原癌基因bmi1在肺癌中的表达研究

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1、原癌基因Bmil在肺癌中的表达研宄李雪（湖北省荆州市第五人民医院呼吸内科434000）【摘要】目的检测Bmil在肺癌干细胞组织中的表达，探讨其与肺癌病理病机的关系。方法收集100例肺癌术后患者及30例正常肺组织标木，对肺癌干细胞进行培养、分离、鉴定，免疫组化SP法检测Bmil的表达并分析结果。结果肺癌干细胞组织中Bmil的表达均显著高于正常肺组织（P<0.01>,其与肺癌的分化程度及淋巴结转移有关（P<0.05）,而与年龄、组织学类型无显著关联。结论Bmil参与了肺癌的发病及进程，是探讨治疗方法的一个新

2、的突破口。【关键词】原癌基因肺癌肿瘤干细胞Bmil【中图分类号】R73-3【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）07-0100-01近年来，对于肺癌的病因病机研究越来越深入，而相关肿瘤干细胞的研宄亦为众多学者所重视，理论研究指出，若干细胞自我更新的调控机制发生紊乱，肿瘤细胞就会随之生成［1］。原癌基因Bmi-1便•有此种调节能力，且己被发现过度表达于多种恶性肿瘤内［2-3］。木研究拟观察Bmi-1在肺癌中的表达，探索其在肺癌发病中的机制。1材料与方法1.1标木的采集:选取木院2009年7月〜20

3、12年12月病理科确诊的肺癌术后标木100例，其中男56例，女54例，年龄34-76（平均52.3±2.4）岁。按WHO标准判定肺癌组织类型及分化程度：鳞癌37例、腺癌32例、小细胞癌31例；高分化29例、中分化30例、低分化与未分化41例；有淋巴结转移72例、无转移28例。以30例正常开胸取得的其他疾病中的正常肺组织作对照。排除继发、转移、放、化疗史、心、肝、肾严重疾患、孕、产妇等。1.2主要试剂：胎牛血清、DAB显色试剂盒、Bmi-1多克隆抗体、SP试剂盒等均购自湖北心潼生物科技有限公司。1.3细

4、胞的原代培养、分化及鉴定：常规漂洗、消化标本后，10%胎牛血清加入，离心并去上清液，CD133抗体超微磁珠混入，再次缓冲、离心并接种于培养基内，观察细胞贴壁情况，以CD133为标记，对培养细胞做免疫荧光染色鉴定，培养成功的干细胞制备成单细胞悬液静置备用。1.4免疫组化法检测Bmi-1的表达：按试剂盒说明书进行免疫组化SP法检测Bmi-1的表达，以PBS代替一抗做空白对照，阳性切片做阳性对照，正常肺组织做阴性对照。1.5统计学处理:采用SPSS13.0统计软件进行数据分析，以P<0.05为差异有统计学意义。2结

5、果2.1免疫荧光鉴定：免疫荧光鉴定后确认肺癌干细胞分离、培养成功,可用。2.2Bmi-1在肺癌干细胞组织及正常肺组织中的免疫组化染色：Bmi-1蛋白阳性表达主要表现为细胞质、细胞核内，均呈棕黄色颗粒样，在正常组织中表达明显较弱。2.3Bmi-1在肺癌干细胞组织及正常肺组织的表达：Bmi-1蛋白在肺癌干细胞组织中的阳性表达强度分别为43%,明显高于正常肺组织的17.85%，二者相比较，P<0.05,有显著性差异。2.4Bmi-1表达与肺癌病理征：在Bmi-1的阳性表现中，男性为22例(51.16%),女性为21

6、例(48.83%),二者相较无统计学差异(P>0.05)；鳞癌12例(27.91%)、腺癌11例(25.58%)、小细胞癌10例(23.26%)三者两两相较均无统计学差异(P>0.05);低〜未分化组11例(25.58%)高〜中分化组例32(74.42%),二者相较有显著统计学差异(P<0.01);有转移组16例(37.21%),无转移组例27(62.79%),二者相较有统计学差异(P<0.05)3讨论迄今为止，对于肺癌的病因、病机的研究尚无完整的定论，随着日新月异的科研发展进步，以及肿瘤干

7、细胞学说的深入探索，学者们发现越来越多的疾病与干细胞分化、增殖的自我调节失控密切相关。Bmi-1属于Polycomb家族的原癌基因成员，它本身即具有协同癌基因引起细胞恶性转化、拮抗肿瘤抑制基因、减少细胞凋亡以及维持肿瘤干细胞自我更新及肿瘤干细胞团块大小等功能。而大量文献亦冇报道，高表达Bmi-1的细胞被认为是肿瘤中存在的“肿瘤干细胞”，VrzalikovaK等[7】研究发现Bmi-1蛋白水平在非小细胞肺癌中表达增高。在本研究中笔者发现，Bmi-1蛋白阳性表达主要染色部位为细胞质与细胞核内，免疫组织化学呈棕黄色染色；

8、在Bmi-1的阳性表达标本中，肺癌干细胞组织中的表达率明显高于正常肺组织，差异有显著统计学意义(P<O.Ol);在研宄中我们还发现，Bmi-1与肺癌的分化程度及淋巴结转移有关，在高分化以及转移了的肺癌组织中呈现更高的表达率，II差异具有统计学意义(P<0.05>,与之相较，Bmi-1则并未呈现出与性别以及肺癌的组织类型之间的关系，组间比较差异无统