菟丝子黄酮干预雷公藤多苷对原代培养卵巢颗粒细胞分泌雌二醇的影响

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1、寃丝子黄酮干预雷公藤多苷对原代培养卵巢颗粒细胞分泌雌二醇的影响黄芳1白玉华2王艳丽3丁樱4（通讯作者）（1郑州人民医院儿科450000）（2内蒙古市市国际蒙医医院儿科010000）（3山东省青岛市屮西医结合医院泌尿内科266000）（4河南屮医学院第一附属医院儿科450000）【摘要】R的：探讨雷公藤多苷对雌性生殖毒性的机制及补肾屮药的防护作用机理。为临床安全有效的应用雷公藤多苷提供科学参考依据。方法：取4周龄SD雌性幼鼠，采用血清药理学的方法，分别制备雷公藤多苷组、雷公藤多苷加六味地黄丸组、雷

2、公藤多苷加菟丝子黄酮组含药血淸，并设空0组。卵巢颗粒细胞，预培养后分别与四组血清在体外共同培养，收集培养液，用放射免疫方法检测其作用12h、24h、48h时大鼠卵巢颗粒细胞的雌二醇（E2）分泌量。结果：放射免疫结果显示，空Q组与雷公藤多苷组分泌雌二醇比较，148h有极显著性差异（P<0.01）,12h、24h、48h中药干预两组均较雷公藤多苷组増加,黄酮组高于六味组，三个时点统计学分析，黄酮组与雷公藤多苷组相比有显著性差异（P<0.05）；结论：雷公藤多苷对体外培养的卵巢颗粒细胞具有

3、一定的影响。菟丝子黄酮能明显促进雌二醇的分泌，从而干预实验性SD幼鼠雷公藤多苷所致生殖损伤。【关键词】大鼠颗粒细胞雌二醇雷公藤多苷血清药理学【中图分类号】R242【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2014）07-0125-01本实验采用六味地黄丸、菟丝子（有效成分菟丝子黄酮）与雷公藤多苷合用，研究其对原代培养幼年大鼠卵巢细胞分泌雌二醇的影响，从而探讨雷公藤多苷对雌性生殖毒性的机制及补肾屮药的减毒作用机理，为临床安全有效的应用雷公藤多苻提供科学依据。1.材料与方法1.1实验动物：3周

4、龄SD雌性幼鼠34只，体重体重50±10g左右，许可证号：SCXK（豫）2005-0001o购于河南省实验动物中心。1.2实验药物：（1）雷公藤多苻：江苏美通药业有限公司提供奋效成分，常温密封保存。（2）六味地黄丸：河南宛西制药有限公司提供，批号：Z41022128,购于河南中医学院第一附属医院。（3）菟丝子黄酮：陕西昂威生物医药科技奋限公司提供，规格：10%,生产批号：20070914。1.3主要试剂及仪器：（1）试剂：碘雌二醇放免试剂盒：100T，深圳拉尔文生物公司提供，批号：

5、WS1-（R-34）-2004Z。（2）仪器：全自动高压火菌器：型号ALPCL-32L,日本ALP公司生产。倒置生物显微镜：型号DMIL，德国莱卡公司产品。1.4实验方法1.4.1人fet含药血清的制备1.4.2SD幼鼠卵巢颗粒细胞的分离培养1.4.3体外培养大鼠卵巢颗粒细胞分泌雌二醇的检测1.4.4统计学分析所有数据均经SPSS13.0统计软件进行统计学分析。2.结果2.1卵巢颗粒细胞的形态观察培养24h内贴壁，48h在倒置显微镜下观察活性良好的卵巢颗粒细胞展幵程度不完全相同，扁平多角形中间有

6、圆形细胞核，细胞彼此紧密相连形成单层膜。2.2含药血清对SD幼鼠卵巢颗粒细胞分泌雌二醇的影响表-112h、24h、48h后各组卵巢颗粒细胞培养上清液雌二醇浓度（pg/ml）（n=6，x-±S）组别样本数12h24h48h1.23±0.236多苷组60.168±0.1170.278±0.1420.622±0.305★女六味组60.273±0.1390.473±0.1770.873±0.2

7、16黄酮组60.597±0.262*0.980±0.27*1.083±0.389A注：各组与空闩组比较*P<0.05,**P<0.01;补肾中药组（黄酮组与六味组）与多苷组比较APCO.OS，△△P<0.01，黄酮组与六味组比较<0.05,☆☆P<0.01。1.讨论雷公藤为卫矛科植物。雷公藤多苷是从卫茅科植物雷公藤根提取精制而成的一种毒性较大的脂溶性成分混合物，其生理活性是由多种成分（二萜内酯、生物碱、三萜等）协同产生，即保留了雷公藤生药的免疫抑制等作用

8、，又去除了许多毒性成分，是0前临床上常用的中成药制剂。寃丝子为旋花科草本植物寃丝子的成熟种子，辛、甘，平，入肝、肾二经,有补肾固精，养肝明0之功效。现代医学研究菟丝子的化学成分中黄酮类为主要成分。药理研究具有壮阳、调节内分泌、抗衰老、抗氧化等作用。在菟丝子的生殖内分泌作用研宄方面，发现它能促进下丘脑-垂体-性腺功能［1］,提高垂体对促性腺激素释放激素的反应性。在雌性人鼠和小鼠，菟丝子黄酮提取物表现冇雌激素样活性，能增加成年大鼠腺垂体、卵巢和子宫的重量，增强卵巢HCG/LH受体功能。在去卵巢大鼠，