扇贝多肽对实验性脑缺血大鼠缺血性半暗带bcl22 蛋白表达的影响

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1、扇贝多肽对实验性脑缺血大鼠缺血性半暗带Bcl22蛋白表达的影响【关键词】扇贝多肽;缺血半暗带;蛋白质,Bcl22蛋白;大鼠　　〔摘要〕目的探讨扇贝多肽(PCF)对大鼠脑缺血半影区内Bcl22蛋白表达的影响。方法应用线栓法制作CAO)模型，MCAO模型大鼠随机分为PCF治疗组、蒸馏水组和模型组。免疫组织化学法测定脑组织缺血半影区Bcl22蛋白的表达。结果PCF组脑缺血半影区Bcl22蛋白则呈过表达，与模型组及蒸馏水组相比差异有非常显著性(q=38.08、41.69，P0.01)。结论PCF能防止大鼠

2、脑缺血后缺血半影区内神经元的凋亡。　　〔关键词〕扇贝多肽;缺血半暗带;蛋白质，Bcl22蛋白;大鼠　　EffectofpolypeptidesfromchlamysfarreriontheexpressionofBcl22proteinsintheischemicpenumbrainratsaftercerebralischemia　　〔Abstract〕ObjectiveTostudytheeffectofpolypeptidesfromchlamysfarreri(PCF)ontheexpre

3、ssionofBcl22proteinsintheischemicpenumbrainratsaftercerebralischemia.MethodsTiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)andreperfusion.Theratslydividedintothreegroups：MCAOmodelgroupslydividedintoPCFgroup，distilled2icpenumbrainedbyimmunochemicaltechnique.Result

4、sTheexpressionofBcl22proteininthePCFgrouparkedlyhigherthanthatofthedistilled2apoptosisinischemicpenumbrainrataftercerebralischemia.　　〔Keychlamysfarreri;ischemicpenumbra;protein，Bcl22;rats　　抗氧化剂在脑缺血损伤修复过程中的重要作用已得到人们的共识，现已有多种药物上市。但海洋活性物质尤其是肽对预防脑缺血发生的研究较

5、少。扇贝多肽(PCF)是一种以海洋生物工程技术从扇贝废弃物中提取纯化的含有4种组分的肽类活性物质，其相对分子质量为800～1000〔1〕。本实验采用免疫组织化学的方法检测PCF在体内对脑缺血半暗带Bcl22蛋白表达的影响。现将结果报告如下。　　1材料与方法　　1.1大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型的建立成年CAO模型。24只MCAO模型大鼠随机分为PCF治疗组、蒸馏水组和模型组，每组8只。PCF治疗组术前2天腹腔注射体积分数0.1的扇贝多肽0.1ml/kg，每日1次，再灌注前15min加注1次

6、;蒸馏水组术前2天腹腔注射双蒸馏水0.1ml/kg，每日1次，再灌注前15min加注1次。　　1.2标本采集将各组大鼠灌流固定后置头颅于立体定位仪上，于前囟前2mm到后囟取脑组织，常规石蜡包埋。7μm厚连续冠状切片用于免疫组化的测定。　　1.3Bcl22蛋白的检测采用免疫组化的方法进行检测。Bcl22免疫组化试剂盒均购自北京中山公司。应用VI2DAS221显微图像处理系统测定各组缺血半影区相同位置的免疫反应产物吸光度(A)值。　　2结果　　PCF治疗组缺血半暗带Bcl22蛋白呈过表达，与模型组及蒸

7、馏水组相比，差异有非常显著性(q=38.08、41.69，P0.01)。见表1。　　表1大鼠脑顶叶缺血半暗带Bcl22蛋白的表达（略）　　注：PCF组与模型组和蒸馏水组比较，q=23.80、41.69，P0.01　　3讨论　　脑缺血时体内产生大量的氧自由基，而抗氧化剂可通过清除自由基、提高抗氧化酶等有效地阻断或防止氧自由基对神经元的损伤〔3〕。PCF是一种肽类活性物质，其在体外的抗氧化和凋亡作用已经得到证实〔4〕，本文是在体内实验中验证PCF的抗凋亡作用。目前关于脑缺血半暗带的发生机制有许多学说，

8、但近几年大多数学者的研究主要集中在神经元凋亡上。1982年Kirino〔5〕首次报道了脑缺血后海马CA1区神经元的选择性易损性和迟发性神经元死亡(DND)现象。而现在许多学者经过研究认为，脑缺血中神经元凋亡在迟发性神经元死亡中扮演着重要的角色〔6〕。Krajeiddlecerebralarteryocclusionyinrats.Stroke，1989，20：84.　　3王平，顾振纶，周文轩，等.心脑通胶囊对实验性脑缺血的保护作用.中成药，2000，22(9)：636.　　4王春波