2型糖尿病模型db-db小鼠胰岛b细胞超微结构观察

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1、2型糖尿病模型db/db小鼠胰岛B细胞超微结构观察【摘要】目的：观察2型糖尿病动物模型－C57BL/KsJ(db/db)小鼠的胰岛B细胞超微结构变化，探讨B细胞的病理改变在2型糖尿病发病中的作用。方法：分别选取3月、5月和8月龄尾静脉空腹血糖高于11.1mmol/L，且肥胖的db/db自发性糖尿病小鼠，每组5只作为糖尿病组；选取相应年龄段尾静脉空腹血糖低于6.0mmol/L，体重正常的db/+m表型正常小鼠，每组5只作为对照组。于相应年龄段取胰尾，透射电镜观察胰岛B细胞超微结构。结果：B细胞胞浆内的分泌颗粒数量明显减少，有的细胞甚至缺如，致

2、密芯电子密度降低；线粒体数量减少，肿胀变形，粗面内质网不同程度扩张脱颗粒；细胞核不规则，染色质边集浓染；细胞间髓样小体增多，其严重程度随病情进展逐渐加重。结论：2型糖尿病动物模型db/db小鼠胰岛B细胞存在超微结构的病理改变，严重程度与病情的轻重有关，B细胞功能上的缺陷可能是2型糖尿病的一个重要因素。【关键词】糖尿病；2型；B细胞；超微结构；胰岛　　AbstractObjective：ToinvestigatetheultrastructuralchangesofthepancreaticisletB-cellsofdb/dbdiabeti

3、cmice.Methods:Thetestgroupselected3，5and8month-olddb/dbmice.Theage-matcheddb/+mmiceice.ThepancreaticisletB-cellsissionelectronmicroscope.Results：InsularB-cellstructureofdb/dbmousebersofsecretorygranuleinB-cellcytoplasmberseicreticulumatinarginalandcondensing.Myelin-bodiesb

4、etsthatthepancreaticisletB-cellsshoice，andultrastructuralchangeofB-cellsisrelatedtothedegreeofdiabetesmellitus.　　Keyellitus；Type2；Betacells；Ultrastructure；pancreaticislet　　糖尿病是严重威胁人类健康的以慢性高血糖为特征的代谢性疾病，而2型糖尿病（T2DM）又占本病的95％，其发病机制多认为是由胰岛素抵抗和B细胞功能缺陷引起。B细胞功能缺陷是2型糖尿病的不可缺少的重要因素。有

5、关B细胞功能缺陷的研究，多集中在B细胞增殖、再生和死亡引起其数量动态变化方面及各种功能指数，如胰岛素释放实验、稳态模型、高血糖钳夹技术等评价B细胞功能方面〔１〕。而有关2型糖尿病自然病程中B细胞形态学研究的报道少见。本研究以遗传性肥胖型2型糖尿病动物模型C57BL/KsJ(db/db)小鼠为研究对象，观察了小鼠发病期间的B细胞超微结构变化，探讨B细胞的病理改变在T2DM发病中的作用，为糖尿病的治疗和发病机制提供形态学基础。　　1材料和方法　　1.1动物与分组　　实验动物由河北医科大学组织胚胎学教研室提供。糖尿病组：分别选取3月、5月和8月龄

6、db/db自发性糖尿病小鼠，每组5只，尾静脉空腹血糖高于11.1mmol/L，且肥胖。对照组：选取相应年龄段db/+m表型正常小鼠，每组5只，尾静脉空腹血糖低于6.0mmol/L，体重正常。　　1.2方法　　每月测空腹血糖1次，称体重1次，于相应月龄，2.5%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，Karnovsky's固定液灌注固定，开腹取胰尾组织，切成约1mm3的小块，浸入Karnovsky's液中固定，1%四氧化锇后固定，梯度酒精逐级脱水，Epon812包埋，半薄切片，于光镜下找到胰岛后，莱卡UCT超薄切片机切片，切片厚50nm，切片用醋酸铀和柠檬酸

7、铅双重染色，日立H-7500型透射电子显微镜观察并摄片。　　2结果　　2.1正常组B细胞电镜观察　　B细胞胞浆内有大量的分泌颗粒，为圆球形，较大，外包以界膜，颗粒内有电子密度不一的芯，芯多为圆形，少数可见矩形或不规则的芯，界膜与芯之间的间隙较大，明亮，清晰。胞浆内线粒体、粗面内质网和高尔基复合体丰富而发达。细胞核较大，呈圆形或卵圆形，核膜光滑（见图1）。　　2.2糖尿病组B细胞电镜观察　　B细胞结构呈渐进形变化，随着血糖的增高，B细胞结构受损加重（图2～图5）。3月龄时，B细胞结构与正常相似，胞浆中分泌颗粒形态改变不大，数量略减少。5月和8

8、月龄时，形态结构变化明显：胞浆中分泌颗粒明显减少，有的细胞甚至缺如，致密芯密度明显减低；线粒体数量减少，肿胀变形，内质网不同程度扩张，可见脱颗粒现象；胞核小而不规则，核膜凹凸不平