舒筋汤对兔膝关节挛缩模型关节功能及tgf-β1表达的影响

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1、舒筋汤对兔膝关节挛缩模型关节功能及TGF-β1表达的影响EffectofShuJinTangonJointFunctionandTGF-β1ExpressionInRabbitKneeContractureModels陈文瑶李新志*郑之和孟琳张建华于洋王宪伟(三峡大学仁和医院骨科宜昌443001)[摘要]　目的：观察舒筋汤对兔膝关节挛缩模型关节囊病理改变及关节液TGF-β1表达的影响。方法：24只大白兔按Hildebrand法固定右膝关节复制创伤后关节挛模型,造模成功后随机分为给药组、模型组和对照组（n=8)。给药组、对照组分别予以舒筋汤、正骨水溶液薰洗,模型组不予用药处理，各

2、组均辅以功能锻炼。给药3、6周末分别测量关节挛缩程度和关节液中TGF-β1含量。6周末处死动物,对关节囊厚度进行测量,Masson染色进行关节胶原纤维表达定量测定。结果：给药组较与对照组和模型组比较，在关节囊厚度、关节挛缩程度、胶原蛋白和关节液中TGF-β1的表达等方面均有差异。结论：舒筋汤辅助功能锻炼能有效减轻关节囊挛缩、恢复关节功能。其作用可能是通过减少TGF-β1的表达而实现的。[关键词]关节挛缩舒筋汤关节囊转化生长因子β1关节挛缩是创伤后常见的并发症，关节囊的改变是关节挛缩发生最主要的因素。尽管其发生的分子机制尚未完全明确，但目前的研究公认TGF-β1是关节挛缩形成的关

3、键因素，它促进肌成纤维细胞的增殖、影响胶原代谢及促进α平滑肌动蛋白(α-SMA)的合成，从而促进关节囊的纤维化，最终发生挛缩。本研究拟通过观察验方“舒筋汤”对兔膝关节挛缩模型功能恢复、关节滑液中TGF-β1表达及关节囊形态的影响，探讨舒筋汤对创伤后关节挛缩的治疗作用及初步作用机制。1材料和方法1.1主要试剂和仪器　舒筋汤（当归，红花，川断，乳香，透骨草，花椒，伸筋草，海桐皮，羌活等)来自三峡大学仁和医院药房,每包加水5000ml水煎备用；正骨水来自广西玉林制药有限责任公司,以15ml*2瓶瓶加水5000ml备用；青霉素为华北制药股份有限公司生产；氯胺酮为福建古田药业有限公司生产

4、；医用1.6mm克氏针为苏州市康力骨科器械有限公司生产；TGF-β1检测试剂盒为南京建成生物工程研究所产品。其他研究所需材料均来自三峡大学免疫学实验室。1.2动物来源及分组24只3～4个月龄雄性大耳白兔,体量2.0～2.5kg,由武汉市万千佳禾实验动物养殖有限公司提供(合格证号:0003606)。24只兔均予于造模,氯胺酮(10mg/kg)麻醉后,参照Hildebrand[1]法,即取右膝关节外侧长约2cm的纵切口,切开关节囊,在外侧副韧带上方约0.5cm处，避开负重面及髌面关节软骨，用骨凿出凿出约5mm2的骨皮质缺损面，直至骨窗面出血，以模拟骨关节损伤。关节囊不予缝合，消毒

5、冲洗后直接缝合皮肤。再选择胫骨前沿中点处切开约1cm，剥离骨膜至骨面，屈曲膝关节至150˚，手摇钻钻入克氐针从胫骨中部进入直至股骨中段穿出，注意克氏针必须从膝关节外通过，股骨前外侧切开，剪断克氏针并折弯，试活动右下肢固定牢固，常规消毒缝合（如图1）。术后自由活动，每天肌肉注射青霉素40万U/只,伤口每日观察并涂擦碘伏,连续7d直至拆线。术后第8周末，手术-------------------------------------------------------------------------------[基金项目]宜昌市2008年医疗卫生科技计划(A08302-43).S

6、upportedby2008MedicalTechnologicalPlanProjectsofYichang(A08302-43).[作者简介]陈文瑶,硕士.E-mail:yc117193@163.com*李新志，通讯作者(Correspondingauthor)，博士，副教授，硕士生导师.E-mail:Lixpj@163.com拆除内固定，麻醉后分别沿原切口切开，从股骨后侧剪断克氏针后拔出，常规冲洗缝合，术后抗菌、换药、拆线。术后后随机分为给药组、模型组和对照组(n=8)，并以对侧正常关节作为正常组。伤口愈合后于第5周开始,将家兔前肢及身体悬于铁架上，电热恒温水箱下给药组和

7、对照组分别予以43°C舒筋汤、正骨水药液浸泡治疗，双后肢膝关节上2-3cm浸泡于药液中，每日给薰洗2次，每次30分钟，薰洗过后驱赶强迫兔活动约30分钟以模拟功能锻炼，模型组不予薰洗但给予驱赶功能锻炼，共6周。1.3样本获取及各指标的检测1.3.1关节活动范围测量拆除固定后、处理三周和六周末麻醉后关节置于水平位，固定股骨及膝关节，弹簧称于兔踝关节处垂直胫骨，约0.5N的力予于关节伸展牵拉，以股骨纵轴向远端的延长线为0º，量角器测量此线与胫骨的夹角，角度越大代表屈曲挛缩程度越重。同时侧量对侧正常