前列腺癌转移相关基因cd44的表达及意义

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1、前列腺癌转移相关基因CD44的表达及意义作者：陈炜陈凌武丘少鹏戴宇平郑克立梅骅【关键词】前列腺癌【摘要】目的探讨标准型CD44s及变异型CD44v6在前列腺癌mRNA水平的表达与前列腺癌生物学行为的关系。方法用RT-PCR方法，检测了CD44s及CD44v6在38例前列腺癌组织中mRNA水平的表达。结果正常与增生前列腺组织均显示了CD44sRT-PCR产物482bp带型，未出现CD44v6带型。C期以内的前列腺癌组织有13例（13/19，68.4%），D期有6例（6/19，31.5%），CD44sRT-PCR产物显示了482bp的带型

2、。正常人及增生组织与癌组织CD44smRNA水平的表达差异有显著性（χ2=9.815，P<0.05）。C期以内与D期的前列腺癌组织在CD44smRNA水平的表达差异有显著性（χ2=8.376，P<0.05），D期的前列腺癌有14例（14/19，73.7%），C期以内有5例（5/19，26.3%）出现了CD44v6片段。CD44v6的阳性表达在D期与C期以内的前列腺癌之间存在统计学差异性（χ2=19.023，P<0.01）。5例C期以内出现CD44v6表达者，有3例在18～24个月相继出现骨转移。结论转移性前列腺癌组织

3、中CD44s表达的下调及出现CD44v6表达可作为前列腺癌转移的参考指标。关键词前列腺癌CD44基因转移抑制基因逆转录聚合酶链反应ExpressionofCD44inmRNAlevelinprostatecarcinoma【Abstract】ObjectiveTostudytheexpressionofCD44inmRNAlevelinprostatecarcinoma.MethodsExpessionofstandardCD44anditsvariant6alprostateandBPHyieldedaprominentCD44sR

4、T-PCRproductat482bp，butRNAlevelbeˉtRNAlevelbetetastasisonths.ConclusionDoayindicatemetastasisofprostatecancer.Keyareversetranscriptasepolymerasechainreaction前列腺癌的转移是一个复杂的过程，为探讨前列腺癌的生物学行为，我们对标准型及变异型CD44在前列腺癌中mRNA水平的表达进行了研究，报告如下。1材料与方法1.1一般资料收集前列腺癌标本38例，年龄59～86岁，平均年龄68.3岁

5、。临床分期B期以内3例，C期16例，D期19例;病理分级:低分化腺癌23例，中分化腺癌10例，高分化腺癌5例。全部行睾丸切除去势治疗，3例B期以内者行前列腺癌根治手术。病例随访12～36个月，每3个月复查1次PSA、直肠指检及直肠B超，必要时复查全身骨扫描;随访结果:27例存活，其中9例术后12～18个月出现症状加重，加用辅助治疗或放疗;失访6例，死亡5例。1.2方法1.2.1标本收集标本为经直肠B超引导下的穿刺或手术标本，标本尽快于半小时内置入-80℃低温冰箱内保存，准备行RT-PCR研究。以手术切除的前列腺增生标本20例及10例源

6、于尸检的正常前列腺组织作为对照。1.2.2RT-PCRRNA抽提:用GIBCOBRL公司的TRIZOL试剂盒进行RNA抽提。按试剂盒说明进行RNA抽提，总RNA经紫外线分光光度计定量，分光光度计测量A260/A280比值<1.6，琼脂糖凝胶电泳出现18s及28s带。cDNA合成:取5μl总RNA，逆转录反应体系为20μl，按操作说明合成cDNA。PCR反应:取cDNA5μl加入PCR反应体系，上游引物Primer1:5′-TCCAGGCAACTCCTAGTAGTACAA0.2μl;下游引物Primer2∶5′-CAACTGTCC

7、CTGTTGTCGAA0.2μl，反应体积为26μl，循环参数为94℃1min，55℃1min，72℃1min，共35个循环。所得产物经2.5%琼脂糖凝胶电泳，溴乙锭荧光染色，测算各条带的分子量。1.2.3结果分析PCR扩增产物经2.5%琼脂糖凝胶电泳，溴乙锭荧光染色，CD44smRNA阳性者可见482bp条带。1.2.4统计学方法采用χ2检验及四格表精确概率法（Fisher’sexacttest）进行显著检验，P<0.05为差异有显著性。2结果RT-PCR结果:10例正常及20例增生组织抽提的RNA均显示了18s及28s带;3

8、8例癌组织也出现了明显的18s及28s带，说明RNA抽提较满意。正常及增生组织均显示了CD44sRT-PCR产物482bp带型。C期以内的癌组织有13例（13/19，68.4%）CD44sRT-PCR产物显示了482bp