肿节风药材中反丁烯二酸提取工艺的研究

《肿节风药材中反丁烯二酸提取工艺的研究 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、肿节风药材中反丁烯二酸提取工艺的研究陈磊李远赵中流田薇【摘要】　　目的以肿节风药材为原料，并用RP-HPLC(反相高效液相色谱)外标法进行含量测定。方法在单因素试验的基础上，选取提取溶剂、提取方法和提取液pH值这3个因素进行了3因素2水平的正交试验，进而筛选出最优的水平组合。结果提取肿节风药材中反丁烯二酸的最佳提取工艺是：提取液pH值为4.0；提取方法为微波提取5.0min；提取溶剂为70％乙醇溶液。结论实验结果为确定肿节风药材中反丁烯二酸提取工艺提供了实验依据。【关键词】肿节风提取工艺反丁烯二酸正交实验　　Abstract：ObjectiveTodeterminetheconten

2、tofthefumaricacidHerbaSarcandraebyRPHPLC.MethodsOnthebasisofthesinglefactorexperiment,threefactorsethod,PHvalue,thentheoptimalbinationsoflevelsalbinationsoflevelsofextractedfumaricacidfromHerbaSarcandraeicroinutes,andthepHvaluearicacidfromHerbaSarcandrae.　　Keyaricacid;Orthogonaltest　　肿节风HerbaS

3、arcandrae(英)为2005版《中国药典》第Ⅰ部收载品种，为金粟兰科Chloranthaceae植物草珊瑚Sarcandraglabra(Thunberg)Nakai的干燥全株〔1〕。现代药理和毒理研究表明肿节风具有抗菌消炎、抑制流感病毒、抗肿瘤、促进骨折愈合及镇痛等多种活性〔2～4〕。其中，有机酸类成分反丁烯二酸具有抗菌消炎的药理活性〔5〕。目前，在质量控制上针对肿节风药材的含量测定指标共有3个。即异秦皮啶、反丁烯二酸和总黄酮〔5〕。这些化学成分(或有效部位)已经药理实验证明具有一定的抗菌、消炎、止痛或抗肿瘤活性。资料表明，《中国药典》和部颁标准中肿节风药材及其制剂的质量控制

4、指标多为单一成分。此外，已有的研究资料表明,对肿节风及其制剂化学成分的定性定量分析虽有较多报道，但单独针对肿节风药材中的反丁烯二酸提取工艺进行研究的尚未见报道。因此，通过不同工艺方法来提取肿节风药材中的反丁烯二酸，并应用HPLC法测定其含量，然后分析不同方法对含量测定结果的影响，进而确定最佳提取工艺，可以为肿节风药材质量控制提供依据。　　1器材　　肿节风药材，市售（浙江省临安市益寿堂药店），产于长江以南各省；95%乙醇，丙酮均为分析纯（衢州巨化试剂有限公司），甲醇为一级色谱纯（天津市四友精细化学品有限公司），乙腈为特级色谱纯（天津市四友精细化学品有限公司）；对照品为反丁烯二酸（≥99

5、％），含量测定专用；POm×250mm)；流动相为0.08％磷酸乙腈（9:1,V/V）；流速0.6ml/min；柱温为室温；检测波长220nm。　　2.1.2样品溶液的制备准确称取0.15g肿节风药材粉末加75%乙醇30ml，置50ml锥形瓶中→（加浓HCl,调节pH值）→冷浸8～9h→提取→抽滤→恒温水浴中，浓缩蒸干→加甲醇（色谱纯）溶解，转移至10ml容量瓶，定容→0.45μm微孔滤膜过滤→即得样品溶液　　2.2实验方案　　2.2.1单因素实验　　提取溶剂对样品溶液中富马酸含量的影响:按照“2.1.2”项样品溶液制备的工艺流程，改变提取溶剂进行实验，不调pH值，并采用超声提取法

6、，提取时间为1.5h；提取溶剂分别为：水、丙酮、70％乙醇；制备样品溶液，并计算样品溶液中的反丁烯二酸含量。　　提取方法对样品溶液中富马酸含量的影响：按照“2.1.2”项样品溶液制备的工艺流程，改变提取方法，提取溶剂为70％乙醇，不调pH值；提取方法分别为：超声提取1.5h，索氏提取4h（提取前不冷浸）；制备样品溶液，并计算样品溶液中的反丁烯二酸含量。　　2.2.2正交实验设计〔7〕　　根据文献资料和单因素实验的结果，选取了以下3个因素：提取溶剂、提取方法、提取液pH值，并按照正交实验表L4(23)进行正交实验。　　3结果　　3.1样品　　中反丁烯二酸的含量测定结果反丁烯二酸标准品的

7、HPLC检测结果见图1。　　3.2方法　　学考察线性关系实验：精密称取反丁烯二酸0.06g加甲醇定容至25ml容量瓶，摇匀，用移液管从中移取1ml，加甲醇定容至100ml容量瓶，摇匀，再用移液管分别移取该溶液1，5，10，15，20ml，并分别加甲醇，定容至25ml容量瓶，摇匀，即得不同浓度的对照品。　　分别吸取不同浓度的对照品进样10μl，计算回归方程。结果显示：回归方程为Y＝1.964×105X，r=0.9981。表明反丁烯二酸对照品溶液在0～23.4