酶联免疫法检测配方奶粉乳铁蛋白含量研究

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1、酶联免疫法检测配方奶粉乳铁蛋白含量研究摘要：购买进口婴幼儿奶粉是国人的习惯，但对进口奶粉的质量缺乏正确的认识。为此，采用酶联免疫方法对超市等地销售的进口奶粉中的乳蛋白含量进行测试，乳铁蛋白是奶粉的主要营养成分。我国相关法律将乳铁蛋白定义为婴儿营养强化剂，具有提高婴儿免疫力、抗病毒并且促进吸收的作用。乳铁蛋白的特征以及酶联免疫法的具体检测方法。中国2/vie　　关键词：酶联免疫法；婴幼儿配方奶粉；乳铁蛋白；进口奶粉；研究　　中图分类号：TB　　文献标识码：A　　doi：10.19311/j.ki.1672319

2、8.2016.31.090　　母乳是婴儿获取营养最好的方式，母乳中含有一定量的乳铁蛋白可以确保婴幼儿健康。但就现状而言，母乳匮乏。因此奶粉喂养就成为主流，婴幼儿奶粉的市场巨大。但由于国内奶粉频频出现问题，国人购买进口奶粉的欲望强烈。但进口奶粉是否真的安全，还需要数据来证明。以母乳为标准，婴幼儿奶粉的主要成为应为乳铁蛋白。调查显示，很多进口奶粉中的乳铁蛋白含量较低，无法满足婴儿的营养的需求。酶联免疫法是检测奶粉中营养成分的主要方法，因此文章采用这一方法对一定数量的奶粉进行了检查，并公布了乳铁蛋白含量。　　1乳铁

3、蛋白的特征以及酶联免疫法　　乳铁蛋白是婴幼儿哺乳中不可缺少的一种元素，主要成分为非血红素和天然蛋白糖。人类第一次用固相和液相色谱法分离乳铁蛋白是在1959年，乳铁蛋白对婴儿的免疫系统强化具体积极意义，同时能够抗病毒和促进婴儿吸收。母乳中乳铁蛋白的含量丰富，用于赖以生存的营养元素。但是随着母乳哺乳水平的降低，奶粉应运而生。检验奶粉中乳铁蛋白含量是十分重要的，一般要求，乳铁蛋白的含量要在1-7ml以上才符合要求。随着社会对于乳铁蛋白的认可，在奶粉中添加乳铁蛋白已经成为一种趋势，食品中添加乳铁蛋白也得到法律的支持。

4、我国在法律上也将乳铁蛋白定位为奶粉等食物中营养的强化剂，并对含量做出基本要求。我国主要奶粉进口国包括澳大利亚、新西兰、荷兰和瑞士等，这些国家的奶制品质量较高，但由于对乳铁蛋白的含量要求不同，因此对进口乳铁蛋白的检测是必要的。目前，我国应用较为广泛的乳铁蛋白检测方法为免疫扩散检测法或者酶联免疫法。我国对于国外奶粉的检测较为严格，对由于缺乏对数量合理性的认定，检测结果还存在一定的疑问。至2012年起，我国相关部门就开始对婴幼儿奶粉质量上提高可关注，通过定期试验的方法来检测进口婴幼儿奶粉中的乳铁蛋白含量，并形成报告

5、，但唯一的缺陷是，虽然民众对于乳铁蛋白的作用以及进口奶粉中乳铁蛋白含量的要求尚不明确，因此我们以文献的形式研究检测结果。　　2酶联免疫法使用的准备阶段　　酶联免疫法是目前婴幼儿配方奶粉营养成分检测的主要手段，具有较好的效果。检测中所使用的样品为16种市面上热销的婴儿奶粉，本次检测主要检测奶粉中乳铁蛋白的含量。产品来自美国、新西兰等16个国家，其中奶粉的罐体上都有具体的含量标识，范围在5～100mg/100g之间，我们通过该方法检测其真实性。所选的检测仪器为全自动酶仪包被有抗牛乳铁蛋白（LT）的特异性多克隆抗体

6、96孔微孔板，配合洗涤液和缓冲溶液，乳铁蛋白标准品和乳铁蛋白-过氧化物酶结合物，另外还包括1mol/L磷酸终止液，目的就是检验出进口婴幼儿配方奶粉中乳铁蛋白的含量。将溶液稀释后冷藏于2～8℃之间。稀释溶液的配置选择1ml浓缩洗液和4ml蒸馏水，同样冷藏于2～8℃环境中。取适量实验所需的元素，包括氯化钠、氯化钾、磷酸钠等。将其溶于蒸馏水中，并将其调整微碱性，最后配置成1L的该浓度溶液备用。将奶粉样品称好后放于准备好的容器中，本次实验称取质量为1.00g的奶粉样本，将其按照标准稀释之后进行检测，检测后将乳蛋白的含

7、量公布，尤其是对不符合规定的产品进行惩罚。　　3酶联免疫法检测方法的实施　　在本次检测中，我们采用平行检测的方法，将各自100升的溶液加入到微孔中，在不接触两种样品的同时添加100l酶的结合物，1h避光孵育后，进行3次洗板，在每孔中加入底物100lTMB，室温控制在（21℃±3℃，孵育时避光进行10min，在每孔中加入终止液50l后，采取酶标仪在450nm条件下读取吸光值。取选取的6种进口奶粉各1.0g作为样品。使用PBS溶液300ml稀释到要求浓度。本次检验中的结果采用标准的曲线显示，显示结果中，有近三成进

8、口婴幼儿配方奶粉的乳铁蛋白的含量不达标，提醒国民要注意选取。　　4酶联免疫法检测进口婴幼儿配方奶粉中乳铁蛋白含量研究　　本次研究我们采取标准曲线法对16种进口奶粉中的乳铁蛋白进行研究和报告。采用方法为液相色谱法与电泳法相结合。并以4-参数法绘制标准曲线。　　在检测过程中，我们在本次实验过程中，发现不同品牌的奶粉乳铁蛋白含量具有较大的区别，即使在同一种产品中，同样存在不同的乳铁蛋白含量，因此国家要加大