褪黑素对噪声应激大鼠肝损伤的保护作用及其机制论文

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1、褪黑素对噪声应激大鼠肝损伤的保护作用及其机制论文【摘要】目的：探讨褪黑素（MT）对噪声应激大鼠肝损伤的保护作用及可能机制.方法：将40只雄性SD大鼠随机分为5组：空白对照组、模型1组、模型2组、实验1组、实验2组，每组8只.实验组和模型组分别在应激前30min腹腔注射MT(15mg/kg)和等体积生理盐水.以56式冲锋枪射击时产生的120dB（A）的脉冲噪声，对实验组及模型组大鼠进行连续噪声刺激.噪声应激后，观察MT对各组大鼠血浆中皮质醇、超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA）以及肝组织匀浆中SOD，MDA的影响.结果：肝脏病理检查显示模型组大鼠出

2、现明显的病理性损伤,实验组大鼠损伤程度明显减轻；模型组大鼠血浆皮质醇、血浆及肝组织匀浆的MDA浓度较空白对照组显著升高，血浆及肝组织匀浆SOD活性显著降低(P0.01)，实验组大鼠血浆皮质醇的浓度、血浆及肝组织匀浆的MDA浓度较模型组显著降低.freela公司）；超氧化物歧化酶（SOD）测试盒、丙二醛（MDA）测试盒（南京建成生物工程研究所）；皮质醇测试盒（北京北方伟业发展有限公司）.XH2060型全自动γ免疫分析仪(中国核工业部西安二六二厂).1.2方法1.2.1动物给药将40只雄性SD大鼠在7d环境适应期后随机分为5组：空白对照组、模型1组、模型

3、2组、实验1组、实验2组，每组8只，模型组及实验组给予每日120dB（A）噪声连续应激8h，第1组应激1d，第2组应激3d，每次噪声刺激前30min根据分组,实验组腹腔注射MT(15mg/kg)，模型组腹腔注射等量生理盐水.1.2.2枪击噪音应激模型的建立［3］大鼠禁食12h后置于隔音室内，用56式冲锋枪射击时产生的噪音制成录音，通过扬声器由电脑控制随机播放，扬声器距离大鼠20～30cm.采用国营红声器材厂生产的ND2型精密声级计及频谱分析仪分析检测，控制噪音强度为120dB（A），频率为0.25～4.00kHz.1.2.3血液中皮质醇含量、SOD活性

4、及MDA含量的测定各组大鼠应激结束后，麻醉，开胸取血4mL，其中2mL加入100g/L乙二胺四乙酸钠30μL和抑肽酶40μL的离心管中，混匀，于4℃，3000r/min离心10min，离心半径12cm，分离血浆，-20℃下保存待测定.采用放射免疫法测定血浆中皮质醇含量.操作程序严格按照试剂盒及仪器说明书由1人完成检测.另外2mL血液于3000r/min离心10min，离心半径12cm，吸取上清液，-20℃下保存待测定.严格按照试剂盒说明书进行操作，测量SOD活性及MDA含量.1.2.4肝组织匀浆中SOD活性及MDA含量的测定取血后，将大鼠处死，取肝脏组

5、织洗去残血并吸干水分，用天平称取1g肝脏组织，用生理盐水配置成100g/L组织匀浆.于3000r/min离心10min，离心半径12cm，吸取上清液，-20℃下保存待测定.严格按照试剂盒说明书进行操作，测量SOD活性及MDA含量.1.2.5肝组织的病理学检测将部分肝组织洗去残血并吸干水分，放入40g/L甲醛溶液中4℃保存，送第四军医大学西京医院病理科做病理学切片检查.统计学处理：所有数据均以x±s表示，结果采用SPSS10.0统计软件进行方差分析,均数间的多重比较用LSDt进行显著性检验.2结果2.1各组大鼠血浆皮质醇的变化空白对照组、模型1组、模型

6、2组、实验1组、实验2组血浆皮质醇浓度分别为（0.95±0.10）,（1.99±0.08）,（2.59±0.09）,（1.27±0.14）,（1.63±0.09）.模型1组、模型2组大鼠血浆皮质醇均较空白对照组显著升高（P0.01），实验1组较模型1组显著降低（P0.01），实验2组较模型2组显著降低（P0.01）.2.2各组大鼠血浆及肝组织匀浆SOD，MDA的变化模型1组及模型2组显著低于空白对照组（P0.01，表1），实验1组较模型1组显著升高（P0.01），实验2组较模型2组显著升高（P0.01）.各组大鼠血浆肝组织匀浆MDA水平比较，模型1组及

7、模型2组较空白对照组显著升高（P0.01），实验1组较模型1组显著降低（P0.01或0.05），实验2组较模型2组显著降低（P0.01）.表1MT对噪声应激大鼠血浆肝组织匀浆SOD，MDA的影响（略）bP0.01vs空白对照组；dP0.01vs模型1组；fP0.01vs模型2组.2.3各组大鼠肝脏组织形态学模型组比实验组肝脏组织明显充血水肿，有较多炎细胞浸润，肝小叶结构受到破坏，细胞形态不规则，有部分肝细胞变性（图1）.其中模型2组较模型1组严重.实验1组、实验2组肝细胞损伤明显减轻.3讨论应激是机体在受到各种因素刺激时所出现的一些非特异性反应，而下丘

8、脑垂体肾上腺皮质激素系统(HPA轴)是应激系统的重要组成部分［4］，机体主要是通过HPA轴