头孢吡肟对医院分离的革兰阴性杆菌的体外抗菌活性的四种方法学评价论文

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1、头孢吡肟对医院分离的革兰阴性杆菌的体外抗菌活性的四种方法学评价论文.freele）是第四代头孢菌素的代表药物，对大多数革兰阳性和阴性菌，对肠杆菌属、克雷伯菌、奇异变形菌、铜绿假单胞菌、金葡菌等均具有较强的抗菌活性，具有广谱、低毒等特点，有良好的药动学性质［1］。国外资料显示头孢吡肟对第三代头孢菌素敏感或耐药的肠杆菌科细菌均具有较强的抗菌活性［2］。文献报道，头孢吡肟是策略性替换第三代头孢菌素的首选药物［3］。目前测定头孢吡肟体外抗菌活性常用的有几种方法:用作定性的纸片扩散法和定量的稀释法（包括琼脂稀释法和肉汤稀释法），其中琼脂稀释法被作为

2、标准参考方法，但因操作复杂费时主要用于新药体外药效学研究;商品化的自动化细菌鉴定药敏系统可进行体外抗菌活性测定.freell的菌液，使用和仪器快速接种法相同批次的鉴定药敏板。以上几种方法均按照美国临床实验室标准化研究所（CLSI/NCCLS）2004年版的规定操作［5］。头孢吡肟快速接种法接种后，用MICROSCANICROSCAN快速接种法使用质量合格的鉴定药敏板，出厂前均经过校定，在本实验室每批次的鉴定药敏板均用标准菌株（大肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853）进行质控，仪器的使用严格按照生产厂家的说明书操作。标

3、准浊度法每次使用浊度仪经空白和4×108CFU/ml菌液校正。1.4结果判读标准按照CLSI/NCCLS（2004年）判读结果。2结果2.1琼脂稀释法301株临床常见革兰阴性杆菌对头孢吡肟的总敏感率为78.1%，大肠埃希菌的敏感率为93.8%，肺炎克雷伯菌为96.8%，铜绿假单胞菌为82.4%，不动杆菌为70.1%，阴沟肠杆菌为82.7%，嗜麦芽寡养单胞菌为41.2%（表1）。2.2琼脂稀释法与其它三种方法比较分别用琼脂稀释法、纸片扩散法、标准浊度法和MICROSCAN快速接种法测定头孢吡肟对301株革兰阴性杆菌体外敏感性。以琼脂稀释法为

4、标准方法，其它三种方法与其结果不一致的菌株数分别为:纸片扩表1株革兰阴性杆菌对头孢吡肟的敏感率2.3琼脂稀释法与其它三种方法的统计学比较计算三种方法与琼脂稀释法的结果符合率分别为:纸片扩散法99.0%，标准浊度法98.3%，MICROSCAN快速接种法95.3%。建立χ检验，计算三种方法与标准参考方法结果有无统计学差别（表3）。纸片扩散法和标准浊度法与参考方法结果无统计学差异，MICROSCAN快速接种法与参考方法结果有统计学差异。将三种方法与标准参考方法的符合率两两比较，结果显示，纸片扩散法和标准浊度法两者与参考方法的符合率均高于MIC

5、ROSCAN快速接种法，但它们两者间无统计学差异。表2琼脂稀释法与三种方法的结果比较3讨论头孢吡肟是在我国第一个上市的第四代头孢菌素类药物，对临床常见的革兰阴性杆菌有较好的抗菌活性，它与青霉素结合蛋白亲和力强，具有抗菌谱广、杀菌活性强等特点，是目前除碳青霉烯类抗生素外临床控制革兰阴性杆菌感染的有效抗生素之一。本实验选择301株临床常见革兰阴性杆菌，包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽寡养单胞菌等。采用琼脂稀释法获得的301株革兰阴性杆菌药敏结果显示，菌株对头孢吡肟的总敏感率为78.1%，其中对肺炎克雷伯

6、菌、弗氏柠檬酸杆菌和荧光恶臭假单胞菌几乎100%敏感，对铜绿假单胞菌的敏感性也较高，与文献报道一致。头孢吡肟对铜绿假单胞菌的抗菌活性明显优于第三代头孢菌素，与妥布霉素联合治疗可提高对铜绿假单胞菌分离株的杀灭能力［6，7］。实验显示，在我院头孢吡肟对肠杆菌科细菌和非发酵菌具有较好的体外抗菌活性。采用琼脂稀释法分析结果提示，我院分离的革兰阴性杆菌对头孢吡肟的总敏感率为78.1%，上海瑞金医院为80%，均与文献报道较接近［8］。ESBL阴性大肠埃希菌对头孢吡肟的敏感率为93.8%，亦与北京协和医院及北京医院接近。本研究标本中未包括ESBLs产生

7、菌。目前认为，对产ESBL的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌而言，头孢吡肟和第三代头孢菌素一样，与ESBLs间存在着明显的接种物效应（inoculumeffect），即在ESBL产量较高时，药物抗菌活性明显降低，故头孢吡肟对高产ESBLs菌株感染并非安全有效［9，10］。按照CLSI/NCCLS2005年版药敏规则，高产ESBL菌无论体外药敏结果如何，第三代、第四代头孢菌素均应报告耐药情况。我院采用的MICROSCAN快速接种法操作简单快速，直接挑取菌落充分混匀于生理盐水后倒于鉴定药敏板，其中挑取菌落这一环节易出现人为

8、偏差，菌落的大、小将直接影响药敏的结果。标准浊度法采用质量合格的鉴定药敏板，准确调制1×108CFU/ml的菌液，结果显示与参考方法无统计学差异，符合率达98.3%，证明偏差原因主要在于挑取菌