贻贝足丝蛋白在牙龈上皮细胞粘结中的应用分析

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1、分类号：R781.05学校代码：10392学科专业代码：100302学号：200901281福建医科大学硕士研究生毕业论文贻贝足丝蛋白在牙龈上皮细胞粘结中的应用研究ApplianceofMusselByssusProteinintheAdhesionofGingivalEpithelialCells学位类型：医学硕士所在学院：福建医科大学口腔医学院研究生：黄晓淋学科、专业：口腔临床医学导师：林实副教授研究起止日期：2010年10月至2012年1月答辩日期：2012年5月27日二○一二年五月万方数据2万方数据目录缩略词表．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

2、．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4中文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5英文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7前言．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9第一部分：牙龈上皮细胞的原代培养材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16讨论．．．．．．．．．．．

3、．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22第二部分：贻贝足丝蛋白及L-3,4-二羟基苯丙氨酸作为牙龈上皮细胞粘结剂的研究材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

4、参考文献．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40致谢．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51在学期间发表文章．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．573万方数据缩略词表（ABBREVIATIONs）英文缩写英文全称中文全称MefpMusselFootProtein贻贝足丝蛋白L-DOPAL-Dioxyphenylalani

5、neL-3,4-二甲基苯基丙氨酸PLLPoly-L-Lysine多聚赖氨酸FBSFatalBovineSerum胎牛血清K-SFMKeratinocyte-Serum-FreeMedium角化细胞无血清培养基DMEMDulbecco’sModifiedEagleMedium细胞培养基PBSPhosphateBufferSaline磷酸盐缓冲液DAPI4,6-Diamidino-2-Phenylindole二眯基苯基吲哚SEMScanningElectronMicroscopy扫描电子显微镜EGTAEthyleneGlycolbis(2-aminoethyl)乙二醇二乙

6、醚二胺四乙TetraceticAcid酸ODOpticalDensity光密度4万方数据中文摘要贻贝足丝蛋白在牙龈上皮细胞粘结中的应用研究目的随着科学技术的发展，越来越多的粘结相关材料被广泛应用于医学科学研究，并为临床科学研究作出许多重要贡献。然而，现有材料不仅在量或质方面无法满足日新月异的科学需求，且生物相容性差。因此，寻找一种行之有效、可大量生产、生物相容性好的粘结材料是目前亟需解决的问题。本研究根据贻贝能够超强粘附在各种物体表面的特性，选用贻贝足丝蛋白（MusselFootProtein,Mefp）及其粘附关键因子L-3,4-二羟基苯丙氨酸（L-Dioxyphe

7、nylalanine,L-DOPA）进行牙龈上皮细胞的粘附实验，同时对比几种牙龈上皮细胞原代培养的方法，通过观察细胞形态、绘制细胞生长曲线、测量细胞粘附量以及后续钙离子浓度的测定评价Mefp和L-DOPA对牙龈上皮细胞的粘结作用，旨在寻找一种利于牙龈上皮细胞原代及传代培养的方法，为临床进行牙龈上皮细胞的研究提供理论与技术支持。方法1.分别采用单纯Dispaes酶消化、单纯玻片覆盖组织块法以及Dispase酶消化联合玻片覆盖组织块法培养Beagle犬牙龈上皮细胞，通过观察细胞形态以及细胞生长时间，对比寻找最适细胞培养方法。2.培养皿表面分别经Mefp、