维生素d2对哮喘大鼠肺组织il-4及icam-1影响 (1)

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1、目录缩略词表………………………………………………………………3中文摘要………………………………………………………………4英文摘要………………………………………………………………61.前言………………………………………………………………92.实验材料…………………………………………………………112.12.22.3实验动物………………………………………………………11药物及试剂制备………………………………………………11仪器与设备……………………………………………………123.实验方法………………………………………………

2、…………133.1大鼠哮喘模型建立标本的留取与保存…………………………133.2BALF上清中IL-4含量测定……………………………………143.3BALF沉淀细胞计数及分类………………………………………153.4肺组织石蜡切片制作…………………………………………163.5肺组织标本ICAM-1的测定……………………………………173.6统计学分析………………………………………………………184.结果………………………………………………………………184.1各组大鼠BALF上清中IL-4含量比较…………………………1

3、84.2各组大鼠BALF中细胞计数分类…………………………………1914.3各组大鼠肺组织ICAM-1阳性细胞表达比较……………………205.讨论…………………………………………………………………236.结论…………………………………………………………………287.参考文献……………………………………………………………30附录……………………………………………………………………33致谢……………………………………………………………………34综述及参考文献………………………………………………………352中英文缩略词表英文缩写

4、VDVD2VDRSDAHROVABALFPBSELISAODHEIgEThICAM-1LFA-1IL-4IFN-γTNF-αICSGINA英文全称vitaminDvitaminD2vitaminDreceptorSprague-DawleyratsAirwayHyperreactivityOvalbuminBronchoalveolarlavagefluidPhosphate-bufferedsolutionenzyme-linkedimmunosorbentassayOpticaldensityHematoxylin-

5、eosinImmunoglobulinEThelperIntercellularadhesionmoleculeLymphocytefunctionassociatedantigen-1Interleukin-4Interferon-γTumornecrosisfactor-αInhaledcorticosteroidsGlobalInitiativeforAsthma中文全称维生素D维生素D2维生素D受体Sd大鼠气道高反应性卵清蛋白支气管肺泡灌洗液磷酸盐缓冲溶液酶联免疫吸附试验光密度伊红-苏木精免疫球蛋白ET辅助细胞细

6、胞间粘附分子淋巴细胞功能相关抗原-1白细胞介素-4γ-干扰素肿瘤坏死因子-α吸入性糖皮质激素全球哮喘防治会议3维生素D2对哮喘大鼠肺组织IL-4及ICAM-1的影响中文摘要目的:哮喘是一种由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞、T淋巴细胞、嗜中性粒细胞、气道上皮细胞及多种细胞组分参与的慢性气道炎症反应性疾病,免疫调节在哮喘发病过程中有重要作用,维生素D在免疫调节中的作用越来越受到重视,研究发现维生素D对Th1/Th2平衡有调节作用,本实验通过维生素D2对哮喘大鼠模型进行干预,比较各组试验大鼠肺泡灌洗液中IL-4水平、肺泡

7、灌洗液中细胞计数及分类、肺部ICAM-1的表达,探讨维生素D在哮喘大鼠的抗炎作用及其可能机制。方法:按照随机分组的原则,将30只SD雄性大鼠随机分组成3组,分别为哮喘组、维生素D2组、对照组,每组10只。(1)哮喘组:于第1、8、15天分别给予无菌腹腔注射10%OVA1ml(内含卵蛋白100mg及氢氧化铝100mg)致敏,自第16天开始置于密闭雾化罐中用1%OVA雾化吸入激发,持续雾化1周,每天激发30分钟致其出现呼吸急促、喘息或呼吸困难。(2)维生素D2(VD2)组:诱喘方法同哮喘组,从5照组:以生理盐水代替OVA和维生

8、素D2。在末次激发后24小时内处死大鼠,收集肺组织及肺泡灌洗液(BALF)。将BALF离心后分离上清及沉淀细胞,并将肺组织经脱水透明、石蜡包埋等处理后制作成肺标本切片。运用Elisa方法对BALF上清中白细胞介素4(IL-4)水平进行测定,以及用改良牛氏计数台对BALF沉淀细胞进行计数并将沉淀细胞涂片染

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