一

4、6ml，免疫力低下，患者6—8ml,样本温度控制15—25°C,保持与运输不得冷冻/冷藏，样本采集4小吋内送到实验室，8小吋内完成检测，1周内有输血史或做PET—CT的患者会影响血液中淋巴细胞的分离，建议两周后再行检测，运输过程中防止颠簸，避免样本溶血影响结果。二、操作流程1外周抗凝全血梯度离心分离PBMCSC（外周血单个核细胞）。2结核特异抗原CESAT—6/CFP刺激结核特异的效应T淋巴细胞，使其分泌r干拢素。3效应T淋巴细胞分泌的r干拢素与膜板预包被的抗一干拢素抗体结合并固定在细胞周围。4位统的ELISA“双抗夹心法”，使抗原抗体结合物显色，形成斑点，进行对照阴性和阳性结果。三、

5、判断标准1阳性结果参照以下标准：空白对照孔斑点数为0—5个时且＜抗原A或抗原B孔的斑点数）≥量6。2空白对照孔斑点数为6-10个时且＜抗原A或抗原B孔的斑点数≥2×（空白对照孔斑点数）如果上述标准不符合且阳性质控对照孔正常吋检测结果为阴性。3影响检测结果因素阴性结果：提示患者体内不存在针对结核杆菌特异性的效应T细胞，如出现以下情况，阴性不能排除感染的可能：①因感染阶段不同（如标本是细胞免疫发生前获取的）引起的做阴性结果。②少数免疫系统功能不全，疾病的情况,如HIV感染者，肿瘤患者、儿童等。③以及其它免疫等，实验非正常操作差异。阳性结果：提示患者体内存在针对结核杆

6、菌特异的效应T细胞，患者存在结核感染。但是否为活动性结核病，需结合临床症状及其它检测指标综合判断。T一SPOT.TB结果不能作为单独的或者决定的诊断结核病依据。虽然ESAT—6和CFP—10在所有的卡介苗(BCG)菌株，以及绝大数环境分枝杆菌中缺失，但T一SPOT.TB的阳性结果冇可能是堪萨斯、苏氏、戈登或海分枝杆菌的感染引起的。四、结果按全国细菌检测等操作规程，进行甲组T一SPOT.TB外周血145例检测，乙组痰培养和涂片检查144例，通过统计学处理，T一SPOT.TB检测137/145,阳性率94.4%;痰培养加涂片60/144，阳性率41.6%,见表1。表1外周血测T—SPOT.

7、TB和清晨痰培养加涂片从表1看出经统汁学处理，卡方=92.88,P<0.01,两组检测冇差异统计意义。五、讨论结核病的实验室检査，常见的冇痰直接涂片找抗酸杆菌，以及痰培养找结核菌，血清抗体检查，PCR法，结核菌皮试法等，因吋间长，阳性稍低，无法及吋抗结核治疗，近两年来采用T一SPOT.TB检测结核分枝杆菌，得到国内外公认，特异性好，美国FDA数据，特异性97.10%(297/306),国内临床数据特异性94.10(478/508),灵敏度高，美