阳性血培养瓶里“失踪”的肺炎链球菌

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1、阳性血培养瓶里“失踪”的肺炎链球菌[摘要]目的探讨如何鉴定阳性血培养瓶里“失踪”的肺炎链球菌（Streptococcuspneumoniae，S.pn）。方法采用靶向DNA测序（16SrRNA基因扩增）的方法最后鉴定出“失踪”的细菌。结果“失踪”的细菌被鉴定为肺炎链球菌。结论依据靶向DNA测序（16SrRNA基因扩增）鉴定可及时、准确鉴定出因自溶死亡的肺炎链球菌，启示微生物检验程序中血培养报阳后应立即涂片、转种平板，并结合血培养生长曲线、涂片染色结果作进一步的分析等，以提高血培养的阳性检出率，有利于减少漏报及误报的发生。中国6/vie

2、　　[关键词]16SrRNA；测序；肺炎链球菌；自溶　　[中图分类号]R446.5[文献标识码]A[]1674-4721（2017）01（c）-0126-03　　[Abstract]ObjectiveToexplorehooniaeinpositivebloodcultureflask.MethodsBytargetedDNAsequencing（16SrRNAgeneamplification），thedisappearedbacteriumoniae.ConclusionBytargetedDNAsequencing（16SrRN

3、Ageneamplification）identificationcandetecttheStreptococcuspneumoniaedeadduetoautolysis.Itisindicatedthatintheprocessofbacteriologicalexamination，smearandtransmissiontoplatebinedearresultsofbloodcultureareperformedrightaearstaining，furtheranalysisisneededinordertoincreas

4、epositivedetectionrateofbloodcultureandreduceoccurrenceofreportinfailandmistake.　　[Keyoniae；Autolysis　　血流感染（bloodstreaminfection，BSI）是一种严重的全身感染性疾病，包括菌血症和败血症，是致病菌或条件致病菌侵入血液中生长繁殖并释放毒素和代谢产物而引起的急性重症感染性疾病，其发病率和致死率都较高[1]。全球每年约发生200000例BSI，病死率为20%～50%，是最严重的感染性疾病之一[2]。美国每年约有750

5、000例患者患血源性感染，导致215000例死亡，是美国第十大死因，占总死亡人数的6%[3-4]。在儿童患者中，革兰阳性菌引起的BSI病毒死率达19.2%，革兰阴性菌引起的BSI病死率为45.2%，真菌菌血症则为35.8%。在医院感染中，BSI占15%，不仅延长了患者的住院时间，还增加了患者的经济负担[2]。　　血培养是临床判断患者BSI的最重要依据[1]。所以实验室对阳性血培养瓶分离鉴定出病原菌，对临床感染性疾病的诊断起了决定性的作用。目前血培养病原菌的鉴定主要依赖转种分离得到纯菌后，才可进一步做细菌的鉴定。对于一些苛养菌、固体培养

6、基不生长细菌的鉴定就比较困难，提高警惕，以防漏报、误报。现将本室在血培养检测工作中的1例阳性血培养瓶中细菌的神秘“失踪”后的辗转鉴定过程报道如下。　　1资料与方法　　1.1一般资料　　2016年4月，患者男，65岁，肿瘤科新入院肺癌患者，不规则发热1周余，偶有咳嗽、喘憋、呼吸增快、呼吸困难等，入院查体，体温38.3℃，血常规：g/L，降�}素原9.66mg/ml，抽取单瓶血需氧培养送微生物室做检查（本微生物室尚未开展厌氧培养）。　　1.2检测用仪器、试剂　　仪器：VersaTREK-96全自动血培养仪（美国TREK公司）；Olympu

7、sCX21显微镜（奥林巴斯公司）；CO2培养箱WJ-Ⅲ-50B型（上海跃进医疗器械有限公司）；普通培养箱WS2-134-65型（上海跃进医疗器械有限公司）；3730XL测序仪（ABI公司）等。　　试剂：血平板（广州迪景微生物科技有限公司）、巧克力平板、麦康凯平板（法国梅里埃）等；快速革兰染液、抗酸染液（珠海贝索公司）、瑞氏染液（杭州天和微生物试剂有限公司）；需氧血培养瓶（美国TREK公司配套）；肺炎链球菌抗原检测试剂（美国BinaxNOW公司）。　　1.3质量控制　　革兰染色采用省临检中心提供的质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923

8、、大肠埃希菌ATCC25922标准菌株分别做阳性、阴性质控对照，其他项目室内质控都在控。　　1.4接收标本后鉴定流程