胃癌中cks1、p27kip1和skp2蛋白的表达论文

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1、胃癌中Cks1、p27Kip1和Skp2蛋白的表达论文赵勇,高建飞,饶智国,欧武陵,朱宇泽,杜光祖【摘要】目的探讨Cks1在胃癌发生及其在Skp2调节p27Kip1降解过程中的作用。方法应用流式细胞术测定正常胃粘膜和胃癌组织中Cks1、p27Kip1、Skp2蛋白表达。结果胃癌组织中Cks1、Skp2表达明显高于正常胃粘膜﹙χ2=22.69,P<0.05;χ2=13.42,P<0.05﹚,而p27Kip1表达则低于正常胃粘膜﹙χ2=14.83,P<0.05﹚。胃癌中Cks1、Skp2表达与p27Kip1表达呈

2、负相关﹙r=-0.649.freell加入两只小试管,PBS液洗涤一次,离心,弃上清,试管内加入兔抗人Cks1(或p27Kip1、Skp2)荧光多克隆抗体10μl,对照试管加入PBS,混匀,4℃孵育30min,PBS洗涤一次,离心,清除多余未结合抗体后上机检测。每1标本检测10000个细胞。Cks1(或p27Kip1、Skp2)阳性率=试管中Cks1(或p27Kip1、Skp2)阳性细胞数-阴性对照阳性细胞数/10000×100%。设阳性率≥10%为阳性表达,阳性率≥30%为高表达1。1.3统计学处理采用SP

3、SS10.0统计分析软件进行χ2检验和Spearman等级相关分析,P0.05为有显著性差异。2结果2.1Cks1、p27Kip1、Skp2的表达胃癌组织中Cks1、Skp2阳性率明显高于正常胃粘膜组织(χ2=22.69,P<0.05;χ2=13.42,P<0.05),而p27Kip1阳性率则低于正常胃粘膜组织(χ2=14.83,P<0.05),见表1。表1Cks1、p27Kip1、Skp2在不同胃组织标本中的表达注:组间比较P<0.05胃癌组织中Cks1表达与癌组织分化程度相关,低、未分化组Cks1表达阳性

4、率明显高于高、中分化组(χ2=5.05,P<0.05),而与胃癌患者年龄、性别、肿瘤浸润深度、淋巴结转移和临床分期不相关(P>0.05),见表2。2.2胃癌中Cks1表达与Skp2、p27Kip1的关联性64例胃癌组织根据Cks1、Skp2蛋白表达情况分为三组:Cks1、Skp2同时高表达21例;Cks1、Skp2同时低表达27例;Cks1高表达、Skp2低表达或Cks1低表达、Skp2高表达16例。21例Cks1、Skp2同时高表达者18例p27Kip1低表达;27例Cks1、Skp2同时低表达者23例p2

5、7Kip1高表达。胃癌组织中Cks1、Skp2表达均与p27Kip1蛋白表达负相关﹙r=-0.649,r=-0.732,P<0.05﹚,但有6例Skp2蛋白与p27Kip1蛋白同时高表达,4例Skp2蛋白与p27Kip1蛋白同时低表达;而Cks1蛋白表达与Skp2蛋白缺乏相关性(P>0.05)。3讨论本研究显示胃癌组织中Skp2表达明显高于正表2胃癌中Cks1表达与临床病理因素的关系(%)类别例数Cks1P年龄(岁)>603574.3(26/35)≤602972.4(21/29)P>0.05△性别男3473.

6、5(25/34)女3073.3(22/30)P>0.05△分化程度高+中分化3661.1(22/36)低+未分化2889.3(25/28)P<0.05※侵袭深度T1+T23271.2(23/32)T3+T43275.0(24/32)P>0.05△淋巴结转移有3177.4(24/31)无3369.7(23/33)P>0.05△临床分期Ⅰ+Ⅱ3568.6(24/35)Ⅲ+Ⅳ2979.3(24/35)P>0.05△组间比较△P0.05,※χ2=5.05,P<0.05常胃粘膜,而p27Kip1表达则低于正常胃粘膜;胃

7、癌组织中Skp2蛋白与p27Kip1蛋白负相关。这一结果支持p27Kip1、Skp2参与了胃癌的发生及Skp2参与了p27Kip1泛素化降解过程的推论。但本实验还发现10例Skp2,p27Kip1同时高表达或Skp2,p27Kip1同时低表达。Doa等5发现将Cks1、Skp2单独转染细胞时Cks1并不能使p27Kip1的水平下降,而Cks1、Skp2同时转染细胞可致p27Kip1降解,通过siRNA抑制Cks1的表达可使p27Kip1表达增加,并可抑制肿瘤细胞生长。而Masuda等6研究发现Cks1、Skp

8、2同时转染细胞并不使p27Kip1mRNA水平降低,而是降低了p27Kip1蛋白水平,这再次证明了Cks1、Skp2可能共同参与了p27Kip1蛋白的泛素化降解过程。本研究发现胃癌组织中Cks1表达明显高于正常胃粘膜,Cks1的表达与肿瘤分化程度相关,这说明Cks1可能参与了胃癌的发生,Cks1蛋白表达增多,使得胃癌细胞脱离了原有的正常生长周期调控,呈无节制生长状态,Cks1表达越多,细胞分化程度越

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