一基因工程诞生的基础

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时间:2018-11-30

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1、一、基因工程诞生的基础:专题一基因工程1、理论基础:2、技术基础(“科技探索之路”)1、理论基础:DNA是遗传物质的证明;DNA双螺旋结构和中心法则的确立;遗传密码的破译。2、技术基础:基因转移载体的发现;工具酶的发现;DNA合成和测序技术的发明;DNA体外重组的实现;重组DNA表达实验的成功;PCR技术的发明。学习这部分知识后你们有什么感悟:没有基础理论的研究成果,没有技术方面的创新发明,基因工程不可能诞生,创新是科学技术发展的不竭动力。已实现的例子很多:我国培育出的抗虫棉;美国一家公司利用大肠杆菌生产胰岛素药品等什么是基因

2、工程?又称“基因拼接技术或DNA重组技术”专题一基因工程那么,什么是拼接?+可是,DNA分子的直径只有2.0nm,粗细只有头发丝的十万分之一,长度也是极其短小的,一般以µm为单位,如大肠杆菌的DNA长度为1.36µm.二、DNA重组技术的基本工具请结合刚才的拼接活动,回忆必修2学习的内容:1、切割DNA的工具(“分子手术刀”)2、DNA片段的连接工具(“分子缝合针”)3、基因转移工具(“分子运输车”)限制性核酸内切酶,功能:DNA连接酶,功能:识别特定核苷酸序列,并在特定位置切割。将DNA骨架上的缺口“缝合”-----运载体二

3、、DNA重组技术的基本工具(一)限制性核酸内切酶(限制酶)1、来源:课本中说“主要是从原核生物中分离纯化出来的”,为什么它们有这类酶?防御工具:限制酶,把外源DNA切割掉,保护自己。免疫系统?会以什么防御机制防止侵害?为了能适应环境,必需有怎样的进化?提示:原核生物很容易受到自然界外源DNA的入侵,如噬菌体侵染细菌。那怎么办?课本的“寻根问底”中问,这类酶的作用是什么?2、酶识别的核苷酸序列特点:3、如何切割DNA分子::专一性,且大多数由六个核苷酸组成。4、切割后的切口类型:(一)限制性核酸内切酶(限制酶)被限制酶切开的DN

4、A两条单链的切口,伸出的核苷酸,它们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。又如:识别GGATCC,TGGCCA,上下序列呈什么关系?(二)DNA连接酶1.酶的作用:2、酶的种类及功能区别:(1)E·coliDNA连接酶(大肠杆菌)只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来。(2)T4DNA连接酶(噬菌体)都能连接黏性末端和平末端,但连接平末端之间的效率比较低。将双链DNA分子片段的缺口“缝合”起来,恢复两个核苷酸之间的磷酸二酯键。3、DNA连接酶和DNA聚合酶的区别:DNA复制DNA聚合酶:①只能将单个核苷酸加到已有的单

5、链核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键,②需要模板。DNA连接酶:连接两个双链DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。不需要模板拼接完成后如何导入受体细胞(如受精卵、原核细胞)?基因的运载体—“分子运输车”我们一起来小结:一、基因工程诞生的基础:(一)限制性核酸内切酶(限制酶,如EcoRI等)二、DNA重组技术的基本工具1、来源:2、识别的核苷酸序列特点:3、如何切割DNA分子:4、切割后的切口类型:主要是从原核生物中专一性;大多数由六个核苷酸组成切割磷酸二脂键黏性末端、平末端(二)DNA连接酶(如E﹒coli等)1.酶的作用:2、酶的

6、种类及功能区别:有的只能连接黏性末端,有的黏性末端和平末端,都能连接,但连接平末端之间的效率比较低。3、与DNA聚合酶区别:恢复两个核苷酸片段之间的磷酸二酯键不需要模板,只连接两个双链DNA片段的末端没有基础理论的研究成果,没有技术方面的创新发明,基因工程不可能诞生.看一看,同学们学习后的情况:1、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”(1)主要来源:生物。(2)特点:能够识别DNA特定的,切开两个之间的。(3)作用结果:产生末端和平末端两种形式的DNA片段末端。原核生物核苷酸序列核苷酸磷酸二酯键黏性2、DNA连接酶——“分子缝合

7、针”(1)种类:①E·coliDNA连接酶,只能缝合DNA的_________;②T4DNA连接酶,即可缝合DNA的_________,又可缝合双链DNA的_______,但_________比较低。(2)作用:将双链“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的。黏性末端黏性末端平末端效率DNA片段末端磷酸二酯键作业:P6的模拟制作“重组DNA分子的模拟操作”疑问:在必修2,P103中有这样一句:“两种来源不同的DNA用同种限制酶切割后,末端可以相互黏合,。。。。。”是不是要实现拼接,对两种来源不同的DNA,都要用同种限制

8、酶切割?如果是黏性末端需同种限制酶切割;若是平末端不一定需同种限制酶切割

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