天麻复方降压胶囊中天麻有效成分提取工艺研究论文

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1、天麻复方降压胶囊中天麻有效成分提取工艺研究论文陈陆马超英李芬邓月婷蒋合众【摘要】目的考察影响天麻降血压有效成分的提取因素。方法采用单因素比较法和正交设计法对天麻降压有效成分的提取工艺进行优选。结果确定天麻的提取工艺为：用12，10，6倍量70%乙醇为提取溶剂，提取3次，前2次提取时间为1h，后1次为30min。结论该实验确定的天麻提取工艺方法合理，稳定可行。【关键词】天麻素多糖正交实验天麻为兰科植物天麻GastrodiaelataBl.的干燥块茎，传统上作为止痛、镇静剂用于治疗癫痫、眩晕、风湿、高血压病等疾病［1］。现代研究表明.freell，采用超声、

2、冷凝回流和70℃浸渍的方式提取1h，提取液纱布过滤后定容至1000ml，按照“2.3”项下方法测定浸膏收得率、天麻素含量和天麻多糖含量。结果见表1。结果表明，冷凝回流对天麻的提取效率最高，实验采用此方式。2.2提取工艺的正交实验研究2.2.1因素水平的选择以对提取效果影响最显著的因素：醇浓度（A）、溶剂量（B）、提取次数（C）、提取时间（D）4个因素进行考察，各取3个水平，进行L9（34）正交实验，以浸膏收率、多糖含量、天麻素含量为指标进行综合评分，并结合生产成本、生产周期等因素综合评价，优化天麻提取工艺。实验以25g为研究量，因素水平设计见表2。表1提

3、取方式考察表2因素水平2.2.2正交实验方法与结果取天麻粗粉按表2设定的正交实验方案冷凝回流提取。各组提取液纱布过滤后，均浓缩至100ml，再加水定容至1000ml，作为供试品。按照“2.3”项下方法测定浸膏收得率、天麻多糖含量和天麻素含量。结果见表3。由正交实验结果可知，影响提取效果的因素顺序为：C（提取次数）＞A（醇浓度）＞B（溶剂量）＞D（提取时间）。极差结果为A1＞A2＞A3,B1＞B2＞B3,C1＞C2＞C3,D1＞D3＞D2,直观分析确定最佳提取工艺为：A1B1C1D1。鉴于D1和D3对实验影响程度相近，考虑实际生产成本，可将提取时间（D）由

4、2h调整为1h；同时药物第3次提取时药物有效成分已大量渗出，可缩短提取时间，减少溶剂用量。综合考虑，将工艺优化为：用12，10，6倍量70%乙醇为提取溶剂，提取3次，前2次提取时间为1h，后1次为30min。2.2.3验证实验按照“2.2.2”项确定的最佳工艺和优化工艺进行验证实验。结果见表4。表3正交实验结果综合加权评分由公式:Y=Y1`+Y2`+Y3`=20×Y1/9.97+60×Y2/0.457+20×Y3/4.04计算而得。浸膏收率以平均值9.97%计为20分，高于9.97%仍计20分，天麻素含量以最高0.457%计为60分，多糖含量以最高4.0

5、4%计为20分表4验证实验结果验证实验结果表明，优化工艺与最佳工艺结果相近，且优化工艺的实验结果重现性良好。2.3相关指标的测定2.3.1浸膏收率的测定从已定容至1000ml的提取液中量取200ml（相当于生药5g），移入已干燥至恒重的蒸发皿中，70℃水浴浓缩至干，放入105℃烘箱干燥6h，取出，置干燥器中冷却30min后，取出，精密称重，计算浸膏收率。2.3.2苯酚-硫酸法测定天麻多糖含量［3］对照品溶液的制备：精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品1.070g，置1000ml容量瓶中加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（1.07mg/ml）。标准曲

6、线的绘制：精密量取对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0,6.0ml，分别置50ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取上述溶液各1ml，置锥形瓶中，分别加入蒸馏水2ml，6.25%苯酚溶液1ml，混匀，迅速加入硫酸5ml，摇匀，倒入具塞试管中，置沸水浴加热15min，取出，冷却至室温，以第1份为空白，在492nm的波长处测定吸光度。以吸光度（A）为纵坐标，葡萄糖对照品浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，得标准曲线方程为A=0.0062C+0.0039，相关系数为r=0.9993,线性范围为21.4～128.4μg/ml。样品的测定：精密

7、量取天麻提取液样品10ml，置100ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀，取1ml，置锥形瓶中，分别加入蒸馏水2ml,6.25%苯酚溶液1ml，混匀，迅速加入硫酸5ml，摇匀，倒入具塞试管中，置沸水浴加热15min，取出，冷却至室温，在492nm处测定吸光度，计算天麻多糖含量。2.3.3HPLC法测定天麻素的含量色谱条件：色谱柱为HypersilBDSC18柱（200mm×4.0mm，5μm）；流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）；流速0.8ml/min；检测波长220nm；柱温30℃；进样量6μl。对照品溶液的制备：精密称取天麻素对照品1.8mg，置

8、25ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得天麻素对照品溶液（72μg/ml